中藥與針灸對紅細胞免疫的影響

魁罡

劉傳敏　鹿奎奎　史巖　李金貴
揚州大學獸醫學院



　　1 紅細胞免疫的研究概況

　　1.1 “紅細胞免疫系統”概念的提出

　　1930年，Duke等發現錐蟲在抗血清及補體存在時可粘附到人類紅細胞上，并發現不同人的紅細胞對錐蟲的粘附能力有所不同。1953年，Nelson發現人類紅細胞與特異調理過的梅毒螺旋體及肺炎雙球菌結合，稱此為免疫粘附[1]。推測紅細胞膜存在免疫粘附受體，免疫復合物同該受體結合可促進白細胞的吞噬作用，并認為是宿主防御機制的一部分。1963年， Nishioka 等證實這種免疫粘附現象是通過人紅細胞膜C3b受體(現稱第一補體受體，CR1)來實現的。CR1 是一種相對分子量 190 000~250 000的多態性膜糖蛋白。紅細胞膜CR1密度為白細胞的1/20~1/60，但血循環中紅細胞數量卻是白細胞的1000多倍，故CR1總數遠多于白細胞。1981年，美國生殖免疫學家Siegel發現了紅細胞的多種免疫功能，并預見了血清中存在著紅細胞免疫調節系統以及紅細胞殺傷病原作用[2]。同時，Siegel等提出“紅細胞免疫系統”的新概念，成為紅細胞研究的里程碑。自此，紅細，胞免疫的研究得到了迅速發展。

　1.2 紅細胞免疫的研究現狀
　　體外對比實驗證明，血清中存在一種加熱(50℃，30min)不滅活的紅細胞免疫粘附促進因子。紅細胞可增強單核細胞原發性和繼發性特異性抗體應答，并能促進NK細胞的殺傷能力，在該研究的基礎上，進一步發現紅細胞具有NK細胞增強因子(NKEF) [3，4，5]，在培養液內加紅細胞可促進LAK細胞的產量和活性。1990年，Paccaud等對紅細胞膜CR1進行了比較研究，發現了其簇狀分布的結合位點。同年，Amar等從紅細胞上分離出小分子量的的吞噬抑制因子(PIF)，證明紅細胞對吞噬細胞功能有正負調控作用。1991年，Taylor等以紅細胞為載體，建立了雙特異性單抗異聚體清除血循環中致病原的方法。1994年，Bate等從紅細胞中分離出特異性腫瘤壞死因子誘導因子(TNFIF) [6]。同年，Baggiolini等發現紅細胞廣譜趨化因子受體(ECKR)。此階段中，紅細胞免疫學的研究全面展開，并日漸系統化，紅細胞免疫的應用引起了包括免疫學界、臨床醫學界和藥物學界的廣泛關注。

　2 紅細胞免疫的功能及測定方法
　2.1 紅細胞免疫的功能
　　免疫系統中各免疫細胞根據其分工及能力可分為兩大類免疫細胞：一類稱為固有免疫細胞。這類細胞的免疫功能是遺傳的，這種免疫反應稱為固有免疫反應 (原稱非特異性免疫反應)[7]。另一類稱為適應性免疫細胞，這些細胞除了具有免疫細胞天生固有的免疫功能的物質基礎外，還對某些致病原具有特別的針對性，其結果是產生后天獲得的特異性免疫反應物質，這種免疫反應。也稱適應性免疫應答(也稱特異性反應)[8]。

