霉菌毒素檢測方法綜述

由于產生毒素的霉菌無處不在，以及我們對大多數(shù)有利于霉菌生長和霉菌毒素產生的條件控制不力，造成食品和飼料的霉菌毒素污染問題越來越成為現(xiàn)代農業(yè)生產中不可忽視的重大難題。在各種農產品上生長著的各種各樣的霉菌，這些霉菌都能產生霉菌毒素，霉菌毒素是有毒的化合物，有些甚至是致癌的。霉菌毒素有很多種(CAST,2003)，包括黃曲霉毒素，主要是黃曲霉毒素B1和M1(Aflatoxins，FB1、FM1)；赭(棕)曲霉毒素A(OchratoxinA，OA)；雜色(柄)曲霉毒素(Terigmatocystin)；展青霉素(Patulin,PTL)；玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN(F－2));串珠鐮刀菌素(Moniliformin,MF)，三硝基丙酸以及屬于單端孢霉烯族化合物(Trichothecenes)的T－2毒素(T－2toxin,T－2)；脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(嘔吐毒素)(Deoxynivalenol,DON)；二乙酰鑣草鐮刀菌烯醇(Diacetoxyscirpenol，DAS)等。

   聯(lián)合國糧農組織在近期的報道中指出，全世界至少99個國家，占世界人口的87％，針對糧食和飼料的霉菌毒素污染問題都有相關的規(guī)定。在未來的幾年里，與不斷變化的全球氣候有關的氣象突發(fā)事件的增多將進一步向我們提出挑戰(zhàn)。霉菌毒素污染給食品企業(yè)、糧油加工企業(yè)、畜禽養(yǎng)殖場以及飼料的加工企業(yè)造成了巨大的經濟損失。

目前霉菌毒素檢測常用的方法如下幾種：

一、  薄層層析法：

TLC法是針對不同的樣品，用適宜的提取溶劑將霉菌毒素從樣品中提取出來，經柱層析凈化，再在薄層板上層析展開、分離，利用霉菌毒素的熒光性，根據(jù)熒光斑點的強弱與標準比較測定其最低含量。TLC法樣品前處理繁瑣，且提取和凈化效果不夠理想，提取液中雜質較多，在展開時影響斑點的熒光強度。

二、色譜法：

色譜法，包括薄層色譜、氣相色譜、液相色譜等，一直是最重要的霉菌毒素的化學分析方法。現(xiàn)在比較普遍的霉菌毒素的分析方法還是液相色譜法，包括液相色譜-質譜聯(lián)用技術。該法快速而準確，但需要昂貴的儀器設備，僅限于專業(yè)檢測機構獲得科研和調查分析、監(jiān)測使用，未能在企業(yè)及基層廣泛推廣使用，而且其結果的滯后效應大大降低了對生產實際的指導效果。

三、免疫化學檢測法： (膠體金免疫層析法，酶聯(lián)免疫吸附法)

免疫學檢測方法是基于抗體與抗原或半抗原之間的選擇性反應而建立起來的一種生物化學分析法。通常具有高的選擇性和很低的檢出限，廣泛用于各種抗原、半抗或抗體的測定，一般可分為熒光免疫法、發(fā)光免疫法、免疫法及電化學免疫法等非放射免疫法和放射免疫法，其中在飼料霉菌毒素檢測中應用較廣的主要是酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和膠體金免疫層析法。

免疫學檢測方法由于其快速、靈敏、準確、可定量、操作簡便、無需貴重儀器設備，且對樣品純度要求不高等特性，特別適用于飼料廠、糧油/食品加工廠、養(yǎng)殖場等企業(yè)進行原料或成品的檢測以及工商質監(jiān)部門現(xiàn)場檢測。

該類方法有以下特點：

1) 靈敏度高

2) 干擾小：抗體抗原的免疫反應特異性很強，結構類似物、熒光物質、有色物質對檢測的干擾很小。

3) 操作簡便快捷：由于特異性強，簡化了樣品的預處理和提取純化過程，同時操作步驟也非常簡便，測定時間也短。

4) 安全性高，污染少，成本低廉：不需要昂貴的測定儀器，所用試劑也相對較少，特別是因為靈敏度高，毒素標準品的濃度可以很低，減少了對檢測人員和環(huán)境的潛在危害和污染。