陳煥春：偽狂犬病根除計劃

lanbo

　　偽狂犬病是當今危害全球養豬業最嚴重的豬病, 給養豬業造成了巨大的經濟損失。西方發達國家大多在90年代相繼制定和啟動了該病的根除計劃, 并取得了很好的成效。該病在我國廣泛存在并嚴重發病, 損失巨大。“ 九五”期間我們承擔了國家科技部中國生物工程開發中心生物技術攻關項目“ 偽狂犬病基因缺失疫研制”課題。經過五年的辛勤勞動, 利用本室從我國華中地區發病豬病料分離鑒定篩選到抗原性和免疫原性強、在細胞上增殖滴度高的豬偽狂犬病毒鄂A株為親本材料, 成功研制出偽狂犬病毒gG和gE兩株單基因缺失滅活疫苗用于種豬免疫, TK/gG和TK/gE兩株雙基因缺失弱毒疫苗用于仔豬和育肥豬的免疫。相比較而言, gG和TK/gG疫苗的免疫原性和免疫效果要略高于gE和TK/gE疫苗。前者對當前我國偽狂犬病正處在高發病率時期使用更為合適。但考慮到我國馬上要加人世貿組織(WTO), 因歐洲和美國部分地區大多使用的TK/gE基因缺失疫苗, 考慮到將來我國動物出口便于與國際接軌, 因而我們也研制了TK/gE基因缺失疫苗, 供用戶在使用時選擇。同時我們也研制成功區分強弱毒感染的鑒別診斷方法:gG-ELISA（酶聯免疫吸附試驗）和gE-ELISA,gG-LAT(乳膠凝集試驗)和gE-LAT。經查新和專家鑒定，以上這些產品在國內都是首次研制成功。而用基因工程表達產物建立的gG和gE乳膠凝集鑒別診斷方法在國際上也是首次, 填補了國內外空白, 該方法具有操作簡便, 便于基層和現場使用, 其敏感性高、特異性強, 是最理想的鑒別診斷方法。上述基因缺失疫苗經動物實驗比較和臨床大面積中試應用證明, 從產生抗體水平高、時間快和免疫效果等方面均優于國內外同類產品。尤其是TK/gG雙基因缺失弱毒疫苗可經肌肉注射或滴鼻進行仔豬的超前免疫和發病仔豬的緊急預防注射, 可在24小時內產生明顯的作用, 具有藥到病除的效果。鑒于上述基因缺失疫苗和鑒別診斷方法技術與產品均已成熟和針對我國豬偽狂犬病近年來的實際情況, 特提出我國豬偽狂犬病的根除計劃,并希望首先能在規模化養豬場試行和實施。
　　1 偽狂犬病根除計劃方案
　　根據不同的豬場、不同情況和實驗室檢測情況,選擇不同的方案與措施。
　　偽狂犬病毒是屬于高度潛伏感染的病毒, 而且這種潛伏感染隨時都有可能被體內外和環境變化的應激因素刺激而引起疾病爆發, 同時基因缺失弱毒疫苗注射帶有野毒潛伏感染的動物時, 由于活病毒之間發生基因交換和重組的可能性, 加上種豬飼養的時間長（3-4）年, 因此這種可能性和機率就會增大, 而且國內外都有因注射弱毒疫苗而引起偽狂犬病爆發的例子。因此在西方發達國家如德國嚴格規定種豬只允許使用滅活疫苗。美國在其偽狂犬病的根除計劃中, 也規定種豬只允許使用滅活疫苗。根據以上這些特點, 因此我們建議在我國種豬也只能使用基因缺失滅活疫苗。我們專門研制了針對種豬用的單基因缺失濃縮滅活疫苗。尤其是單gG基因缺失滅活疫苗對病毒的免疫原性幾乎完全沒有什么影響。因為gG是病毒的非結構蛋白基因, gG蛋白是病毒繁殖時分泌到細胞培養的上清中與病毒免疫原性無關該基因缺失后, 對病毒的免疫原性沒有什么影響, 但又可以作為鑒別診斷。
