畜牧人
標(biāo)題:
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
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作者:
nety
時(shí)間:
2006-8-14 10:23
標(biāo)題:
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
GB/T18651-2002
牛無(wú)漿體病快速凝集檢測(cè)方法
中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了牛無(wú)漿體病快速凝集檢測(cè)方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于牛無(wú)漿體病的診斷。其他動(dòng)物無(wú)漿體病的診斷亦可參照辦法。
2試劑和器械
2.1試劑
a)無(wú)漿體凝集抗原,4℃保存;
b)陰性協(xié)同血清(牛血清因子),-70℃"-80℃保存;
c)陽(yáng)性對(duì)照血清,-20℃保存;
d)陰性對(duì)照血清,-20℃保存。
以上試劑由制標(biāo)單位提供。
2.2器械
2.2.1微量移液器:5μL、10μL或5μL"25μL(連續(xù)可調(diào))。
2.2.2微量移液器頭若干個(gè)。
2.2.3試驗(yàn)用板:取85mm×12.5mm潔凈透明塑料平板,用油漆或油性記號(hào)筆劃成4排×6個(gè)區(qū)位。
3操作步驟
實(shí)驗(yàn)應(yīng)在25℃"28℃環(huán)境下進(jìn)行。
3.1被檢血清按常規(guī)采集和分離,從采集到第一次檢測(cè)前,要在室溫放置38h"48h,然后冷藏或凍存?zhèn)溆茫L(zhǎng)期低溫保存會(huì)使陽(yáng)性率下降。
3.2取出凝集抗原、陰性協(xié)同血清、陽(yáng)性和陰性對(duì)照血清以及被檢血清,在25℃"28℃下放置15min"20min。
3.3同時(shí)在平板第一排左起1、2區(qū)位劃上陽(yáng)性( )和陰性(-)符號(hào),其余各區(qū)位依次編上被檢血清號(hào)。
3.4用微量移液器在編號(hào)區(qū)位內(nèi)按號(hào)分別加陽(yáng)性、陰性對(duì)照血清和待檢血清10μL。
3.5在各區(qū)位加凝集抗原5μL,靠近血清,互不接觸。
3.6在各區(qū)位抗原旁邊加陰性協(xié)同血清10μL,互不接觸。
3.7用牙簽將各區(qū)位的三種反應(yīng)物攤成液面(約成人小指甲蓋面積),混合均勻。做一份血清換用一根牙簽。
3.8用手輕輕晃動(dòng)該平板,在4min"8min內(nèi),當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照血清開始出現(xiàn)凝集反應(yīng)時(shí),對(duì)著黑色背景判讀結(jié)果。
4判定標(biāo)準(zhǔn)
4.1陽(yáng)性對(duì)照血清出現(xiàn)顆粒清晰的凝集現(xiàn)象。
4.2陰性對(duì)照血清沒(méi)有可辨認(rèn)的任何凝集顆粒。
4.3被檢血清凡出現(xiàn)可辨認(rèn)的凝集顆粒的凝集現(xiàn)象,均判為陽(yáng)性反應(yīng)。
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