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    畜牧人
    
標題: 求膨化玉米中淀粉糊化度的檢測方法 [打印本頁]
    

    
作者: lglucky    時間: 2012-8-20 14:52
    
標題: 求膨化玉米中淀粉糊化度的檢測方法
    如題，求膨化玉米中淀粉糊化度的檢測方法。
    
有誰在檢測這個項目的，請將檢測方法和相應的試劑、儀器分享下，先行謝過了！
    
作者: 山中的漫游者    時間: 2012-8-21 11:21
    
這個有國標的阿
    
作者: aoxuechenfeng    時間: 2012-8-21 14:04
    
sdfda
    
作者: 默問    時間: 2012-8-21 14:37
    
漂過
    
作者: 蒙培慧    時間: 2012-8-22 08:32
    
α糊化度的測定 
    
目前，α化度的測量方法有雙折射法、膨脹法、染料吸收法、酶水解法、粘度測量法及淀粉透明度測量法等。不同的測定方法。得到的α化度值會有相當大的差異，這是由于測定基礎和基準等不同，產生差異是必然的。當前比較公認的方法是酶法，其次是染料吸收法中的碘電流滴定法。酶法又分為淀粉糖化酶法、葡萄糖淀粉酶法及β-淀粉酶法等，其基本原理都是利用各種酶對糊化淀粉和原淀粉有選擇性的分解，通過對生成物的測量得到準確的α化度。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;（一）&nbsp;葡萄糖淀粉酶法&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;通常，糊化淀粉容易被淀粉酶消化，因此可用消化相對百分&nbsp;率來準確計算α化度。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;1.&nbsp;儀器與試劑&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;攪拌器，玻璃均質器，1～2ml移液管，恒溫水浴，臺式離心機。99％乙醇，2mol／L醋酸緩沖液（PH4.8），10mol／L氫氧化鈉，2mol／L醋酸，2.6&nbsp;3u／ml葡萄糖淀粉酶液，0.025mol／L鹽酸。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;2.&nbsp;測定步驟&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;試樣的調制：試樣&nbsp;20g（或&nbsp;20ml），加入&nbsp;200ml&nbsp;99％的乙醇，投入高速旋轉的家用混合器中連續旋轉&nbsp;1min，使之迅速脫水。生成的沉淀用&nbsp;3號玻璃過濾器抽濾，用約50m199％的乙醇，接著用50ml乙醚脫水干燥后，放在氯化鈣干燥器中，以水力抽濾泵減壓干燥過夜，用研缽將其輕輕粉碎，仍保存在同樣的干燥器中備用。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;操作：將100mg上述的干燥試料放入磨砂配合的玻璃均質器中，加8ml蒸餾水，用振動式攪拌機攪拌至基本上均勻為止。接著將均質器上下反復幾次，使之成為均勻的懸浮液。再用振動式攪拌機均勻化，隨即各取懸浮液2ml注入2只容量為20ml的試管中，分別用作被檢液和完全α化檢液。向被檢液試管加&nbsp;2mol／L醋酸緩沖液（pH4.8）&nbsp;1.6ml和水0.4ml，而往完全α化檢液試管添加&nbsp;10mol／LNaOH溶液0.2ml，在證實已于室溫下完全溶解之后，加2mol／L醋酸&nbsp;1.6ml（醋酸的添加量需預先通過試驗決定，其量為使pH調至4.8時所用的醋酸量）。最后加水使容量為4ml。將這2只試管放在37℃的恒溫槽中預保溫數分鐘后，添加酶液lml（2.63u），每隔10～15min振蕩一次，共反應60min。然后，得反應液&nbsp;0.5ml加入預先放有10ml&nbsp;0.025mol／L鹽酸（起停止反應的作用）的錐底離心管中，上下振蕩數次，在轉速為3000r／min的離心機中分離10min。取上層清液0.5m1，用蒸餾水稀釋1倍，用Somogyi－Nelson法（見后）或適當的方法定量還原精，并從下式求出α化度：&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;市售的玻璃均質器磨砂配合是硬性的配合，需用150或400目的金剛砂來調節配合。均質器的配合，以在干燥狀態下磨砂配合棒能緩慢地自然落下者為好。葡萄糖淀粉酶用的是內孢霉或黑曲霉的粗酶。