使用“甲醛法”在飼料生產中用于測定粗蛋白的論述

apple12151007 · 發表于 2010-12-13 17:15:36

　　目前對飼料中的蛋白質測定方法很多，各公司在過程控制中對檢驗設備的投入也逐漸加大。雖然檢驗方法大都采用凱氏定氮法，原來是凱氏定氮玻璃儀器和兩個鐵架臺連接的定氮裝置，現在有了先進的設備如FOSS的全自動凱氏定氮儀樣品消化后打開儀器即可自動執行樣品稀釋、接受液添加、加堿、蒸餾、滴定直到計算結果、出報告，儀器設備非常先進但價格也是很多小企業無法承受的，買到家也需要3.6萬美元，折合人民幣也十幾萬，非常昂貴的。本人從事多年的飼料生產控制和檢驗，為了快速的知道生產情況和產品質量情況，比較了大量的蛋白質測定法，國標法我就省略不述，大家可以在網上查找GB/T6432-1994 。現把甲醛法介紹給大家，供大家分享。
　　檢驗方法：甲醛法
　　1、樣品的制備
　　在生產線隨機采集樣品(我公司生產的是玉米蛋白粉，不需粉碎;如果是豆粕顆粒較大的飼料，需粉碎后全部通過40目篩)，分別采用四分法將檢樣縮至500g，裝于密閉容器中，防止試樣成分變化或變質。
　　2、原理
　　將試樣置于三角瓶中，加雙氧水、濃硫酸，加熱，在有機物分解時，蛋白質及有機氮化合物中的氮形成銨鹽，甲醛與銨鹽可發生絡合反應生成六次甲基四胺【(CH2)6N4】,在反應中同時生成等量的硫酸，用堿液直接滴定，將結果乘以換算系數6.25，計算出粗蛋白含量。
　　3、儀器和試劑
　　3.1 三角燒瓶150ml;
　　3.2 可調電爐1000W-2000W
　　3.3 氫氧化鈉標準溶液：c(NaOH)=0.05mol/L
　　3.4 氫氧化鈉溶液：c(NaOH)=0.1mol/L
　　3.5 4 mol/L硫酸溶液
　　3.6 40%的氫氧化鈉溶液
　　3.7 1：1甲醛-乙醇溶液：
　　3.8 0.2%甲基紅指示液
　　3.9 1%酚酞指示液
　　4、試驗步驟
　　稱取試樣0.5～1g準確至0.0001g，放入三角燒瓶中，加入2mL濃硫酸、10ml雙氧水，先用低溫加熱消化至泡沫消失，再加大功率，直至瓶中白煙基本趕盡，取下三角瓶冷卻至室溫，加蒸餾水50ml搖勻，再加0.2%甲基紅指示液2-3滴，用40%氫氧化鈉溶液調至溶液顯黃色，立即用4 mol/L硫酸溶液滴加至紅色，然后放在電爐上煮沸1-2min，取下加蓋，冷卻至室溫，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液中和至溶液紅色消失，加10ml1：1甲醛-乙醇溶液(預先用酚酞為指示劑，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液中和至溶液顯粉紅色PH=8.3)，酚酞指示劑2-3滴，搖勻后靜止1min，使之反應完全，然后用0.05mol/L氫氧化鈉標準溶液滴定至溶液顯粉紅色，即為終點。記下消耗的氫氧化鈉標準溶液的毫升數。
　　5、計算：
　　式中：V---消耗氫氧化鈉標準溶液的毫升數;
　　c---- 氫氧化鈉標準溶液濃度;
　　M----樣品質量，g;
　　X0---樣品的水分，%。
　　與國標法比較結論：
　　此方法在檢驗數據上與國標相比，相對偏差低于0.5%，但在檢測時間上甲醛法做完一個樣僅需0.5-1h，但國標法僅消化就得2h以上，再加上蒸餾半小時，滴定等操作，需要3-4h。在生產過程中使用甲醛法進行產品判定，節省了時間，一旦產品質量出現異常就可立即做出糾正處理，節約返工造成的浪費。另外，在節能和廢液處理上，因為甲醛法消化時間較短，節約了2-3度電;因為不需要蒸餾，用的濃硫酸和氫氧化鈉也比國標法少，產生的廢液也少，減少環境污染。
　　參考資料：GB/T6432-1994 飼料中粗蛋白的測定方法

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