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畜牧人

標題: 大家討論下防霉劑的使用效果。 [打印本頁]

作者: yooboo 時間: 2010-12-30 11:48
標題: 大家討論下防霉劑的使用效果。
防霉劑的作用效果大家有沒有做過實驗的？

作者: 401636839 時間: 2010-12-30 13:18
飼料防霉劑防霉效果的檢測方法
發布: 2010-04-03 |  作者: agrione
盲目挑選和使用飼料防霉劑，往往不僅事與愿違，更會危害飼料企業的經濟利益及品牌聲譽。所以，掌握并采用科學、正確、有效的檢測方法，自我判別防霉劑產品之優劣是各飼料企業維護自身利益的當務之急。
目前用于飼料防霉劑防霉效果的檢測對比之方法有：杯碟法、最低抑菌濃度法、二氧化碳釋放法、溫度測定法、飼料常規試驗、高溫高濕法等。

杯碟法測定最大抑菌圈直徑，用其大小來定量測定其防霉效果，試驗要求選配一種理想溶劑，要求較高、操作復雜；最低抑菌濃度法需將各種防霉劑配成濃度梯度液，工作量大，與杯碟法一樣僅適于作初選、速選之用；二氧化碳釋放法較難掌握急劇釋放co2的時間，需把握臨界時段，而且所需儀器昂貴；溫度測定法利用飼料異常發熱是飼料霉變的前兆這一特點，它同飼料常規試驗一樣檢測耗時很長，需2～3個月；高溫高濕法著重憑借肉眼觀察外觀，準確性不理想。

本檢測方法是將現行的gb13092?91《飼料中霉菌檢測方法》具體應用于飼料防霉劑防霉效果的對比檢測，經多年實踐驗證，此方法操作簡便、結果準確；在多家飼料生產廠家應用，認為切實可行。

1原理    根據霉菌生理特性和防霉劑防霉作用機理，選擇適宜霉菌生長而不適宜細菌生長的培養基，采用平皿計數方法，在一定菌液中加入一定量的防霉劑，培養后測定霉菌菌落總數。菌落總數越少，表明其防霉抑菌效果越佳，并根據測的數據計算出各防霉劑的抑菌率來準確表示。

2材料與設備    分析天平（感量0．0001g）、霉菌培養箱（10℃±1℃～50℃±1℃）、高壓滅菌器（電熱式蒸汽消毒器）、干燥箱（50℃±1℃～250℃±1℃）、水浴鍋（30℃±1℃～80℃±1℃）、振蕩器（往復式）、電爐、試管架、玻璃三角瓶（250ml）、試管（25ml）、平皿（φ9cm）、吸管（1ml、10ml、100ml）、量筒（25ml、100ml）、洗耳球、無菌工作臺。

3試劑及配制    3．1高鹽察氏培養基    3.1.1成分硝酸鈉2g、磷酸二氫鉀1g、硫酸鎂（mgso4?7h2o）0．5g、氯化鉀0．5g、硫酸亞鐵0．01g、氯化鈉60g、蔗糖30g、瓊脂20g、蒸餾水1000ml。上述試劑，瓊脂為生化試劑，其余為分析純試劑。

3.1.2制法用蒸餾水加溫溶解以上成分，分裝后，于115℃高壓滅菌30min。必要時，可酌量增加瓊脂。

3．2稀釋液 3.2.10．85％生理鹽水稱取分析純nacl8．5g，定容1000ml。 3.2.2制法121℃高溫高壓滅菌30min。

3．3所有玻璃器具采用干法滅菌在160℃下滅菌1．5h～2h。    4操作步驟    4．1稱取有霉菌的飼料25g，放入含有225ml滅菌生理鹽水的250ml三角瓶中，置振蕩器上振蕩30min。

4．2用10ml吸管吸取10ml1∶10的上述稀釋液于25ml試管中，用洗耳球及1ml吸管反復吹吸50次，使霉菌孢子分散開。取1ml此稀釋液加入9ml生理鹽水，充分混勻得1∶100稀釋液。取1∶100稀釋液1ml，加到100ml滅菌生理鹽水中，充分混勻得1∶10000帶有霉菌的稀釋液（此稀釋液每毫升含霉菌菌落數大致100個）。

4．3取1∶10000帶菌液，用1ml滅菌吸管吸取1ml于平皿中。    4．4稱取各防霉劑0．2000g分別置于250ml滅菌的三角燒瓶中，加滅菌后的生理鹽水100ml，放置振蕩器上振蕩30min取下，置電爐上加溫至50℃左右3min～5min，使防霉劑的有效成分充分溶解。

4．5取帶有防霉劑（4．4）溶液1ml（充分混勻后再取），放置于帶有1ml霉菌孢子溶液的平皿中，搖勻。每一種防霉劑樣品均做雙皿。

4．6將滅菌后涼至45℃左右的高鹽察氏培養基15ml～20ml注入各平皿中，充分混勻，待瓊脂凝固后倒置于25℃～28℃的培養箱中，培養3d后開始觀察，培養觀察一周。

4．7每一批樣品做兩份含1ml霉菌不加防霉劑的空白試驗。

4．8計算以加了各種防霉劑平皿的霉菌菌落數與不加防霉劑含1ml霉菌的平皿的霉菌菌落數相比較，計算出各防霉劑的抑菌率。

5注意事項    5．1培養基應煮沸后再分裝、滅菌。 5．2飼料空白的霉菌孢子一定要充分打散，分布均勻。 5．3在稀釋、取樣過程中，每稀釋1次，每取樣1次，均應更換另一支干凈的滅菌吸管。    5．4抑菌率的大小與霉菌空白數緊密相關，各防霉劑的抑菌率在同一次實驗條件下才能公平比較。每皿菌落數控制在30～150，代表性比較好。

5．5檢樣從開始稀釋到傾注最后一個平皿所用時間不宜超過20min。

5．6各步操作切記無菌操作    此方法除用于檢測對比飼料防霉劑防霉效果以外，也可用于檢測飼料各原材料的帶菌程度，根據飼料衛生標準gb13078?91準確判定原材料的新鮮程度，從而達到準確監控各原材料品質之目的。同時可將加有防霉劑的培養物與未加防霉劑的飼料空白培養物做對比，結合低倍活物鏡檢，初步確定各防霉劑有效抑制霉菌的種屬，可看出各防霉劑對各種霉菌殺菌作用力。

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