　　育肥用的仔豬和架子豬可以使用雙基因缺失的弱毒疫苗。我室研制的TK/gG和TK/gE雙基因缺失弱毒疫苗都是缺失了偽狂犬病毒的主要毒力基因TK, 該基因缺失疫苗可用作于新生仔豬未吃初乳的超前免疫, 尤其是TK/gG缺失疫苗可用于發病仔豬的緊急預防接種, 具有明顯的急救和預防效果。也可用于斷奶仔豬和生長育肥豬的免疫, 可預防各種年齡豬的偽狂犬病, 具有明顯的促生長作用。由于育肥豬的生長周期短6個月左右,因此不存在病毒重組變異和返強的危險。
　　1.1 種豬及種豬場的根除計劃
　　（1）在沒有使用過疫苗的豬場, 先作普遍血清學檢查, 如果發現血清學陽性豬, 最好是能將血清學陽性豬與血清學陰性豬分群飼養。然后將血清學陽性豬和血清學陰性都用基因缺失滅活濃縮疫苗注射,所有豬普遍注射一次疫苗后, 間隔4-6周再加強免疫一次。以后血清學陰性豬群按每半年注射一次,血清學陽性豬群每4 個月注射一次, 然后每半年進行一次血清學鑒別檢查, 凡是注射疫苗血清學陽性的豬歸為健康群, 凡是野毒感染血清學陽性豬歸為另一群, 逐步縮小和有計劃的淘汰野毒感染豬群, 逐步達到完全健康無野毒感染的豬群。直到最后根除消滅偽狂犬病。
　　（2）對已經注射過疫苗的豬場, 首先將疫苗完全換成濃縮單基因缺失滅活疫苗。免疫程序按每個月注射一次。每半年進行一次血清學鑒別檢查, 逐步開始分群將基因缺失疫苗免疫血清學陽性豬視為健康群分開飼養, 將野毒感染血清學陽性豬分為另一群分開飼養, 逐步淘汰和縮小野毒感染豬群, 最后建立完全健康無野毒感染的豬群。
　　（3 ）以上述經過規則免疫后的種豬所生仔豬留作種用的仔豬在100日齡時作一次偽狂犬病普通血清學檢查, 凡是抗體陰性者留作種用。對檢出的抗體陽性者作進一步的鑒別血清學檢查, 對野毒感染陰性者同樣可用作種用, 對強毒感染陽性者淘汰作為肥豬用, 不能作為種豬用。對偽狂犬病抗體檢測陰性豬和野毒感染陰性豬等留作種用的仔豬用偽狂犬病濃縮單基因缺失滅活疫苗在100-110日齡接種一次, 再到130-140日齡時加強免疫一次, 以后按種豬的免疫程序每半年注射一次濃縮基因缺失滅活疫苗。同時每半年抽血樣進行一次鑒別血清學檢查, 如發現野毒感染血清學陽性豬應及時隔離淘汰處理, 以保持豬群無野毒感染, 安全健康。
　　（4）對種用仔豬經上述檢測, 發現和分群隔離的野毒感染血清學陽性豬, 立即注射滅活疫苗或基因缺失疫苗, 最好是間隔4-6周注射2次, 作為育肥豬飼養出欄。
