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    求膨化玉米中淀粉糊化度的檢測方法

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    樓主
    發表于 2012-8-20 14:52:07 | 只看該作者 回帖獎勵 |倒序瀏覽 |閱讀模式
    如題,求膨化玉米中淀粉糊化度的檢測方法。
    有誰在檢測這個項目的,請將檢測方法和相應的試劑、儀器分享下,先行謝過了!
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    沙發
    發表于 2012-8-21 11:21:23 | 只看該作者
    這個有國標的阿
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    板凳
    發表于 2012-8-21 14:04:29 | 只看該作者
    sdfda

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    地毯
    發表于 2012-8-21 14:37:36 | 只看該作者
    漂過
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    5
    發表于 2012-8-22 08:32:41 | 只看該作者
    α糊化度的測定
    目前,α化度的測量方法有雙折射法、膨脹法、染料吸收法、酶水解法、粘度測量法及淀粉透明度測量法等。不同的測定方法。得到的α化度值會有相當大的差異,這是由于測定基礎和基準等不同,產生差異是必然的。當前比較公認的方法是酶法,其次是染料吸收法中的碘電流滴定法。酶法又分為淀粉糖化酶法、葡萄糖淀粉酶法及β-淀粉酶法等,其基本原理都是利用各種酶對糊化淀粉和原淀粉有選擇性的分解,通過對生成物的測量得到準確的α化度。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;(一)&nbsp;葡萄糖淀粉酶法&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;通常,糊化淀粉容易被淀粉酶消化,因此可用消化相對百分&nbsp;率來準確計算α化度。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;1.&nbsp;儀器與試劑&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;攪拌器,玻璃均質器,1~2ml移液管,恒溫水浴,臺式離心機。99%乙醇,2mol/L醋酸緩沖液(PH4.8),10mol/L氫氧化鈉,2mol/L醋酸,2.6&nbsp;3u/ml葡萄糖淀粉酶液,0.025mol/L鹽酸。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;2.&nbsp;測定步驟&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;試樣的調制:試樣&nbsp;20g(或&nbsp;20ml),加入&nbsp;200ml&nbsp;99%的乙醇,投入高速旋轉的家用混合器中連續旋轉&nbsp;1min,使之迅速脫水。生成的沉淀用&nbsp;3號玻璃過濾器抽濾,用約50m199%的乙醇,接著用50ml乙醚脫水干燥后,放在氯化鈣干燥器中,以水力抽濾泵減壓干燥過夜,用研缽將其輕輕粉碎,仍保存在同樣的干燥器中備用。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;操作:將100mg上述的干燥試料放入磨砂配合的玻璃均質器中,加8ml蒸餾水,用振動式攪拌機攪拌至基本上均勻為止。接著將均質器上下反復幾次,使之成為均勻的懸浮液。再用振動式攪拌機均勻化,隨即各取懸浮液2ml注入2只容量為20ml的試管中,分別用作被檢液和完全α化檢液。向被檢液試管加&nbsp;2mol/L醋酸緩沖液(pH4.8)&nbsp;1.6ml和水0.4ml,而往完全α化檢液試管添加&nbsp;10mol/LNaOH溶液0.2ml,在證實已于室溫下完全溶解之后,加2mol/L醋酸&nbsp;1.6ml(醋酸的添加量需預先通過試驗決定,其量為使pH調至4.8時所用的醋酸量)。最后加水使容量為4ml。將這2只試管放在37℃的恒溫槽中預保溫數分鐘后,添加酶液lml(2.63u),每隔10~15min振蕩一次,共反應60min。然后,得反應液&nbsp;0.5ml加入預先放有10ml&nbsp;0.025mol/L鹽酸(起停止反應的作用)的錐底離心管中,上下振蕩數次,在轉速為3000r/min的離心機中分離10min。取上層清液0.5m1,用蒸餾水稀釋1倍,用Somogyi-Nelson法(見后)或適當的方法定量還原精,并從下式求出α化度:&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;市售的玻璃均質器磨砂配合是硬性的配合,需用150或400目的金剛砂來調節配合。