畜牧人
標題:
黃曲霉毒素M1檢測試劑盒
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作者:
magnech
時間:
2011-1-5 13:39
標題:
黃曲霉毒素M1檢測試劑盒
本帖最后由 magnech 于 2011-1-5 13:41 編輯
黃曲霉毒素M1快速檢測試劑盒變異系數均小于10%,檢測下限為0.05ppb黃曲霉毒素M1檢測試劑盒,可定性、定量檢測牛乳及其他乳制品等樣本中的黃曲霉毒素M1
一、概要
黃曲霉毒素是一類真菌(如黃曲霉和寄生曲霉)的有毒的代謝產物,它們具有很強的致癌性,主要存在于谷物、堅果、棉籽以及一些和人類血液,動物飼料相關的產品中。黃曲霉毒素M1是黃曲霉毒素B1的羥基化代謝產物,也是一種強致癌物質。牛乳及其制品是易受到黃曲霉毒素M1污染的食品之一。Aflatoxin M1的檢測方法有高效液相色譜法(HPLC),薄層層析法(TLC)等。而使用黃曲霉毒素M1 ELISA試劑盒則能夠快速而準確的分析樣品中黃曲霉毒素M1殘留。
黃曲霉毒素M1檢測試劑盒是應用ELISA技術研發的新一代真菌毒素檢測產品,操作時間短于60min,能最大限度地減少操作誤差和工作強度。
二、試驗原理
黃曲霉毒素M1檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標板微孔條上預包被黃曲霉毒素M1抗原,樣本中黃曲霉毒素M1和此抗原競爭黃曲霉毒素M1抗體,同時黃曲霉毒素M1抗體與酶標二抗相結合,經TMB底物顯色,樣本吸光值與其含有的黃曲霉毒素M1成負相關,與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數,即可得出樣品中黃曲霉毒素M1的含量。
三、適用范圍
黃曲霉毒素M1檢測試劑盒,可定性、定量檢測牛乳及其他乳制品等樣本中的黃曲霉毒素M1。
四、提供的材料與試劑
酶標板、高濃度標準品(810ppb)、AFM1酶標物、AFM1抗試劑、底物液A液、底物液B液、終止液、濃縮洗滌液(10×)、AFM1濃縮樣品/標品稀釋液(4×)
注:試劑盒檢測范圍0.05ppb~4.05ppb
五、樣本前處理步驟
(一)牛奶
┅┅將含脂牛奶降溫至10℃以下,于3500轉/ min下離心10min;
┅┅用吸管棄去上層脂肪層,下層牛奶液即為待測液。
(脫脂牛奶直接測定)
(二)奶粉
┅┅取5g奶粉于100ml三角瓶中,加入25ml蒸鎦水;
┅┅振蕩5min,使其完全溶解;
┅┅之后樣品處理同牛奶樣品處理方法。
六、操作步驟:
1、將所需試劑從冷藏環境中取出,置于室溫(20~25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數量的微孔板,將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封,保存于2~8℃。不要冷凍。
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、編號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
5、加標準品/樣本:加標準品/樣本50l到對應的微孔中,加入AFM1酶標物50l/孔,再加入AFM1抗試劑50l/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環境中反應30min。
6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,用洗滌工作液300l/孔,充分洗滌5次,每次間隔30s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。
7、顯色:加入底物液A液50l/孔,再加底物液B液50l/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環境反應15~20min。
8、測定:加入終止液50l/孔,輕輕振蕩混勻,設定酶標儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,請在5min內讀完數據),測定每孔OD值。(若無酶標儀,則不加終止液用目測法可進行判定)。
七、注意事項
1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20~25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3、每加一種試劑前需將其搖勻。
4、反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6、儲存條件保存試劑盒于2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板放進自封袋重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
7、試劑變質的跡象發色試劑有任何顏色表明發色劑變質,應當棄之。0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質。
8、在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為15~20min即可。若顏色較淺,可延長反應時間到30min(或更長)。反之,則減短反應時間。
9、濃縮洗滌液如有結晶屬正常現象,請加熱溶解后使用。
10、該試劑盒最佳反應溫度為25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。
、貯藏條件及保存期
貯藏條件:保存試劑盒于2~8℃。
保存期:該產品有效期為12個月。
北京華安麥科生物技術有限公司
地址;北京市昌平區科技園區超前路
電話:010-80108031
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