巴爾吡爾對畜禽常見病原菌體外抑菌效果研究

畜牧人專題

　　完成單位：華中農業大學農業微生物學國家重點實驗室305分室
　　為了試驗巴爾吡爾對畜禽常見病原菌體外抑菌效果，進行了此次研究。選用金黃色葡萄球菌、傷寒沙門氏菌、巴氏桿菌和魏氏梭菌等4種畜禽常見病原，與不同濃度的巴爾吡爾共培養，檢測巴爾吡爾的抑菌效果。
　　1  材料與方法
　　1.1  材料
　　1.1.1  藥品  分別放置了1年和2年的巴爾吡爾溶液，由北京娜爾生物技術有限公司提供。
　　1.1.2  菌種  金黃色葡萄球菌J6、傷寒沙門氏菌SL1344、巴氏桿菌091028、魏氏梭菌20100302由華中農業大學農業微生物學國家重點實驗室鑒定、保存和提供。
　　1.1.3  培養基  TSA、TSB培養基
　　1.1.4  器材  20mm×23mm的12孔細胞培養板，酶標儀
　　1.2  方法
　　1.2.1抑菌試驗
　　抑菌試驗使用4個濃度梯度的巴爾吡爾藥液，分別為原液，用TSB按1：2，1:5及1:10稀釋的藥液。 將4個濃度梯度的藥液分別加入12孔細胞培養板中（20mm×23mm），每孔2.5mL。將培養了8h的菌液用TSB作10000倍稀釋，培養板每孔加入25?l。另設一孔不加菌液的藥液（2.5mL TSB+25?l藥液）對照和不加藥液的菌液對照（2.5mL TSB+25?l菌液），置于37℃溫箱培養16h，檢測OD600值，計算抑菌率，分析并判定抑菌效果。
　　1.2.2 抑菌率計算
　　抑菌率的計算使用下列公式。

　　抑菌率%=[（OD細菌對照-OD空白對照）-（OD試驗孔-OD空白對照）]/（OD細菌對照-OD空白對照）*100%

　　2  結果
　　不同濃度的巴爾吡爾藥液對4種病原菌的抑菌率各不相同，從0-100%。各抑菌率見表1
　　表1 不同濃度的巴爾吡爾藥液對4種病原菌的抑菌率

		抑菌率(%)
	菌   名	原液	1/2	1/5	1/10
放置1年的消毒液	葡萄球菌	100	100	99	96
	沙門氏菌	90	88	89	64
	巴氏桿菌	94	92	94	94
	魏氏梭菌	95	99	94	94
放置2年消毒液	葡萄球菌	93	91	93	0
	沙門氏菌	90	87	88	0
	巴氏桿菌	94	91	93	93
	魏氏梭菌	94	93	94	94

　　2.1 不同稀釋倍數的巴爾吡爾藥液對同一種菌的殺菌效果不同。隨著稀釋倍數的增大，抑菌率有所下降，殺菌效果降低。原液的抑菌率最高，抑菌效果最好。1:2和1:5稀釋的消毒液抑菌率差別不大，而1:10稀釋的消毒液抑菌率則明顯降低。
　　2.2 同一稀釋度的巴爾吡爾藥液對不同菌種的殺菌效果也不同。以放置一年的消毒液1:5稀釋的藥液為例，其對葡萄球菌的抑菌率達99%，而對傷寒沙門氏菌、巴氏桿菌和魏氏梭菌的抑菌率分別為89%，94%和94%
　　2.3 巴爾吡爾藥液存放時間的不同，其對各種菌的殺菌效果也各不同。除對葡萄球菌的抑菌率降低外，對另3種菌的殺菌效果變化不大。以1:5稀釋的藥液為例，當藥液放置1年時，對葡萄球菌的抑菌率可達99%，對沙門氏菌為89%，對巴氏桿菌為94%，魏氏梭菌則為94%；當藥液放置2年時，對葡萄球菌的抑菌率只有93%，對沙門氏菌為88%，對巴氏桿菌仍為93%，對魏氏梭菌為94%。
　　3 結論
　　鑒于以上結果，為了有效地利用巴爾吡爾藥液殺滅畜禽常見的病原菌，推薦將原液做2- 5倍稀釋，不要超過5倍。為了保證對葡萄球菌的殺菌效果，巴爾吡爾藥液放置不要超過1年。
　　附錄  巴爾吡爾藥液抑菌試驗個孔OD600

		OD空白對照	OD細菌對照	消毒液梯度
	菌   名	TSB	TSB+菌液	原液	1/2	1/5	1/10
放置1年的消毒液	葡萄球菌	0.075	0.962	0.068	0.075	1/5	0.114
	沙門氏菌		0.617	0.063	0.072	0.082	0.224
	巴氏桿菌		1.073	0.060	0.082	0.068	0.066
	魏氏梭菌		1.177	00.063	0.080	0.068	0.076
放置2年消毒液	葡萄球菌		0.902	0.064	0.077	0.069	1.590
	沙門氏菌		0.589	0.058	0.078	0.067	1.409
	巴氏桿菌		1.034	0.067	0.093	0.069	0.068
	魏氏梭菌		1.164	0.065	0.083	0.068	0.068