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一、原理
用濃度準確的酸和堿,在特定的條件下消煮樣品,再用乙醇除去可溶物,經高溫灼燒扣除礦物質的量,所余量稱為粗纖維,它不是一個確切的化學實體,只是在公認強制規定的條件下,測出的概略養分。其中以纖維素為主,還有少量半纖維素和木質素。
二、儀器和設備
1、 實驗室用樣品粉碎機或研缽。
2、 分樣篩:孔徑1.0mm(18目)。
3、 分析天平:感量0.0001g。
4、 干燥箱:可控制溫度在130℃。
5、 高溫爐:可控溫度在550~600℃。
6、 燒杯:250ml。
7、 過濾裝置:真空泵,吸濾瓶,漏斗,200目絹布,G2號玻璃坩堝。
8、 干燥器:以變色硅膠為干燥劑。
三、 試劑
本方法所用試劑除特殊說明外,均為分析純。水為蒸餾水或同等純度的水。
1、氫氧化鈉(GB 629-81):0.313±0.005mol/L(必需在此范圍,若有差異,需調配至此范圍),準確稱量氫氧化鈉12.5g,先用100ml蒸餾水溶解在燒杯中,再轉移至1000ml容量瓶中并定容,可用標定好的0.07mol/L鹽酸標定(或用基準鄰苯二甲酸氫鉀法標定)。
2、硫酸(GB 625-77):0.128±0.005mol/L(必需在此范圍,若有差異,需調配至此范圍),取1000ml容量瓶加蒸餾水500ml,再準確加入98%的濃硫酸6.96ml,定容至1000ml,用氫氧化鈉標準溶液標定。
3、95%乙醇。
4、乙醚。
5、正辛醇:防泡劑。
四、試樣的選取和制備
取具有代表性試樣,用四分法縮減至50g,粉碎至18目。
五.測定步驟
儀器法(SLQ—6型粗纖維測定儀)
1、在已編號的坩鍋內準確地稱取試樣(粒度要求全部通過20目篩子,其中大于40目的不得小于50%;小于60目的不得大于10%)0.5克左右,準確至0.0001克。
2、接通電源、水源、開啟主機電源開關(自來水盡量開足保證冷凝)。
3、 打開酸、堿預熱瓶上蓋,分別加入已制備的酸、堿溶液及蒸餾水,加至預熱瓶體積90%的量,蓋上上蓋。
4、開啟酸預熱電源開關,預熱酸至微沸。
5、將裝有試樣的坩堝移入儀器溫室中(注意此時位置保持準確無偏:下部對準消煮管下的保護套的內孔;壓下手柄并瑣緊再一次檢查坩堝位置是否準確,此時,將下閥全部關閉)。
6、開啟酸閥:逐個開上閥,在消煮管內加入少量約5ml酸液,再開吸開關,逐個開下閥,抽盡溶液,關吸開關和全部下閥。然后將已預熱好的酸液加至刻度線(約150ml)后,再在每個消煮管內加3~4滴正辛醇,開定時器同時按需要分別開加熱器電源開關,調節旋鈕可觀察單個加熱器電壓。并將電壓調至最高(220V),同時開啟蒸餾水預熱開關(預熱水至沸點),待消煮管微沸,將電壓逐個調到保持樣品無沉淀位置,將定時旋鈕旋至30min,保持消煮液微沸(如發現試樣粘壁可補加消煮液),到時加溫自動停止。
7、 開吸開關:再逐個開下閥將消煮液快速抽掉 (在10分鐘內抽盡)并用熱水洗滌殘渣至中性(約4~5次)后抽盡洗液,在抽濾過程中如發現坩堝被堵塞時關吸開關,開吹開關用氣流反沖,發現消煮管內出現氣泡后關吹開關,開吸開關繼續抽濾。
8、 按“6”步驟進行堿消煮。
9、 按“7”方法抽堿消煮液。
10、 脫色和脫脂,全部關閉下閥,待坩堝冷卻后,分別在消煮管上口加入15ml,95%乙醇、浸泡(時間為1min)、抽濾后,再分別加入5ml乙醚、浸泡(時間為1min)、抽濾。(若已脫脂樣品不需要用乙醚沖洗)
11、左手壓下手柄拉出鎖緊勾子緩緩上升,使其復位;帶好手套,取出坩堝,擦凈外壁和底部,將坩堝放在通風櫥中,待乙醚、乙醇全部揮發完,再移入烘箱中130℃溫度下,烘2小時,取出置于干燥器內冷卻至室溫稱重。
12、將稱重后的坩堝,置于高溫爐中,當溫度達到550℃后灼燒1小時,關閉高溫爐,半開爐門2~3分鐘,取出放入干燥器中冷卻30分鐘,稱重。
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