魚粉的系列知識

hualin_hu · 發表于 2007-11-20 12:39:28

揮發性鹽基氮的測定

方法（一）
半微量定氮法
1 、原理
　　揮發性鹽基氮是指動物性食品由于酶和細菌的作用，在腐敗過程中，使蛋白質分解而產生氨以及胺類等堿性含氮物質。此類物質具有揮發性，在堿性溶液中蒸出后，用標準酸滴定計算含量。
2 、試劑
2.1 氧化鎂混懸液（ 10g/L ）：稱取 1.0g 氧化鎂，加 100mL 水，振搖成混懸液。
2.2 硼酸吸收液（ 20g/L ）。
2.3 鹽酸 [c(HCL)=0.01mol/L] 或硫酸 [c(1/2H 2 SO 4 )=0.01mol/L] 的標準滴定溶液。
2.4 甲基紅乙醇指示劑（ 2g/L ）。
2.5 次甲基藍指示劑（ 1g/L ）。
3 、儀器
3.1 半微量定氮器
3.2 微量滴定管：最小分度 0.01mL 。
4 、分析步驟
樣品處理：精確取 10g 試樣（粉碎好的樣品）于 200mL 磨口三角瓶中，加 100.0mL(V 總 ) 蒸餾水于振蕩器上振蕩 30 分鐘， 4000 轉離心。
蒸餾滴定：將盛有 2 0.0 mL 吸收液及 5-6 滴混合指示液的錐形瓶置于冷凝管下端，并使其下端插入吸收液的液面下，準確吸取 10.0mL （ V 分取）上述樣品上清液于蒸餾器反應室內，加 10 mL 氧化鎂混懸液（ 10g/L ），迅速蓋塞，并加水以防漏氣，通入蒸汽，進行蒸餾，蒸餾 5min 即停止，吸收液用鹽酸標準滴定溶液（ 0.01mol/L ）或硫酸標準滴定溶液滴定，終點至藍紫色。同時做試劑空白試驗。
5 、計算式及結果表述：
揮發性鹽基氮（ W ）以每 100g 樣品含氮毫克數表示。

W — 樣品中揮發性鹽基氮的含量， mg/100g;
V 1 — 測定用樣液消耗鹽酸或硫酸標準溶液體積， mL;
V 2 — 試劑空白消耗鹽酸或硫酸標準溶液體積 ,mL;
C — 鹽酸或硫酸標準溶液的實際濃度， mol/L;
14 — 與 1.00mL 標準標準滴定溶液 [c(HCl)=1.000mol/L] 或硫酸標準滴定溶液 [c(1/2H 2 SO 4 )=1.000mol/L] 相當的氮的質量， mg;
m — 樣品質量， g 。
結果的表述：報告算術平均值的三位有效數。
6 、允許差
相對誤差≤ 10% 。
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　方法（二）
微量擴散法
1 、原理
揮發性含氮物質可在 37 ℃堿性溶液中釋出，揮發后吸收于吸收液中，用標準酸滴定，計算含量。
2 、試劑
2.1 飽和碳酸鉀溶液：稱取 50k 碳酸鉀，加 50mL 水，微加熱助溶，使用上清液。
2.2 水溶性膠：稱取 10g 阿拉伯膠，加 10mL 水，再加 5mL 甘油及 5g 無水碳酸鉀（或無水碳酸鈉），研勻。
2.3 硼酸吸收液（ 20g/L ）。
2.4 鹽酸 [c(HCL)=0.01mol/L] 或硫酸 [c(1/2H 2 SO 4 )=0.01mol/L] 的標準滴定溶液。
2.5 甲基紅乙醇指示劑（ 2g/L ）。
2.6 次甲基藍指示劑（ 1g/L ）。
3 、儀器
　　擴散皿（標準型）：玻璃質，內外室總直徑 61mm, 內室直徑 35mm ；外室深度 10 mm ，內室深度 5 mm ；外室壁厚 3 mm ，內室壁厚 2.5 mm ，加磨砂厚玻璃蓋。
微量滴定管：最小分度 0.01mL 。
4 、分析步驟
　　將水溶性膠涂于擴散皿的邊緣，在皿中央內室加入 1mL 吸收液及 1 滴混合指示液。在皿外室一側加入 1.00mL 按方法（一）中第 4 條制備的樣液，另一側加入 1mL 飽和碳酸鉀溶液，注意勿使兩液接觸，立即蓋好；密封后將皿于桌面上輕輕轉動，使樣液與堿液混合，然后于 37 ℃溫箱內放置 2 小時，揭去蓋，用鹽酸或硫酸標準滴定溶液 (0.100mol/L) 滴定，終點呈藍紫色。同時做試劑空白試驗。
5 、計算式同方法（一）：
W — 樣品中揮發性鹽基氮的含量， mg/100g;
V 1 — 測定用樣液消耗鹽酸或硫酸標準溶液體積， mL;
V 2 — 試劑空白消耗鹽酸或硫酸標準溶液體積 ,mL;
C — 鹽酸或硫酸標準溶液的實際濃度， mol/L;
14 — 與 1.00mL 標準標準滴定溶液 [c(HCl)=1.000mol/L] 或硫酸標準滴定溶液 [c(1/2H 2 SO 4 )=1.000mol/L] 相當的氮的質量， mg;
m — 樣品質量， g 。
6 、允許差
相對誤差≤ 10% 。