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豬支原體肺炎(168株)活疫苗簡介
豬支原體肺炎(168株)活疫苗是由江蘇省農科院獸醫研究所和南京天邦生物科技有限公司研制申報,經農業部獸用生物制品規程委員會審查通過,2006年3月14日被批準為國家二類新獸藥[證號:(2007)新獸藥證字10號]。豬支原體肺炎(168株)活疫苗的研制是三代研究人員智慧與汗水的結晶,實現了多項重大技術突破。
一、病原特點
1.豬支原體肺炎168株分離于1979年甘肅省蘭州市安寧區豬肺炎支原體強毒株人工感染發病的168號二花臉豬,經3次克隆化培養,無細胞培養340代次,人工致弱為弱毒菌株,何正禮、金洪效、邵國青等三代科研人員深入研究,并通過大量的實驗室與臨床試驗,證明168株安全性穩定,同時具有良好的免疫原性。
2.通過基因特征的研究完成了168弱毒株的生物標記,邵國青等(1998)以SDS-PAGE比較168弱毒株與強毒株及模式株蛋白組成的差異,以脈沖場電泳檢測弱毒株染色體的分子量,同時克隆了168株P46基因,通過測序分析和RAPD試驗,探討弱毒株的變異規律。結果表明,經過漫長的致弱過程,豬肺炎支原體的毒力基因發生了改變,168弱毒株具有其獨特、穩定的基因特征,通過分子基因手段標記的“豬肺炎支原克隆致弱株”于2000年2月5日獲得國家發明專利(專利號:ZL99114276.4)。
3.獨特的無細胞培養技術最終克服了支原體疫苗的生產瓶頸。支原體的培養難度很高,乳兔肺組織苗不可避免地含有較多雜蛋白,而其它同類疫苗多需要采用濃縮手段才能達到所需抗原滴度。1974年金洪效研究員等以變通的Switzer氏培養基(KM2)分離到豬肺炎支原體,在當時被多方采用。這種無細胞的培養技術經多次改變和改進,形成了目前所采用的江蘇Ⅱ號(KM2)培養基,該培養基適用于支原體疫苗的大規模生產,并使168株與同類疫苗相比之下具有高純度、高滴度、低價格的特點。
二、豬支原體肺炎(168株)活疫苗的作用機理與免疫機理
作用機理 支原體強毒的早期感染過程,首先是附著在纖毛的上端,導致細胞病變、纖毛萎縮、功能受損,進一步發展就會破壞黏膜層,導致其他病原菌易于侵入而引起繼發感染。豬感染肺炎支原體后,大量淋巴細胞在各級氣管周圍以及肺泡中聚集、增生,引起咳嗽或氣喘,肺炎支原體抑制被感染細胞的代謝,溶解破壞肺泡結構與淋巴小結,留下永久性的組織傷痕,表現明顯的肺部實變和免疫抑制。豬支原體肺炎(168株)活疫苗具有特異的占位效應與主動免疫反應,形成了抵御強毒支原體感染的堅強堡壘。
占位效應 無論是強毒疫苗株還是弱毒疫苗株都只能粘附在氣管、支氣管、肺泡等上皮細胞表面的受體上,而不進入組織和血液。仔豬在出生后5~7天還不會自然感染肺炎支原體,活疫苗弱毒株通過肺內注射直接到達肺泡黏膜表面,在肺泡細胞表面形成優勢占位,借助黏膜蛋白等營養物質大量繁殖,最終占據肺泡表面所有可占用的空間(大約需1~2周時間),這個過程同時伴隨機體發生局部黏膜免疫、細胞免疫和體液免疫。此時,如果仔豬再次吸入感染肺炎支原體野毒,肺泡表面已缺乏可占據的空位,同時被抗體中和、淋巴細胞吞噬或衰竭而死,從而大大減少氣喘病的發生幾率。
免疫機理 支原體的免疫反應可以分為三種,即體液免疫(循環抗體)、局部黏膜免疫(分泌型IgA)以及細胞免疫。疫苗通過肌肉注射,也可產生較高的循環抗體水平。但從有效防治氣喘病的角度來說,僅有較高的循環抗體水平還是遠遠不夠的,還必須對靶器官如呼吸道和肺部進行重點免疫保護,因為循環抗體很難有效到達這些靶器官,所以還必須依賴針對靶器官的局部黏膜免疫和細胞免疫。經研究證明豬支原體肺炎(168株)活疫苗能同時刺激產生三種免疫效應,有效預防豬的氣喘病。
凈化效應 雖然滅活疫苗免疫和藥物治療對豬支原體肺炎控制有一定效果,但豬肺炎支原體具有免疫逃避、慢性感染、反復發病的特性,所以實現豬場凈化難以實現。支原體活疫苗同樣具備免疫逃避和反復感染的特性,長期免疫可形成豬群和環境的弱毒菌群優勢,通過弱毒菌株的競爭與占位逐步達到強毒菌株的凈化,是豬場長期、持續免疫支原體肺炎(168株)活疫苗的最終目的和必然結果。
三、疫苗特點
1、免疫效力堅強而持久,只需正確接種1次,便可在2周內產生保護力,1個月抗同群感染,2個月抗強毒感染,免疫期可達9個月;
2、安全性更好,采用獲國家專利的豬肺炎支原體克隆致弱株及無細胞培養技術,疫苗純度高,較乳兔肺組織苗更安全;
3、相對進口滅活疫苗具有更高的性價比,在長期使用中會給養殖場創造出更高經濟效益。
四、使用方法
1、豬只在未感染肺炎強毒的時候免疫效果較好,建議5~15日齡時仔豬免疫1頭份。活疫苗采用無細胞培養基技術培養,還可以通過鼻腔免疫接種,為大豬特別是母豬免疫提供了方便,建議在母豬進產房時噴鼻免疫。
2、接種時需采用肺內注射,使用疫苗配套的專用注射針頭,從肺臟所處位置的中間部位的肋間隙垂直進針注射(初次操作可按右側肩胛骨后緣沿中軸線向后2~3肋間,垂直進針是指入針方向與豬體皮膚之間的角度為90°),每只小豬換一個針頭。使用時按瓶簽注射頭份,用滅菌生理鹽水稀釋,每頭豬注射0.5~1毫升。
3、免疫前后1~2周禁用抗支原體藥物(如土霉素、壯觀霉素、卡那霉素、林肯霉素、泰樂菌素等)和飼料添加劑;作用于細胞壁或非敏感藥物(如青霉素、阿莫西林、羥氨芐青霉素、頭孢菌素II、磺胺二甲氧嘧啶、鏈霉素、多粘菌素等)可正常使用。 |
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