2.2 結果分析 添加不同量的海藻糖對植酸酶熱穩定性的影響(見圖2)
從圖2可見,植酸酶溶液中加入等體積的海藻糖溶液,85 ℃處理5 min后均能提高在高溫下的熱穩定性,加入40、60和80 mg海藻糖的植酸酶其酶活保留率分別達到了53.4%、57.1%和67.4%,較原酶活保留率17.1%分別提高了36.3、40、50.3個百分點。添加80 mg海藻糖對植酸酶的熱穩定性提高效果最好。 3 討論 3.1 研究進展酶的穩定性一直是困擾其大規模應用的主要原因。為了保持酶的活力,國內外大多采用在濃縮液中加入金屬離子、多元醇、多糖類化合物等方法。海藻糖作為一種多醇化合物,既可通過氫健與酶蛋白表面分子相連結,也能通過氫健有效地與外部水分子相連結,使酶蛋白分子穩定。本試驗在植酸酶中加入不同質量的海藻糖均能提高商品植酸酶在高溫下的熱穩定性,其中以80 mg海藻糖的效果最好。其在生產中的應用如何尚需作進一步的研究。 隨著基因工程與蛋白質工程技術的發展,定點突變、同序方法和定向進化技術將逐漸應用于酶的熱穩定性研究。在分子水平上對植酸酶基因進行改造,使植酸酶本身就具有良好的熱穩定性無疑是很有意義的。 3.2 影響試驗效果的其它因素 在試驗過程中由于試驗條件和試驗環境的限制,試驗結果受諸多因素的影響,其影響因素除了pH值、溫度、濕度、作用時間、抑制劑、激活劑、底物和產物濃度,以及植酸、植酸酶來源等外,還表現在以下幾個方面:① 植酸酶的活性會因放置時間的加長而使其活性降低,故其酶活力保留率也會隨之降低。② 試驗水浴溫度不太穩定時有變化,從而使試驗結果出現偏差。 4 結論 本試驗采用絕對法對不同濃度的海藻糖對植酸酶熱穩定性的影響進行研究,結果表明添加80 mg海藻糖對植酸酶的熱穩定性提高效果最好,酶活力保留率提高了50.3個百分點。在植酸酶液中加入海藻糖比不加時酶活力保留率提高36.3~50.3個百分點。 ?。▍⒖嘉墨I20篇,刊略,需者可函索)(編輯:沈桂宇,guiyush@126.com)李融,天津農學院動物科學系,300384,天津。 蘇琰(通訊作者),揚州大學生物科學與技術學院。 |