魚類的免疫研究

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魚類的免疫什么概念？
     脊椎動物的免疫應答包括兩個過程。第一個，即自然免疫，它是與生俱來的古老的免疫系統，它或阻止病原體侵入機體，或用一種不確定的方式來清除病原體。它包括被稱為確定蛋白質的種類。第二個，即獲得性免疫，它是脊椎動物的防御系統。這個反應是特殊的可誘導的反應。魚類和動物的免疫系統基本相同。對魚類進行免疫接種是預防那些難以控制的和經常造成巨大損失的疾病的最佳選擇。例如：草魚病毒性出血病 草魚爛鰓病。   

據免疫力形成的機理，可分為對抗原異物無針對性的非特異性免疫（non－specific immune）（現代免疫學將其改稱為非特異性防御）和對抗原異物有針對性的特異性免疫（specific immune）。非特異性免疫是機體在種系進化過程中，逐漸建立起來的一系列個體出生時就具有的，對抗原異物無針對性的天然防御機能。魚類的非特異性免疫包括：①鱗片、皮膚和分布在胃腸道、泌尿生殖道部膜表向的上皮細胞，以其特殊的解剖生理構成的屏障外物入侵的物理屏障附著在這些物理屏障表面的黏液，以及黏液中的蛋白酶、凝集素、溶菌酶（錢云霞等，2000）、溶酶體、障礙微生物動用的粘蛋白（李彥和江育林，1997）等構成的化學屏障；②一旦病原體突破外部屏障（物理化學屏障），血清補體、溶菌酶、轉鐵蛋白、天然溶血素、干擾素。C一反應蛋白（楊先樂，1989；聶品，1997；張永安和聶品，2000）以及粒細胞。巨噬細胞和單核細胞將作用于病原體，抵抗其侵襲和感染（李彥和江育林，1997）。

特異性免疫是指個體在出生后的生活過程中，接觸抗原異物所形成的對抗原異物有針對性的免疫力。參與真骨魚類特異性免疫應答的主要組織和器官有胸腺、前腎、脾臟以及消化道淋巴組織與血液淋巴組織，細胞主要有巨噬細胞和淋巴細胞（魚類具有類似于哺乳動物參與細胞免疫的T一淋巴細胞，和參與體液免疫的B一淋巴細胞），免疫球蛋白以及一些體液淋巴因子等（楊先樂，1989；陳懷青和陸承平，1994 李亞南等，1995）。有頜魚類血清中主要的免疫球蛋白類似于哺乳動物的IgM，血液中的相對水平較哺乳動物高，軟骨魚和肺魚為高分子量的lgM五聚體，硬骨魚為高分子量的IgM四聚體（張永安和聶品，2000）。魚類是低等脊椎動物，剛出現免疫球蛋白的生物，雖已具有免疫的基本特征，但較原始，與哺乳動物和鳥類相比有較大的差異（陳懷育和陸承平，1994李亞南等，1995）。其抗體產生與哺乳動物和鳥類相比有如下特點：①抗體形成期較長，抗體滴度增高較慢，冷水性魚類則更長；②在初次應答中，魚類抗體持續期較長；③免疫記憶弱，受水溫的影響，二次應答與初次應答抗體價的比率一般較低，有的魚類幾乎沒有區別（楊先樂，1989），首次免疫和再次免疫產生的抗體都是IgM（陳懷青和陸承平，1994）。因此與哺乳動物和鳥類不同，魚類的非特異性防御在其抵抗病原體的入侵中起著更為重要的作用。

二 增加魚類免疫力的基本方法
    通過注射，浸泡，口服疫苗的方式使魚體產生免疫力。在實際接種過程中，常常因操作等問題而最終未取得預期的防病效果，因此有必要在接種前了解魚類免疫接種中應該注意的問題。這里首先介紹一下魚類免疫接種的通用法則：
     1.免疫接種只適用于未受任何刺激的健康魚，當魚患病或近期剛受到重度處理或受到其它環境刺激時，不能進行接種；
     2.為在接種時保持幾乎全空的胃腸，接種前應該停食。魚越小，水溫越高，所需禁食的時間越短。禁食的魚對操作造成的刺激的耐受力較差，對麻醉劑敏感；
     3.接種必須在無病環境下進行，在水溫15℃時接種后約2周，才能暴露于病害中或轉入易患病的池中。水溫越高，產生免疫所需的時間越短；
     4.在浸泡接種時，疫苗稀釋液和養殖水體的溫差不應超過2℃。

