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如果評定真假的話,你可以做真蛋白
一、測定原理
硫酸銅在堿性溶液中,可將蛋白質沉淀,且不溶于熱水,過濾和洗滌后,可將純蛋白質和非蛋白質含氮物分離,再用凱氏定氮法測定沉淀中的蛋白質含量。
二、儀器設備
(1)燒杯:200mL。
(2)定性濾紙。
(3)其它設備與粗蛋白質測定性相同。
三、試劑及配制
(1)
100g/L硫酸銅溶液:分析純硫酸銅(CuSO4 5H2O)10g溶于100mL水中。
(2)
25g/L氫氧化鈉溶液:將2.5g分析純氫氧化鈉溶于100mL水中。
(3)
10g/L氯化鋇溶液:1g氯化鋇(BaCl2 H2O)溶于100mL水中。
(4)
2mol/L鹽酸溶液。
(5)
其它試劑與一般粗蛋白質測定法相同。
四、測定步驟
準確稱取試樣1g左右(精確至0.0001g),置于200mL燒杯中,加50mL水,加熱至沸,加入20mL硫酸銅溶液,20mL氫氧化鈉溶液,用玻璃棒充分攪拌,放置1小時以上,用傾斜過濾(用定性濾紙),然后用60-80℃熱水洗滌沉淀5-6次,用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾液,直到不生成白色硫酸鋇沉淀為止。將沉淀和濾紙放在65℃烘箱干燥2小時,然后全部轉移到凱氏燒瓶中,消化后進行氮測定。
五、結果計算
同粗蛋白質測定。 |
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