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| 在對原料樣品的檢測中，一般有定性檢測和定量檢測。在定性檢測中，使用的比較多的為顯微鏡檢，包括直接鏡檢、分層鏡檢（用四氯化碳或三氯甲烷分層）、反應劑鏡檢（用化學物質和樣品中的某些物質反應而在顯微下區分）、染色鏡檢等。在使用的過程中，往往使用一項或多項鏡檢方法對樣品中的物質進行判定。 對于非蛋白氮的檢驗，顯微鏡檢是一種比較有效的方法。在對樣品的檢測中，一般使用的是生物顯微鏡，其放大的倍數在36～400倍之間，為了獲得更好的顯微效果，可以根據實際情況作出具體的調整。以下是鏡檢使用過程中的一些技巧： 一、直接鏡檢 直接鏡檢一般所用的倍數比較小，通過對樣品不同的物理特征，如顏色、透明度、表面組織、形狀等物理性狀進行判定。特別的要與典型的樣品進行比較，以便能夠更好區分樣品與雜質的不同。在直接鏡檢中，用不同的濾光片有時可以起到比較明顯的效果。雖然直接鏡檢比較方便和直觀，但有時對于樣品中的物質很難區分時，可以用其它的檢驗方法。 二、分層鏡檢 將樣品用四氯化碳進行脫脂和比重分離之后，樣品與其它物質的區分會更加容易。對樣品中的有機物和無機物分層之后，需在常溫下干燥后再進行鏡檢。非蛋白氮一類的物質與原料的很多外觀性質很不一樣，通過兩者的特異性之間的觀察，可以對樣品中是否摻有非蛋白氮一類的物質作出一個大概的判斷。 三、反應劑鏡檢 用反應劑和樣品進行反應，非蛋白氮一類的物質的化學性質和樣品不一樣，通過此種方法可以對樣品中的非蛋白氮進行鑒別。經過四氯化碳分層之后，再與反應劑反應是比較好的一種方法。而鏡檢時在樣品中加一滴或數滴濃硫酸，觀察樣品與濃硫酸反應的情況是一種比較直觀的鑒別方法。因為無論動物蛋白還是植物蛋白，其與濃硫酸的反應速度和產生的現象比較明顯。 四、染色鏡檢 用染色劑對樣品進行染色，使樣品中的植物或動物細胞染成不同的顏色，而非蛋白氮一類的物質則和樣品的染色后的表現不同，通過此種方法使兩者區分開來從而加以鑒別。以下是比較常用的染色方法： 1、對植物細胞的染色方法：番紅——固綠染色法。取適量脫胎（視樣品脂肪多少而定，可以用四氯化碳，也可以用丙酮，對于脂肪少的也可以不用脫脂）樣品于燒杯中，用1％的番紅水溶液浸泡l～3h水洗（去多余的染料）。將樣品涂在玻片上，稍晾干。滴加 0.1％的固綠（溶劑用95％乙醇）。過15秒后滴加95％的乙醇，沖去多余固綠染料。待乙醇稍揮發后，加甘油液（甘油∶水＝1∶1）浸潤，加蓋玻片。用生物顯微鏡檢查。染色結果：細胞核，木質化細胞壁呈鮮紅色，纖維素細胞壁、細胞質呈綠色。因為非蛋白氮沒有細胞核、細胞質等結構，所以只要能夠較好的掌握染色技巧，其對比效果比較明顯。當然，不能從染色效果判斷其一定為非蛋白氮。 2、對動物細胞的染色方法：蘇木精——曙紅對染法。取適量的脫脂樣品于燒杯中，加入埃利希蘇木精染色液浸泡3～5min，水洗數次（用5min左右）。將樣品涂在玻片上，滴加氨水。3～4秒后立即滿加水，洗1 min，稍晾一下，加 0.2％曙紅水溶液浸潤3 min，滴加95％的乙醇，洗去多余曙紅染料。再稍晾一下，加甘油浸潤，加蓋玻片，用生物顯微鏡觀察。其染色的結果為：細胞核呈藍色，細胞質呈淡紅色。通過此種方法染色，一般能夠很容易的區分樣品和非蛋白氮一類的物質。 為了能夠更清晰的在顯微鏡下區分樣品與雜質，也可采用以下方法（對于檢驗魚粉一類的物質比較有效）：先用四氯化碳或三氯甲烷對樣品分層，除去無機物，必要時再用丙酮進行脫脂，再取一定量的樣品置入蒸餾水中，攪拌，除去溶于水的物質，再用60目或80目的樣品篩過濾，將樣品放入50～60℃的烘箱中進行烘干（時間不能過長，以保持樣品原來的狀態），然后在顯微鏡下進行檢驗或再對其進行處理后鏡檢。 在顯微鏡檢中，只能對非蛋白氮作初步判斷。若要進一步的分析判斷，還需進行定量分析檢驗。 |
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