　　紅細胞在全血中容積百分比約為50％，是血液最主要的細胞成分。過去一直認為，紅細胞結構簡單，其功能亦單一，僅是運輸O2和CO2的工具 [9]。事實上，紅細胞是血循環中最重要的固有免疫細胞，有許多與免疫有關的因子(如CR1、CR3、CD58、CD59、DAF、SOD酶等)，數目眾多，自成系統。紅細胞參與非特異性免疫反應，主要表現為：紅細胞通過CR1、CD59、DAF、HRF參與補體系統活化的調控，如識別、黏附和殺傷抗原，促吞噬作用；通過NKEF參與NK細胞活性調控；通過CD58、CD59增強LAK 細胞活性[10] 。此外，紅細胞還參與T、B淋巴細胞特異性免疫反應過程。許多疾病(如SLE)的發病機制中，紅細胞天然免疫缺陷占有很重要的地位，該研究對全面認識機體免疫系統和免疫網絡具有重要意義[11]。如今，紅細胞免疫已經在臨床醫學、藥物治療、中醫藥針灸、運動醫學以及其他生物學等領域的研究中得到廣泛的應用[12]。

　2.2 紅細胞免疫的測定方法
　　自從1982年發明了紅細胞C3b受體和試驗以來，人們又相繼建立了紅細胞SPA花環試驗、調節因子活性測定、酵母多糖血凝法、腫瘤血凝法等1O余種紅細胞免疫的測定方法[13]。近年來國內外又建立了紅細胞膜促白細胞吞噬作用的化學發光法,測定紅細胞C3b受體活體發光法,免疫金銀染色法以及腫瘤細胞血凝法和酶法等1O多種新的方法。其中根據測定項目的不同又可以分為：①紅細胞免疫粘附功能測定的方法：包括紅細胞C3b受體花環法、紅細胞免疫復合物花環法、紅細胞SPA花環試驗、直向腫瘤紅細胞花環試驗及單克隆抗體Coomb’s試驗；②紅細胞免疫自身調控能力的測定：包括血清中紅細胞免疫抑制因子及促進因子的調控的測定；③紅細胞對其他免疫細胞的調控能力的測定：包括紅細胞膜促白細胞吞噬作用的化學發光法及各種混合花環法。以上方法中，花環試驗的原理是：紅細胞表面存在各種受體，而（補體致敏或非致敏）酵母菌和葡萄球菌能與這些受體相結合，形成花環，在顯微鏡下計數200個紅細胞，算出花環率，作為紅細胞免疫黏附功能的指標。紅細胞免疫抑制因子及促進因子調控的測定原理是：血清中存在促進與抑制紅細胞免疫功能的兩種物質(58℃ 30min不被滅活)，后者不耐熱(58℃，30min滅活)，血清中加入正常人O型紅細胞懸液，補體致敏的酵母菌能與其結合并形成花環，根據花環率可計算出RBC-C3b受體花環促進率和抑制率，作為紅細胞免疫自身調控能力的指標。這些方法的建立，大大豐富了紅細胞免疫檢測的方法手段，同時也大大促進了紅細胞免疫的基礎理論和臨床研究的進展[14，15]。

　3 中藥與針灸對紅細胞免疫的影響
　　中醫藥把人體的功能活動及其防御清除各種有害因素的作用歸之于“正氣”，而破壞人體與外界環境之間平衡的各種有害因素歸之于“邪氣”。免疫功能是正氣本質的體現，各種致病原是邪氣本質的體現。用現代免疫學的理論去研究中醫藥的傳統理論已成為利用現代科學技術解釋其理論依據的重要研究領域。以往用白細胞有關固有免疫和適應免疫反應的理論與技術探討中醫藥的理論已取得了不少有益的成果，但現在研究認為，紅細胞天然免疫反應是機體防御系統中重要的免疫功能。如中醫的“活血化瘀”“氣血理論”研究已注重紅細胞天然免疫理論依據的研究，因為紅細胞免疫功能是遺傳的、天生的，而且血循環中數量最多，是人體正氣很重要的本質體現，而白細胞數量少，因此只研究白細胞免疫功能變化與中醫藥理論體系的關系，而不研究紅細胞天然免疫與中醫藥理論體系的關系，所獲得的研究資料是不夠完整和客觀的。如今，我國科研工作者已在氣血與紅細胞免疫、脾虛與紅細胞免疫、腎與紅細胞免疫、中藥與紅細胞免疫、針灸與紅細胞免疫、血粘度與紅細胞免疫等各個方面進行了研究，紅細胞的生成、發育及功能狀態與脾、腎密切相關[12]。
目前的研究主要表現在如下幾個方面：