　　（5）以上是在種豬群和種豬場進行偽狂犬病根除計劃的最佳方案。但考慮到我國養豬業的實際情況, 一般豬場的養豬數量都已達到滿負荷的程度, 豬舍和欄圈都比較緊張, 對采取隔離分群有困難時, 此種情況在沒有注射過疫苗的場先進行抗體檢測, 確定有無感染存在, 或是已經注苗的場先將疫苗更換為濃縮單基因缺失滅活疫苗, 再按前述的種豬及種豬場的免疫程序進行免疫。即抗體陰性豬首先作兩次基礎免疫, 其間隔4-6周。然后每半年注射一次。如是野毒感染陽性豬群先作兩次基礎免疫后,再每4個月免疫一次, 直至野毒感染抗體消失后, 改為每半年一次。對已經免疫過的豬群, 則將疫苗更換成濃縮單基因缺失疫苗就行。然后按每半年抽血檢查一次。逐步縮小野毒感染的豬。這就是要比前述的采取分群隔離的措施達到凈化根除的目的要慢一些。
　　（6）對正在爆發偽狂犬病的豬場, 種豬除進行兩次間隔4-6周基礎免疫外種豬應在配種前注射一次, 產前一個月加強免疫一次, 均使用濃縮的單基因缺失的滅活疫苗。育肥豬用基因缺失弱毒疫苗進行兩次免疫。如仔豬發病用基因缺失疫苗緊急預防接種效果顯著。
　　（7）對新引進的種豬, 要進行嚴格的檢疫, 最好是要引進偽狂犬病抗體陰性豬或野毒感染抗體陰性豬, 引到本場后, 隔離飼養2個月, 抽血樣檢查, 抗體或野毒感染抗體為陰性者再與本場其它豬混群飼養。與其它豬群一樣, 每半年作一次檢查。對于檢測出的野毒感染陽性豬要嚴格隔離, 注射疫苗后, 看情況能否作為種用, 最好是將其淘汰不作種豬用。
　　（8）豬場要進行定期嚴格的消毒管理措施, 最好是使用2%的氫氧化鈉燒鹼溶液或酚類消毒劑。豬舍、欄圈的清洗消毒最要選擇氣候干燥和具有陽光照射下進行, 效果最佳。
　　（9）豬場嚴格禁止養狗、養貓、養雞, 嚴格禁止狗、貓、雞和其它鳥類及動物進人豬舍。在豬場內要進行嚴格的滅鼠措施。消滅鼠類帶毒傳播疾病的危
險。
　　（10）要嚴格禁止人員和車輛等進人豬場, 避免因人員和機械帶毒傳播疾病。
　　（11）在公里方圓范圍內的相關豬場都必須統一采取同樣措施, 因為偽狂犬病可在方圓公里范圍內通過空氣傳播。
　　1.2 育肥豬場偽狂犬病的根除計劃
　　上述種豬及種豬場的根除計劃措施完全適用于育肥豬場。育肥豬場種豬的偽狂犬病根除計劃措施與前上述的種豬的根除計劃措施是完全一樣的。不同的只是在育肥豬方面, 首先應對育肥豬群在70-100日齡的豬進行偽狂犬病血清學檢測, 如發現有抗體陽性或野毒抗體陽性豬, 所有的豬只都應注射疫苗。經過規則免疫的種豬所生的仔豬, 一般在60-70日齡注射一次基因缺失弱毒疫苗, 間隔4-6周后再加強免疫一次。一般情況下在育肥豬場種豬育肥豬都應進行免疫。如只免疫種豬, 大量的育肥感染病毒, 在那里大量增殖病毒并向豬舍內排毒, 直接威脅著種豬, 因而種豬的免疫效果受到影響。此外育肥豬感染偽狂犬病毒后, 雖不表現出典型的臨床癥狀和發生死亡, 但可明顯的引起呼吸道癥狀, 增重遲緩, 飼料報酬降低, 推遲出欄, 其間接經濟損失也是巨大的。經實驗室的動物實驗和臨床上的觀察證實, 感染了偽狂犬病毒的育肥豬群, 注射疫苗與不注苗其增重相差約1/3。即注射疫苗豬比未注射疫苗豬在同等飼養條件下多增1/3, 可見育肥豬應該進行偽狂犬病免疫的重要性。

韓順黎

我們這邊多是在乳豬階段注射的偽狂犬基因缺失活疫苗5-15日齡之間注射，母豬產前15-20日注射滅活疫苗，不知道能不能凈化偽狂犬，請賜教！