畜牧人
標題: 九鼎集團養豬服務中心診斷實驗室簡介 [打印本頁]
作者: 湖南九鼎 時間: 2010-12-8 10:13
標題: 九鼎集團養豬服務中心診斷實驗室簡介
本帖最后由 湖南九鼎 于 2010-12-8 10:15 編輯
湖南九鼎科技（集團）有限公司 陳建華0-8719310
郵編：414000
九鼎集團養豬服務中心診斷實驗室于2010年5月正式成立，這是九鼎企業向服務型公司轉變的又一重大舉措。為便于更好地為養豬客戶服務，讓客戶對豬病診斷實驗室工作的內容與作用有所了解，現特作如下介紹：
豬病診斷實驗室總投資200多萬元，擁有當前較先進的儀器與設備，采用國家認可的美國IDXX公司進口的標準試劑盒。實驗室現有員工四名，其中碩士研究生一名，大學本科三名，且都具有多年的豬場實踐工作經驗，不僅能為客戶豬場準確檢測各項數據，還能根據檢測結果分析指導，為客戶豬場提供切實可行的豬場問題解決方案。豬病診斷實驗室工作不僅有集團服務專家團隊作后盾，還有遍布各營銷省區的二十多位市場服務經理作先鋒，可深入所需客戶豬場現場指導，為客戶真正解決生產實際中遇到的各種難題。
實驗室開展的主要項目有：
1、三大主要病毒性疾病的抗體水平檢測；
2、常見致病性細菌的分離培養及藥物敏感試驗；
3、飼料、原料的霉菌毒素檢測及常規生化指標檢測。
一、抗體水平的檢測原理及結果判斷方法
豬病診斷實驗室主要針對豬瘟、藍耳、偽狂犬三大重要的病毒性疾病的抗體水平檢測。
1、豬瘟（CSFV）抗體水平檢測
①、原理：阻斷ELISA，用CSFV抗原包被微量反應板，如果被檢樣品中存在CSFV Ab,就會阻斷HRPO-抗CSFV單克隆抗體與抗原包被板的反應。抗CSFV單克隆抗體與抗原的結合可以通過HRPO酶與底物的顯色程度來判定。酶標儀記錄在450nm處各樣本OD值。
②、結果判定：
陰性對照平均值＞0.50，陽性對照阻斷率＞50%，該檢測結果才有效。阻斷率blocking%=(陰性對照平均值-樣本OD值)/陰性對照平均值×100%。
樣本阻斷率≥40%判定為陽性；
樣本阻斷率≤30%判定為陰性；
樣本阻斷率在30%-40%之間判定為可疑，就應該在數日后采血重測。
阻斷率≥50%代表免疫合格，良種場要求CSFV Ab 陽性率100%，合格率90%。樣本離散度種用豬CV要求＜20，肉豬＜25。
③、豬瘟疫苗種豬正常免3次后抗體水平范圍（參考）：
疫苗種類
阻斷率范圍
普通細胞苗
45-75
高效細胞苗/組織苗
55-95
脾淋苗
65-100
結合實際免疫所用疫苗種類，樣本平均值要求在參考范圍內，高于參考值提示已經感染豬瘟，低于參考值提示該種疫苗免疫效果不好。
2、豬藍耳病毒（PRRSV）抗體水平檢測
①、原理：將重組的PRRSV抗原包被在微量反應板上，被檢測樣品在包被孔中孵育時，針對PRRSV的特異性抗體與之形成抗原抗體復合物，洗去未結合成分后，加入HRPO標二抗，與之前的抗原抗體復合物結合，洗去沒有結合的酶標抗體，再加入酶底物和顯色劑，顏色的深淺有存在的抗PRRSV特異性抗體的量決定。
②、結果判定：陽性對照平均值-陰性對照平均值≥0.150，陰性對照平均值≤0.150，試驗才成立。S/P值=（樣本OD值-陰性對照平均值）/（陽性對照平均值-陰性對照平均值）
S/P≥0.4該樣本判定為陽性
S/P＜0.4該樣本判定為陰性
③
、豬場PRRSV抗水平要求：
對免疫過PRRSV疫苗的感染群，通常有以下幾種抗體模式：穩定種豬群S/P2.0左右，很少大于2.5；良好免疫群S/P0.7-1.8，有些可能大于2.0。