　3.1 單味中藥與紅細胞免疫
　　近年來，國內中醫藥紅細胞天然免疫研究取得了多方面的研究成果，特別是在免疫型中藥的研究方面取得了重要的進展，因為紅細胞膜有多糖受體，而免疫型中藥多為多糖類，因此免疫型中藥對紅細胞天然免疫的調控是非常顯著的。劉景田報道，黃芪、靈芝、茯苓、黨參、當歸、天花粉等中的多糖均能提高紅細胞C3b受體花環率(RBC-C3bRR)，經l0％ CD35 單抗阻斷后明顯下降，與對照組相比差異顯著(P<0.01) [16]。季宇彬等的研究表明，仙人掌多糖可增加荷瘤小鼠腫瘤（S180）紅細胞花環率，提高紅細胞C3b受體花環促進率和紅細胞表面唾液酸含量，降低紅細胞C3b受體花環抑制率。藥用仙人掌多糖中劑量組及食用仙人掌多糖高劑量組效果顯著(P<0.01)，說明仙人掌多糖可以改善荷瘤小鼠紅細胞免疫功能[17]。洪艷等研究當歸多糖對放射損傷小鼠紅細胞免疫粘附功能和外周血象的影響。照射對照組紅細胞C3b受體花環率和外周血白細胞，血小板數明顯低于正常對照組，而當歸多糖治療組的紅細胞C3b受體花環率和外周血白細胞、血小板數顯著高于照射對照組(P<O.01)，表明當歸多糖能顯著促進放射損傷小鼠的紅細胞免疫粘附功能和造血功能[18]。徐輯輝等研究薏苡仁多糖對實驗性糖尿病大鼠紅細胞免疫粘附功能的影響。結果，實驗性糖尿病大鼠與正常組比較，紅細胞C3B受體花環率(E-C3BRR)水平下降34.6％，紅細胞免疫復合物花環率（E-ICR）增加63.44％，經薏苡仁多糖治療后，以上各值均有不同程度的恢復，由此可見，實驗性糖尿病大鼠存在紅細胞免疫粘附功能的異常，薏苡仁多糖能夠改善這種異常狀態[19]。楊運高等采用第一軍醫大學中醫系研制成功的大鼠紅細胞免疫功能缺陷模型，給予海藻多糖后，觀察動物模型紅細胞免疫功能以及自由基損傷的變化情況。結果，動物模型組紅細胞免疫功能發生紊亂，以E-C3BR活性下降，E-ICR上升為主；與此同時，紅細胞氧化和抗氧化功能也發生明顯變化，而海藻多糖組動物E-C3BR活性上升，E-ICR下降，與模型組比較有顯著性意義，這說明海藻多糖對實驗動物紅細胞免疫及自由基損傷有明顯的調節作用[20]。 張秀娟等試驗研究黑木耳多糖對紅細胞膜流動性和免疫黏附作用的影響，與正常組比較，荷瘤小鼠紅細胞黏附腫瘤細胞的能力下降。經過黑木耳多糖治療后，與模型組相比，各治療組均有不同程度地提高[21]。

