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    畜牧人

    標題: 植酸酶檢測酶活為什么很低,請高手賜教 [打印本頁]

    作者: wy0351    時間: 2011-1-27 11:29
    標題: 植酸酶檢測酶活為什么很低,請高手賜教
           我按照國標做的植酸酶測定,但是酶活總是很低,5000U的測出來2000多一點,而且結果數據很不穩定,反應過程中標準空白和樣品空白的操作是一樣的嗎?都是先加終止液再加底物的嗎?加入底物后的樣品空白是渾濁的,離心后測出的吸光值是負數,請問這個現象是正常的嗎?拜托高手賜教,感激之至!


    作者: lhx    時間: 2011-1-27 12:31
    期待檢測過的回答
    作者: 馬前卒    時間: 2011-1-27 14:46
    植酸酶含量的檢測平行性不好!反應條件很難控制。
    作者: saturnbio    時間: 2011-1-27 17:56
    沒親手做過,改天問一下檢測人員。
    作者: 極限天空    時間: 2011-1-28 08:17
    本帖最后由 極限天空 于 2011-1-28 08:19 編輯

    1.樣品先加底物,空白先加終止液.
    2.控制好PH值和溫度.時間.
    3.國標的檢測方法不是很好用.
    4.有的廠家的植酸酶測定結果不大穩定.
    5.對檢測人員的要求比較高,

    作者: wy0351    時間: 2011-1-28 12:30
    您好,我想請問一下有什么方法測植酸酶比較好一點呢。我剛接手這個實驗,以前的人也是按國標做的,我做了幾天發現國標里好多說的很含糊,而且有的感覺不是很對,例如偏釩酸銨溶液配制那就有誤導的感覺,硝酸不能提前加入的,還有,做標準曲線,前面說的按無機磷的量,而后面給出的公式好像是按濃度來算的。我現在很迷茫,我的樣品空白老是測出負值,不知道原因是什么。我的回歸方程系數也很低
    作者: liyunhuddt    時間: 2011-2-11 14:16
    你如果用標準空白調零的話,樣品空白是負值是正常的,用樣品的OD減去空白算木什么影響。我們做的時候一般用蒸餾水調零,這樣比較穩定。
    作者: fm001982    時間: 2011-2-17 16:32
    注意底物,有些植酸鈉配置出來有可能使PH發生變化,需要調整。

    作者: 夜飲_客天下    時間: 2011-7-30 15:02
    這個問題解決沒有?
    作者: 361759357    時間: 2011-8-24 18:26
    也許不一定是檢測的問題,可能是植酸酶自身存在問題也不一定,本來植酸酶就及其不穩定。




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