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    [技術(shù)研發(fā)] 全球基因工程實驗室都在使用耐熱達93℃的DNA聚合酶……

      [復制鏈接]
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    樓主
    發(fā)表于 2010-12-7 12:47:30 | 只看該作者 回帖獎勵 |倒序瀏覽 |閱讀模式
    本帖最后由 saturnbio 于 2010-12-7 12:52 編輯

        當飼料行業(yè)還在質(zhì)疑酶制劑是否可能做到天然耐熱的時候,天然耐熱93℃以上的DNA聚合酶早已在基因工程的PCR技術(shù)中普遍應用。
        PCR技術(shù)是指聚合酶鏈式反應,其英文Polymease Chain Reaction(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個周期,循環(huán)進行,使目的DNA得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。它不僅可用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究,還可用于疾病病的診斷或任何有DNA,RNA的地方.聚合酶鏈式反應又稱無細胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增技術(shù)。 由美國科學家PE(Perkin Elmer珀金-埃爾默)公司遺傳部的Dr. Mullis發(fā)明,由于PCR技術(shù)在理論和應用上的跨時代意義,因此Mullis獲得了1993年諾貝爾化學獎。

    技術(shù)原理  
        DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。在
    聚合酶鏈式反應
    實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。

      但是,DNA聚合酶在高溫時會失活,因此,每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶,不僅操作煩瑣,而且價格昂貴,制約了PCR技術(shù)的應用和發(fā)展。發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受93℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。

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    沙發(fā)
    發(fā)表于 2010-12-7 20:48:16 | 只看該作者
    Taq酶雖然耐熱,但是他的最適溫度是75度左右,在動物體內(nèi)環(huán)境下無法發(fā)揮作用。


    sailingbbs于2010-12-8 15:46補充以下內(nèi)容:
    不給動物用,你耐1000度也沒用啊。也沒必要放在這個版塊來討論了吧。

    點評

    我覺得該文的意思好像不是要說Taq酶可用于動物,而是在說酶是完全可能做到天然耐熱的,對嗎?  發(fā)表于 2010-12-8 14:15

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    板凳
    發(fā)表于 2010-12-11 11:12:17 | 只看該作者
    其實飼用酶方面,也有達到天然耐熱94℃的產(chǎn)品,例如云師大酶工程所開發(fā)的3位植酸酶。具體產(chǎn)品就是諾偉司的諾偉磷。
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    地毯
    發(fā)表于 2011-8-11 07:13:56 | 只看該作者
    希望早點讓三正使這種耐更高溫的酶應用于工業(yè)生產(chǎn),期待云師大酶工所的精英們智慧
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