均質器的配合,以在干燥狀態下磨砂配合棒能緩慢地自然落下者為好。葡萄糖淀粉酶用的是內孢霉或黑曲霉的粗酶。酶活力以在pH4.8的醋酸緩沖液(0.2mol/L)中,在37℃能將0.2%的可溶性淀粉生成1μg分子葡萄糖的酶量作為1個單位(U)。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;(二)Somogyi~Nelson法&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;試劑:25g無水碳酸鈉,25g酒石酸鉀鈉,20g碳酸氫鈉,200g無水硫酸鈉加入800ml水中,使之溶解并定容成&nbsp;1L。必要時則需過濾。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;B.30g結晶硫酸鈉(CuSO4·5H2O)溶于200ml含4滴濃硫酸的水中。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;C.25g鉬酸銨溶于&nbsp;450ml預先添加&nbsp;21ml濃硫酸的水中。&nbsp;3g砷酸氫二鈉(Na2HAsO4·7H2O)溶解于25ml水中,并將此溶液慢慢地加入不斷攪拌下的上述水溶液中,然后稀釋至500ml。將此溶液置于55℃水浴上小心保溫30min,或在37℃放置過夜。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;取上述經酶液處理過的完全α化的檢液和被檢液各0.5ml,分別用蒸餾水稀釋&nbsp;l倍后,加到新配制的&nbsp;1.0mlD液中,(&nbsp;1.0mlB波加到25mlA液中)總容積為2.0ml。混合液在沸水中放置20min,接著用冷的流水冷卻5min,然后加入1.0mlC試劑,使其充分混合,直到混合液已不放出CO2氣為止。靜置10min后,用水稀釋至25ml。用裝上綠色濾光片的比色計測定,或用分光光度計測定520nrn波長處的光密度。用麥芽糖作標準曲線,參比溶液為&nbsp;lml經均質器攪拌均勻后的試樣溶液加&nbsp;lml0.04mol緩沖溶液及2ml水的混合液。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;(三)碘電流滴定法&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;糊化淀粉能與碘結合成螺旋狀復合物,生淀粉則不能。此法就是將試樣在懸浮液和完全α化的溶液狀態,通過電流滴定法測定碘的結合量,從兩者之比來求糊化度的方法&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;1.&nbsp;儀器與試劑&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;攪拌器,玻璃均質器,10ml移液管,恒溫水浴,滴定管,電流計。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;99%乙醇,乙醚;&nbsp;lmol/L&nbsp;HCI,0.5mol/L&nbsp;KOH,&nbsp;0.4mol/L&nbsp;KI,&nbsp;0.001&nbsp;mol/L&nbsp;。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;2.&nbsp;測定步驟&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;精確稱取試樣淀粉30mg(直鏈淀粉用5.0mg),放入玻璃制磨砂配合的手動均質器中,加水&nbsp;10ml,使之充分分散(約往復&nbsp;20次)。在分散液里加&nbsp;lmol/L&nbsp;HCl&nbsp;10ml與&nbsp;0.5mol/L&nbsp;KOH&nbsp;10ml的混合液,以及&nbsp;0.4mol/L&nbsp;KI&nbsp;5ml,并加水定容為&nbsp;100ml。將此混合液移入滴定用的帶夾套的燒杯里,在20~30℃的溫度范圍內,用0.001mol/L&nbsp;KIO3溶液滴定。每滴加&nbsp;0.2ml,經&nbsp;2min后讀取電流值,將它對應于滴定值作圖,求得碘結合量。試樣測定時,先將它完全溶解在&nbsp;10ml&nbsp;0.5mol/L的KOH中,然后加&nbsp;10ml&nbsp;HCI與5ml&nbsp;0.4mol/L&nbsp;KI,再加水定容成100ml,以后的滴定操作同上。&nbsp;本方法對于直鏈淀粉是專一的。
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    6
    發表于 2012-8-22 08:34:23 | 只看該作者
    復制上去怎么出現那么多亂碼呀?

    04、α糊化度測定方法.doc

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