油脂TBA測(cè)定

xinjing · 發(fā)表于 2007-12-11 10:11:34

油脂TBA值的測(cè)定方法
1.
原理
油脂受到光、熱、空氣中氧的作用，發(fā)生酸敗反應(yīng)，分解出醛、酮之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種，它能與TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉紅色化合物，在532nm波長(zhǎng)處有吸收高峰，利用此性質(zhì)即能測(cè)出丙二醛含量，從而推導(dǎo)出油脂酸敗的程度。

2.
試劑
(1) TBA水溶液：準(zhǔn)確稱取TBA0.288g溶于水中，并稀釋至100ml（如TBA不易溶解，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100ml），相當(dāng)于0.02M；
(2)
三氯乙酸混合液：準(zhǔn)確稱取三氯乙酸（分析純）7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀釋至100ml；
(3)
氯仿（分析純）；
(4)
丙二醛標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.315g1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀釋至1000ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛100μg，置于冰箱內(nèi)保存。準(zhǔn)確吸取10ml，稀釋至100ml，此溶液每ml相當(dāng)于丙二醛10μg，備用。
3.
操作步驟
（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
準(zhǔn)確吸取每ml相當(dāng)于丙二醛10μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中，加水至總體積為5ml，加入5mlTBA溶液，然后按樣品測(cè)定步驟進(jìn)行，測(cè)得光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
（2）樣品制備與檢測(cè)
準(zhǔn)確稱取均勻的豆油15g，置于100ml有蓋三角瓶?jī)?nèi)，加入25ml三氯乙酸混合液，振搖半小時(shí)（保持油脂融溶狀態(tài)，如冷結(jié)即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖）用雙層濾紙過濾，除去油脂。濾液重復(fù)用雙層濾紙過濾一次。
準(zhǔn)確移取上述濾液10ml置于25ml比色管內(nèi)，加入10mlTBA溶液，混勻，加塞，置于90℃水浴內(nèi)保溫40min，取出，冷卻1h，移入小試管內(nèi)，離心5min，上清液傾入25ml納氏比色管中，加入5ml氯仿，搖勻，靜置，分層，吸出上清液于532nm波長(zhǎng)處，用2cm比色皿比色（同時(shí)作空白試驗(yàn)）。
4.
計(jì)算
      光密度 (A532/kg)=
      丙二醛含量（mg/Kg）=
   式中C—從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得丙二醛的相應(yīng)濃度(ug/ml)

m ─油脂質(zhì)量（g）

V1—濾液體積（ml）

V2—TBA（硫代巴比妥酸水溶液體積（ml）

V—三氯乙酸混合液體積（ml）
5.
備注
根據(jù)不同種類的油脂檢測(cè)稍有不同：
膨化大豆、魚粉、蝦料類稱取10克、全價(jià)料、豆粕稱取15克，然后提取的粗脂肪按上述步驟用適當(dāng)寬度的比色皿檢測(cè)；
豬油、魚油稱取10克, 豆油稱取15克, 用2cm比色皿檢測(cè)
樣品濃度過高時(shí)，可以用水稀釋后測(cè)定，測(cè)定值再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)