畜牧人
標題: 對纖維素酶測定問題求解！ [打印本頁]
作者: zzy8604 時間: 2011-2-23 14:43
標題: 對纖維素酶測定問題求解！
本帖最后由 zzy8604 于 2011-2-23 14:48 編輯
按Steward(1997)方法測定，以純棉花在瘤胃液中培養48小時(38 ℃ )的消失率代表瘤胃液中纖維素酶的相對活力。
在實驗中，我用的是亨氏管保持的厭氧環境，遇到幾個問題：一、試驗中用的金屬濾布是不是用的特殊的金屬？加入重鉻酸鉀后在沸水浴，溶液的顏色發生了改變。金屬濾布中的鐵和重鉻酸鉀發生了反應，還有一股刺鼻的味道。二、用的金屬濾布是不是要稱重，保持單一的變量？三、配制的硫酸亞鐵銨溶液是不是要進行標定？在網上查了下，有的是用重鉻酸鉀標定，那么用公式中的V1就可以算出來。按照國標是用的高錳酸鉀來標定。
具體方法見下（也是參考其他人的）：
按Steward (1997)方法測定，稱取5毫克脫脂棉于試管中，加入Menke培養液1毫升，再加瘤胃液2毫升，混合后在38℃恒溫水浴振蕩器中厭氧培養2天。取出后放在金屬濾布上（200目）過濾，在依次用水、2mol/L氫氧化鈉、水、2mol/L醋酸、水沖洗。吸干，連同濾布一起移入50毫升錐形瓶中。在錐形瓶中加入0.36mol/L重鉻酸鉀5毫升，沸水浴30分鐘，冷卻后加入15毫升蒸餾水，2滴鄰苯氨基苯甲酸作指示劑，用0.2mol/L硫酸亞鐵銨滴定到終點（由紫紅色變成藍色），記錄所消耗的毫升數（V3）.用未被瘤胃液作用的5毫克棉花，按同樣操作做空白對照。記錄所消耗的毫升數（V2）.以純棉花在瘤胃液中培養48小時（38℃）的消失率代表瘤胃液中纖維素酶的相對活力。
纖維素酶的相對活力%=（V3-V2）/( V1-V2)×100%
其中，V1為5毫升0.36mol/L重鉻酸鉀所需0.2mol/L硫酸亞鐵銨的滴定毫升數。
謝謝大家！
作者: 401636839 時間: 2011-2-23 16:26
用3.5 一二硝基水楊酸法測Cx 酶活力，纖維素酶水解纖維素，產生纖維二糖、葡萄糖等還原糖，能將3.5 一二硝基水楊酸中的硝基還原成橙黃色的氨基化合物，利用比法色法測定其還原物的生成量來表示酶的活力
作者: zzy8604 時間: 2011-2-23 18:49
本帖最后由 zzy8604 于 2011-2-25 16:38 編輯
那種方法我也知道 現在就要用這種方法測纖維素酶的活性 不需要分開來測 測總的就可以了
問過一些老師 都沒有回應，只有到論壇來問下，還是沒人氣啊 {:3_98:}
| 歡迎光臨 畜牧人 (http://www.www12347.com/) |
Powered by Discuz! X3.5 |
主站蜘蛛池模板：
玉树县|
新乐市|
定远县|
宣威市|
商都县|
楚雄市|
靖州|
阿拉善右旗|
马边|
大英县|
南川市|
鹰潭市|
华安县|
安新县|
夏河县|
宁化县|
乌海市|
玉山县|
犍为县|
达拉特旗|
平南县|
拜城县|
岑溪市|
江孜县|
襄垣县|
静宁县|
资兴市|
松原市|
祁连县|
原平市|
旬邑县|
大邑县|
新绛县|
安溪县|
进贤县|
胶州市|
九龙坡区|
永康市|
澄迈县|
宜州市|
秭归县|