S/P大于2.5提示病毒血癥；
S/P大于3.5提示急性感染。
良好場要求抗體陽性率100%，S/P值在0.7-2.5的占90%。樣本離散度CV越小越好，樣本平均值要求1.2±0.4范圍內。
3、豬偽狂犬（PRV-gB）抗體水平檢測
①、原理：通過40倍稀釋的樣品在抗原包被的微孔板上進行。初次孵育時，存在于檢測樣品中的PRV抗體會與酶標板上的抗原結合。然后開始洗滌步驟，向微孔板中加入酶標記的抗PRV gB的單克隆抗體，進行第二次孵育，在此過程中其與抗原競爭結合。如果檢測樣品中不存在PRV gB抗體，酶標單抗就可以與抗原自由結合，相反，如果檢測樣品中存在PRV gB抗體，酶標單抗與抗原的結合就會被阻斷。而在此次孵育過后，未結合的酶標單抗就會被沖洗掉，加入底物/顯色劑溶液后，在酶的存在下，底物轉變為一種能與顯色劑反應產生藍色的物質。使用分光光度計測量650nm的吸收值A(650)。
②、結果判定：S/N=樣本OD值/陰性對照平均值
S/N＞0.70該樣本被判定為陰性；
S/N≤0.60該樣本被判定為陽性；
S/N介于0.60-0.70該樣本判定為可疑，過一段時間后重新采血測。
③、良好場要求：
在豬場應用偽狂犬基因工程缺失苗的前提下，測PRV-gB抗體水平可以評估疫苗的免疫效果，良好場要求抗體陽性率90%。
二、常見致病性細菌的分離培養及藥物敏感試驗
（一）、常用的幾種細菌染色方法：
1、革蘭氏染色法；2、瑞士染色法；3、吉姆薩染色法。
（二）、豬場常見的八種細菌：
1、豬丹毒；2、鏈球菌；3、巴氏桿菌；4、副豬嗜血桿菌；5、胸膜肺炎放線菌；
6、大腸桿菌；7、沙門氏菌；8、葡萄球菌。
（三）、細菌分離培養總體步驟：
1、試劑器材的準備；2、病料的采集；3、病料接種；4、細菌分離鑒定；5、動物致病性試驗；6、藥敏試驗；7、菌種保存。
（四）、將分離純化的致病菌做藥物敏感試驗：
1、豬場要做藥敏試驗的原因：(1）不同豬群感染的細菌不同；(2）同樣的細菌對藥物的敏感不同；(3）細菌間的耐藥譜不同；(4）用藥方法不科學；(5）用藥時間和劑量不合理。
2、藥物敏感試驗的作用：體外試驗研究豬群感染細菌對臨床常用藥物的敏感性，針對性給豬群使用最有效的藥物以及劑量與聯合用藥，以提高疫病預防與治療效果，減少藥物浪費和細菌株的耐藥譜的增加。
三、飼料原料的霉菌毒素檢測以及飼料與水質的常規生化指標檢測
本項檢測會與九鼎集團飼料檢測中心化驗室共同完成，便于客戶采購合格的飼料原材料，采取相應的應對措施，指導客戶應用合理的飼料營養配方。
當前豬價看好，但流行的疾病錯綜復雜，生豬難養，開展實驗室診斷，獲取最佳的豬場問題解決方案非常必要，建議規模化豬場，重點大客戶定期采樣送養豬服務中心診斷實驗室做常規健康檢查與免疫監測，根據豬場規模的大小，采集相應的樣品數，及時送檢，九鼎集團將極力為客戶排憂解難。
九鼎集團各區域將以市場技術服務人員為中心，協同營銷服務主管充分滿足各類客戶的需求，適時開展診斷室服務業務，體現九鼎的服務特色，創造更多的產品附加值。
作者: monkeyb307 時間: 2010-12-8 19:16
不錯
對產業提升有幫助
如何讓老闆肯花錢診斷又是一回事了
作者: playboy 時間: 2010-12-8 19:30
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