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    樓主: wanglinlin
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    討論一下酶標儀檢測三聚氰胺的實驗方法的準確性

    [復制鏈接]
    11
     樓主| 發表于 2008-12-3 16:37:51 | 只看該作者
    我用的60%甲醇提取液
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    12
     樓主| 發表于 2008-12-3 16:40:11 | 只看該作者
    我們初步來做穩定性不是很好,準確率因實驗的次數太少現在很難說,我再多做幾次后,和大家交流吧  相信會有結果的
    13
    發表于 2008-12-3 22:15:20 | 只看該作者
    原帖由 wanglinlin 于 2008-12-3 09:47 發表
    請問月亮花,我們是72孔的,你們買得哪個生產廠家的試劑盒?我們買得是北京的,
    還有標準品數量是有限的,如果藥品用完了,還有板孔怎么辦?(不是說同一試劑盒里是配套的,不能和其他的試劑盒混用嗎?)


    一般標準品夠用的,如果你每次都使用重復標準而且次數多,可能會不夠。同一批次的標準可以混用的,用不完的板條只要和標準的板條一樣,結果沒有多大影響的,因為使用的是相對比值。

    我們的盒子是美國產的,也是北京的代理商買的。

    我每次就做一個板孔,不重復的,包括標準,你可以通過與標準顏色的差異大體判斷污染情況。

    當然由于一切影響抗體和酶結合的因素會影響結果如酸、堿、強離子、溫度會對結果有影響。還有,提取方法中提取率也是一個問題,不能使用液相或液質類似的方法提取,單純的甲醇或60%甲醇水提取率不高,如果樣品與提取液的比例不當,也不能完全提取出。如果使用含有酸的提取液,或樣品酸性強,會造成假陽性,而堿性的樣品會造成假陰性。

    我們花了很多時間和錢財才搞清這些問題。
    14
    發表于 2008-12-4 08:39:55 | 只看該作者
    我們送檢測部門檢測,同一個樣檢出不同的判斷結果,弄得我們都不知道怎么判定,最后只好再花大價錢定量檢測了。
    15
    發表于 2008-12-4 10:46:07 | 只看該作者
    @@004: @@004: 有點亂,有點亂。
    可惡的三聚氰胺。
    16
     樓主| 發表于 2008-12-4 11:27:21 | 只看該作者
    請問月亮花,能把你的提取方法的過程詳細說一下嗎?謝謝
    17
     樓主| 發表于 2008-12-4 11:45:41 | 只看該作者
    請問月亮花,能把你們提取方法過程詳細的說一上嗎?
    還有酶標儀在讀數時,讀完一遍后 重新讀時發現數據就有變化,(中間間隔3-5分鐘)   是怎么回事?
    18
    發表于 2008-12-4 18:45:05 | 只看該作者
    原帖由 wanglinlin 于 2008-12-4 11:27 發表
    請問月亮花,能把你的提取方法的過程詳細說一下嗎?謝謝

    我們目前使用純甲醇按1:10提取,然后取100微升再稀釋10-20倍,這樣2-50ppm的污染大體就可以測定了。需要有空白和陽性對照以控制檢測質量。
    由于是顯色反應,色源物質會在一定時間內發生變化的,可以立即讀數,發生變化也不影響結果,因為要根據標準曲線及吸光度相對比值計算結果的。
    19
    發表于 2008-12-4 19:40:30 | 只看該作者
    請教月亮花:當你們遇到假陽性怎么辦呢?在操作中能否避免假陽性?知道的朋友可以研究哈;
    20
    發表于 2008-12-4 19:45:59 | 只看該作者
    我們剛測的時候也遇到不少問題,電話質詢了BEACON的試劑盒公司,針對干寵物飼料提供了新的萃取方法,明天發給大家哈,
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