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    畜牧人

    標題: 自家疫苗制作方法 [打印本頁]

    作者: 李小鵬    時間: 2011-3-10 21:49
    標題: 自家疫苗制作方法
    一、    儀器

    恒溫干燥箱、組織搗碎機、高壓蒸氣滅菌器、天平、燒杯、漏斗、鐵架臺、手術刀、手術剪、鑷子、止血鉗、廣口瓶


    二、    原料與物品

    甲醛、甘油、紗布、注射用生理鹽水(無熱源物質,以免注射時發生過敏反應,減少變態反應)、膠手套、自家病豬的內臟組織

    三、
    制作步驟

    1              滅菌
    將所需儀器、原料和物品進行高壓滅菌。

    2              取樣
    采取自家病豬的內臟器官和組織。一般原則:優先采取含毒量最高的組織或器官,肝—脾—腎—肺—淋巴結(整個采樣過程要求無菌操作)。

    3              去菌
    用注射用生理鹽水洗去樣品表面的細菌。

    4              剪碎
    用手術刀、手術剪將樣品剪碎,去除其中的結締組織、血管等難以搗碎部分。

    5              稱重
    用天平稱量所剪碎的樣品,并記錄好其重量。

    6              搗碎
    用組織搗碎機將稱量好的樣品搗碎,呈肉湯樣,要求越碎越好。

    7              凍融
    將搗碎好的樣品置于冰箱內反復凍融三次,凍融過程中前4小時內,每隔20分鐘搖勻一次,盡量使病毒釋放出來。

    8              過濾
    凍融后完全溶解之后,用紗布過濾兩次,先用四層紗布過濾一次,再用八層紗布過濾一次即可

    9
    稀釋
    用注射生理鹽水溶液以15的比例將樣品稀釋。

    10          滅活
    在稀釋好的樣品中添加0.4%甲醛(滅活劑)和5~10%甘油(保護劑),再將其置于37的恒溫干燥箱內滅活24~48小時,盡量使病毒全部被滅活,但又必須最大限度地保持其抗原性。

    11          安全檢測  用小白鼠進行免疫接種,觀察其反應和行為,同時剖解觀察其病理變化。

    12          無菌檢驗  用肉湯或瓊脂培養基培養,觀察其是否有細菌生長。

    13
    分裝



    14      
    免疫接種

    15          效力檢驗



    四、  疫苗的使用說明


    1
    保存
    2~
    8冷藏

    2
    保質期6個月

    3
    用法用量
    使用前必須先充分搖勻,以2ML/頭進行肌肉注射,于發病期前10~15天接種,也可用于緊急接種,一般免疫接種后10天左右產生免疫抗體。


    作者: 唐朝2009    時間: 2011-3-11 00:01
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