了解了接種的通用原則，對具體魚類是否需要進行接種應該考慮到以下幾點情況：
     1.某一養殖場和地區的流行病學；
     2.魚的種類和年齡組對某一病原體的敏感性

    疫苗的生產廠家：目前國內外出現在市場上的細菌性疾病的疫苗包括福爾馬林滅活菌苗和油佐劑產品，另外，可以拌餌投喂的口服疫苗在國外市場上也有出現。市售的疫苗有只抗一種細菌的單價疫苗，也有可抗一種以上細菌的多價疫苗。

    Aquatic Diagnostics Limited (ADL)是一家國際性生物公司，以研究和生產檢測魚類疾病的單克隆抗體（Mabs）為主。這類產品對水產業來說尤為重要。
    另外通過提高飼料中VC 的含量有可以達到增加魚體免疫力的目的。例如：吞噬細胞是魚類非特異性細胞防御的主要細胞，維生素C提高吞噬細胞吞噬活性可能的機制如下：①提高吞噬細胞的運動趨化性。維生素C缺乏降低豚鼠巨噬細胞的遷移和化學趨化反應（Ganguly等，1976）。高劑量的維生素C提高嗜中性粒細胞的游走和殺菌功能（錢伯初，1989）。維生素C是通過清除體內組織腔的毒性，間接地增強嗜中性粒細胞的趨化反應，因為白細胞的趨化性與血漿維生素C的濃度無關，而與血漿中的組織胺呈顯著負相關（JOhnston等，1992）。每天服用維生素C能使健康人嗜中性粒細胞趨化性提高19％，使血漿組織胺下降38％（Johnston等，1992）。高劑量的維生素C還可能提高環鳥苷酸（cGMP）和前列腺素EI（ PGEI）的濃度，防止吞噬細胞的細胞膜被氧化，從而使細胞的趨化性得以維持（錢伯初，1989）；②影響吞噬細胞趨化因子的合成。補體因子C5a和脫精氨酸C5a、巨噬細胞趨化因(macreophage chemotactic facor ,MCF)細胞具有趨化作用。維生素C是體內的還原性物質，氫的傳遞體，參與體內各種氧化還原反應，可影響特定的酶反應和吞噬細胞趨化因子的合成，從而影響吞噬細胞的吞噬活性（Sobhana  維生素C對免疫細胞很重要，其在白細胞中的含量是血漿中的8倍多。Li和Loved（1985）認為大劑量的維生素C對魚類體液免疫的影響可能與其組織中維生素C量的大小有關。虹鱒可利用抗壞血酸－2－硫酸酯作為維生素C的來源，從飼料中吸收的維生素C部分在體內轉化為抗壞血酸一2一硫酸酯儲存起來（Sfeffens， 1989）。當組織需要時，抗壞血酸一2一硫酸酯在抗壞血酸酯－2一硫酸酯酶（該酶的活性由組織中維生素C的濃度通過負反饋抑制進行調節）的催化下水解成維生素C以供給組織需要，從而保持組織中維生素C水平的相對穩定（Li和Loved，1985；Sfeffens，1989）。高劑量的維生素C超過了機體組織的調節能力，就會使組織維生素C的水平升高，組織中維生素C的增加就促進了體液免疫能力的提高（Lin和 Lovell 1985）。

    維生素C促進淋巴細胞增殖和特異性抗體產生的可能機理：①維生素C使淋巴細胞免受氧化損害，提高淋巴細胞的增殖和特異性抗體的產量（Aidern等，1980）。維生素C提高淋巴細胞的增殖和特異性抗體的產量可能是由于其減輕了活性氧（包括免疫過程中產生的）對淋巴細胞DNA的氧化損傷，從而保持了淋巴細胞的功能。淋巴細胞是免疫反應的中心。

淡水魚

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