　3.2 中草藥復方與紅細胞免疫
　　祖國醫學認為腎藏精，主骨生髓，腎中精氣不足則骨髓空虛。骨髓屬于現代醫學中的免疫、造血器官，具有產生免疫細胞和造血的功能，因此腎虛可直接影響到免疫細胞的生成和調節，并可能影響紅細胞的質與量，使紅細胞膜上C3b受體的活性、數目降低等，導致紅細胞免疫粘附功能低下及調控失常[22]。賈秀琴等通過建立兔系膜增殖性腎炎(MSGN)模型，觀察保腎沖劑紅細胞免疫功能的影響。結果發現：兔MsPGN模型紅細胞免疫復合物花環率(E-ICRR)升高、紅細胞C3b受體花環率(E-C3bRR)下降。經保腎沖劑治療后，以上各值均有不同程度的恢復，表明保腎沖劑可改善實驗性慢性腎小球腎炎模型免紅細胞免疫功能[23]。徐志良等用阿霉素制造大鼠腎病模型，運用酵母菌花環法測定大鼠紅鈿胞免疫功能和免疫調節因子。結果顯示，腎病Ⅳ號方可明顯提高大鼠紅細胞C3b受體花環率及其促進因子的活性，降低紅細胞免疫復合物花環率及其抑制因子的活性，與病理組有顯著差異，表明該方可提高阿霉素腎病大鼠的紅細胞免疫活性[24]。鄧偉等通過益泉膠囊對慢性腎小管損害大鼠紅細胞免疫功能影響的研究，發現益泉膠囊確有提高紅細胞Gb受體的粘附能力，增強其免疫活性．并可提高紅細胞免疫促進因子活性，抑制紅細胞免疫抑制因子的活性來進一步增強紅細胞免疫功能[25]。

　　脾主運化、統血，為畜禽氣血生化之源[26]。許多研究表明：中醫證候與紅細胞免疫密切相關，脾虛證時，紅細胞C3b受體花環率較正常顯著降低，偏食脾虛使用四君子湯后，脾虛狀況明顯改善，紅細胞C3b受體花環率明顯升高，與正常對照組無顯著差異。研究表明紅細胞脆性通透性增加，紅細胞變形性、流動性降低，功能活動必然受到影響，同時粘附免疫復合物(IC)增多或伴有IC的解離障礙，C3bRR 明顯降低，RICR明顯增高[22]。蔡琨等采用瀉下法塑造大鼠“脾虛”模型，再用微生態調節劑——媽咪愛沖劑灌胃，觀察其對犬鼠的紅細胞總數、紅細胞ICR及紅細胞C3bRR等指標的影響。結果表明，媽咪愛能顯著改善大鼠的脾虛癥狀，并升高大鼠的紅細胞C3bRR，降低紅細胞ICR（P<0.05)[27]。田維毅等建立脾不統血證ITP小鼠模型，分別運用加減歸脾湯(大、小劑量)、潑尼松治療，觀察各組小鼠紅細胞免疫功能的變化。結果發現，大劑量加減歸脾湯能明顯提升實驗小鼠紅細胞免疫功能，表明大劑量加減歸脾湯對脾不統血型小鼠模型有明顯治療作用[28]。陳永輝等研究健脾止瀉顆粒對脾虛模型小鼠紅細胞免疫功能的影響。經健脾止瀉顆粒治療后，脾虛模型小鼠的RBC-C3bRR顯著升高，而RBC-IC-R指標又明顯下降，并能顯著提高脾虛模型小鼠紅細胞量，表明健脾止瀉顆粒對脾虛引起的紅細胞免疫功能低下確有明顯的治療作用[29]。