酶活力以在pH4.8的醋酸緩沖液（0.2mol／L）中，在37℃能將0.2％的可溶性淀粉生成1μg分子葡萄糖的酶量作為1個單位（U）。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;（二）Somogyi～Nelson法&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;試劑：25g無水碳酸鈉，25g酒石酸鉀鈉，20g碳酸氫鈉，200g無水硫酸鈉加入800ml水中，使之溶解并定容成&nbsp;1L。必要時則需過濾。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;B．30g結晶硫酸鈉（CuSO4·5H2O）溶于200ml含4滴濃硫酸的水中。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;C．25g鉬酸銨溶于&nbsp;450ml預先添加&nbsp;21ml濃硫酸的水中。&nbsp;3g砷酸氫二鈉（Na2HAsO4·7H2O）溶解于25ml水中，并將此溶液慢慢地加入不斷攪拌下的上述水溶液中，然后稀釋至500ml。將此溶液置于55℃水浴上小心保溫30min，或在37℃放置過夜。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;取上述經酶液處理過的完全α化的檢液和被檢液各0.5ml，分別用蒸餾水稀釋&nbsp;l倍后，加到新配制的&nbsp;1.0mlD液中，（&nbsp;1.0mlB波加到25mlA液中）總容積為2.0ml。混合液在沸水中放置20min，接著用冷的流水冷卻5min，然后加入1.0mlC試劑，使其充分混合，直到混合液已不放出CO2氣為止。靜置10min后，用水稀釋至25ml。用裝上綠色濾光片的比色計測定，或用分光光度計測定520nrn波長處的光密度。用麥芽糖作標準曲線，參比溶液為&nbsp;lml經均質器攪拌均勻后的試樣溶液加&nbsp;lml0.04mol緩沖溶液及2ml水的混合液。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;（三）碘電流滴定法&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;糊化淀粉能與碘結合成螺旋狀復合物，生淀粉則不能。此法就是將試樣在懸浮液和完全α化的溶液狀態，通過電流滴定法測定碘的結合量，從兩者之比來求糊化度的方法&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;1.&nbsp;儀器與試劑&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;攪拌器，玻璃均質器，10ml移液管，恒溫水浴，滴定管，電流計。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;99％乙醇，乙醚；&nbsp;lmol／L&nbsp;HCI，0.5mol／L&nbsp;KOH，&nbsp;0.4mol／L&nbsp;KI，&nbsp;0.001&nbsp;mol／L&nbsp;。&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;2.&nbsp;測定步驟&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;精確稱取試樣淀粉30mg（直鏈淀粉用5.0mg），放入玻璃制磨砂配合的手動均質器中，加水&nbsp;10ml，使之充分分散（約往復&nbsp;20次）。在分散液里加&nbsp;lmol／L&nbsp;HCl&nbsp;10ml與&nbsp;0.5mol／L&nbsp;KOH&nbsp;10ml的混合液，以及&nbsp;0.4mol／L&nbsp;KI&nbsp;5ml，并加水定容為&nbsp;100ml。將此混合液移入滴定用的帶夾套的燒杯里，在20～30℃的溫度范圍內，用0.001mol／L&nbsp;KIO3溶液滴定。每滴加&nbsp;0.2ml，經&nbsp;2min后讀取電流值，將它對應于滴定值作圖，求得碘結合量。試樣測定時，先將它完全溶解在&nbsp;10ml&nbsp;0.5mol／L的KOH中，然后加&nbsp;10ml&nbsp;HCI與5ml&nbsp;0.4mol／L&nbsp;KI，再加水定容成100ml，以后的滴定操作同上。&nbsp;本方法對于直鏈淀粉是專一的。
    
作者: 蒙培慧    時間: 2012-8-22 08:34
    
復制上去怎么出現那么多亂碼呀？




    

    

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