酶制劑檢測,導致誤差最大的因素就是底物和稀釋倍數。制定植酸酶行業標準的時候,對測定顯色的吸光值線性范圍規定得很大,這對測定未知樣時,會造成很大困惑。可以看看這篇
http://www.jmyingheng.com/ >技術交流>生物技術>《酶制劑檢測的非定義性因素的影響》一文。
c 指的是回歸方程,這里一般是指一元方程y=ax+b。怎么由標準曲線求回歸方程恐怕你要查看書了。檢測方法以濃度對吸光值做圖,得到的c的單位就是umol/ml,以物質的量對吸光值做圖,得到的c的單位就是umol。
如果懷疑試劑有問題,就全部重配重買。
這些只能自己檢查-----pH增加pH精密試紙對照校正緩沖液、底物溶液。pH電計用標準液,看看配對了沒有?顯色劑配對了沒有?分光光度計有無偏差?植酸鈉底物是否有效?同時注意底物必須現配現用,不能使用超過12小時的底物溶液。
其他的可以把做標準曲線的測定值發來本站郵箱,就可知道回歸方程是多少。
最好找已知酶活的樣品,做平行測定,可以知道是試劑問題,還是酶本身失活了。
[ 本帖最后由 tgz5637 于 2008-7-5 17:46 編輯 ] |
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