　3.3 針灸與紅細胞免疫
　　經絡學說與神經內分泌免疫調控系統密切相關，而針灸能防治多種疾病是與針灸能凋控平衡神經內分泌免疫網絡系統密切相關的。現有研究表明：紅細胞上有β-內啡肽與腎上腺素β-受體，而針灸可調控血循環中的β-內啡肽和腎上腺皮質激素濃度，可對紅細胞天然免疫功能進行正負調控[15]。何學斌等通過針灸對氣虛大鼠紅細胞免疫功能影響的實驗研究，發現：針灸組大鼠血液流變學指標均明顯低于模型組，組間比較具有極顯著差異；模型組和針灸組的RBC-C3bRR均明顯低于空白對照組，而RBC-ICRR明顯高于空白對照組(P<0.01)；針灸組的RBC-C3bRR 明顯高于模型組，而RBC、ICRR明顯低于模型組(P<0.01) 。結論：針灸對氣虛大鼠的紅細胞免疫功能低下具有一定恢復作用[30]。呂琳等研究壯醫藥線點灸對脾虛大鼠淋巴細胞轉化率及紅細胞免疫功能的影響，結果顯示，藥線點灸治療組RBC-C3b受體花環率較模型組升高(P<0.05)，RBC-IC花環率下降(P<0.05)，與中藥對照組比較差異無顯著性。結論：壯醫藥線點灸有提高紅細胞免疫的功能[31]。王江宏等研究藥物灸對變態反應性關節炎大鼠紅細胞免疫功能的影響。結果表明，紅細胞C3b受體花環率，藥物灸治療組有極顯著升高(P<0.01)，紅細胞IC花環率各組均降低，紅細胞C3b受體花環促進率，藥物灸治療組有極顯著性升高(P<0.01)，而紅細胞受體花環抑制則有極顯著性降低(P<0.O1)，表明藥物灸可以有效地改善變態反應性關節炎大鼠的紅細胞免疫功能[32]。余華對脾虛大鼠模型取“脾俞”、“胃俞”、“足三里”，用無瘢痕麥粒灸，結果顯示：經灸療后RBC-C3b受體花環率升高，RBC-IC花環率降低，機制可能是灸法能促進胃腸的消化吸收功能，調節免疫功能，改善造血功能[33]。宋小鴿等艾灸腎俞穴對AA大鼠研究示：AA炎性反應可抑制紅細胞免疫的功能，而艾灸可使低下的RBC-C3b受體花環率升高，升高的RBC-IC花環率降低，與模型組有顯著性差異，其機理：艾灸促進AA大鼠的紅細胞在血管中流動，RBC-C3b黏附活性提高，清除循環免疫復合物[34]。

　4 展望
　　紅細胞免疫是機體免疫的重要組成部分，在過去的二三十年里，紅細胞免疫得到了長足的發展，并且在免疫物質基礎、免疫功能以及免疫調控網絡等各個方面日趨完善，自成系統。展望未來，紅細胞免疫將在其分子生物學的基礎研究上，臨床的應用研究、理論和實踐上均會有新的突破。中醫理論博大精深，中草藥資源也相當豐富，另外結合中醫各種療法（比如針灸），在紅細胞免疫的研究中將發揮著越來越大的作用。

　　參考文獻
[1] Nelson R．A．The immune adherence phenomenon ,Sience，1953，118：733
[2] Siegel I，Liu TL，Gieicher N．The red cell immumesystem．Lanct．1998，2(8248)：556
[3] Shau H，Golub SH．Modulation of natural killer mediated lysis by red blood cells．1988，116(1)：60-72
[4] Shau H，Kim A．Identification of natural killer enhancing factor as a major antioxidant in human red blood cells．BiochemBiophys Res Commun，1994，199(1)：83-88
[5] Shau H，Guptar K，Golub SH．Identification of a natural killer enhancing? factor(NKEF) from erythroid cell．Cell Immumol．1993，1479(1)：1-11
[6] Bate CAW．Kwiatkowski DP．Stimulators of tumor necrosis factor production released by damaged erythrocytes．Immunology，1994，83(2)：256-259
[7] Hofmnn J．A．Phylogenetic perspectives in innate immunity．Science．1999，284：1313
[8] Munford R．S．Pugin J．The crucial role of systemic responses in the innate (non-adaptive) host defense．J．Endotoxin．Res．， 200l，7:327
[9] 甘慧，孫萍．紅細胞免疫研究的歷史、現狀和前景．國外醫學免疫學分冊．2005，28（4）：227-230
[10] 唐建國．紅細胞免疫系統研究進展．中國臨床醫學．2002，9（5）：593-596
[11] 郭峰，錢寶華，張樂之主編．現代紅細胞免疫學．上海第二軍醫大學出版社，2002
[12] 郭峰．紅細胞免疫的研究和意義．自然雜志． 2002，24（5）：268-273
[13] 于開芝，邢玉亭．紅細胞免疫學現狀．山東畜牧獸醫．2000，5：40-42
[14] 薛擁志，崔平．紅細胞免疫研究進展．張家口農專學報．2004，20（2）：30-32
[15] 郭峰．紅細胞免疫及其調節功能測定方法．免疫學雜志．1990，6（1）：60-65
[16] 劉景田，黨小軍，手惠萍等．中藥多糖對紅細胞膜相CD35免疫活性的調節作用．中國現代醫學雜志．2002，l2(1)：7-9
[17] 季宇彬，汲晨鋒，鄒翔等．2種仙人掌多糖對S180小鼠紅細胞免疫功能影響的研究．中國中藥雜志．2005，30（9）：690-693
[18] 洪艷，劉君炎等．當歸多糖對放射損傷小鼠紅細胞免疫粘附功能和外周血象的影響．現代中西醫結合雜志．2001，10（4）：708-709
[19] 徐輯輝，周世文，黃文權等．薏苡仁多糖對實驗性糖尿病大鼠紅細胞免疫拈附功能的影響．湖南中醫學院學報．2001，21（1）：17-19
[20] 楊運高，華何與，張紅栓等．海藻多糖對大鼠紅細胞免疫及自由基損傷的實驗研究．深圳中西醫結合雜志．2005，15（1）：25-27
[21] 張秀娟，耿丹，于慧茹等．黑木耳多糖對荷瘤小鼠紅細胞免疫功能的影響．中草藥．2006，37（1）：94-96
[22] 張學敏．中藥對紅細胞免疫功能的影響.福建中醫藥．2001，32（6）：48-49
[23] 賈秀琴，龔學忠，張永鋒等．保腎沖劑對慢性腎小球腎炎模型紅細胞免疫功能、T淋巴細胞亞群的影響．中藥藥理與臨床．2002，18（3）：26-27
[24] 徐志良，王長松．腎病Ⅳ號對阿霉素腎病大鼠紅細胞免疫功能的影響．南京中醫藥大學學報（自然科學版）．2001，17（6）：370-371
[25] 鄧偉，劉玉寧．益泉膠囊對慢性腎小管損害大鼠紅細胞免疫功能影響的實驗研究．河南醫藥信．2002，10（10）：32-33
[26] 鄭繼方．中獸醫診療手冊．金盾出版社．2006，15-16
[27] 蔡琨，俞琦，王平等．調節腸道微生態對“脾虛"大鼠紅細胞免疫的影響．甘肅中醫．2006，19（8）：44-45
[28] 田維毅，尚麗江，劉宏瀟等．加減歸脾湯對脾不統血型ITP小鼠狂細胞免疫功能的影響．貴陽中西學院學報．2002，24（4）：52-53
[29] 陳永輝，朱珊，棲守峰等．健脾止瀉顆粒對脾虛模型小鼠紅細胞免疫功能的影響．中國中醫藥科技．2001，8（1）：27
[30] 何學斌，吳耀，羅濟民等．針灸對氣虛大鼠紅細胞免疫功能影響的實驗研究．針刺研究．2003，18（3）：189-191
[31] 呂琳，陳永紅，韋金育等．壯醫藥線點灸對脾虛大鼠淋巴細胞轉化率及紅細胞免疫功能的影響．廣西中醫藥.2001，24（2）：48-50
[32] 王江宏，賈杰，李小芳等．藥物灸對變態反應性關節炎大鼠紅細胞免疫功能的影響．中國中醫藥科技．2001，8（6）：341-343
[33] 余華．灸法對脾虛大鼠血清D-木糖含量及紅細胞免疫功能的影響．上海針灸雜志，1999，18(2)：34-35

[34] 宋小鴿，唐照亮，侯正明等．艾灸對實驗性炎癥大鼠抗炎作用和紅細胞免疫功能的影響．中國中醫藥信息雜志．1999，6(12)：31-32

華山

有很多經驗可以。借鑒。頂一下