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畜牧人

標(biāo)題: 光合細(xì)菌怎樣培育 [打印本頁]

作者: zm19862009 時(shí)間: 2010-10-10 17:47
標(biāo)題: 光合細(xì)菌怎樣培育
看有沒有專門培養(yǎng)光合細(xì)菌的大師，將自已的經(jīng)驗(yàn)分享大家

作者: 阿文哥 時(shí)間: 2010-10-10 18:46
頂下，我關(guān)注下

作者: 洲際牧業(yè) 時(shí)間: 2010-10-10 19:32
這個(gè)可是商機(jī)呀！要是你要光合細(xì)菌還可以，要是想接種可以

作者: amypx 時(shí)間: 2010-10-10 19:38
關(guān)注一下

作者: huyidao068 時(shí)間: 2010-10-10 20:00
光合細(xì)菌培養(yǎng)條件

1、營(yíng)養(yǎng)條件

光合細(xì)菌細(xì)胞體構(gòu)成元素主要有：碳、氫、氧、氮、磷、鉀、鈉、鎂、鈣、硫和一些微量元素等，它們也是所有生物細(xì)胞構(gòu)成的主要物質(zhì)。一般情況下，細(xì)胞鮮重：水占80％-90％、無機(jī)鹽1％-1.5％、蛋白質(zhì)7％-10％、脂肪1％-2％、糖類和其它有機(jī)物1％-1.5％。其中干細(xì)胞含碳45％-55％、氫5％-10％、氧20％-30％、氮5％-13％、磷3％-5％、其它礦物元素3％-5％。光合細(xì)菌的細(xì)胞壁具有半透性，能選擇性地讓一些營(yíng)養(yǎng)元素按一定比例進(jìn)內(nèi)，在酶的作用下合成自己的細(xì)胞組織和裂新的個(gè)體。

營(yíng)養(yǎng)元素的全面和搭配的合理,是營(yíng)養(yǎng)條件的關(guān)鍵。根據(jù)這一要求,選用多種食品添加劑，科學(xué)配方，經(jīng)特殊加工而成的"光合細(xì)菌培養(yǎng)基"（圖2），基本符合光合細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的營(yíng)養(yǎng)要求，無毒無副作用，使用安全，固狀結(jié)晶體便于包裝和運(yùn)輸，而且有2年的保質(zhì)期。用其生產(chǎn)菌液（每毫升含有30-50億個(gè)活菌體），成本每500克僅0.2元，且現(xiàn)制現(xiàn)用，質(zhì)量明優(yōu)于市售同類產(chǎn)品。

光合細(xì)菌培養(yǎng)基（產(chǎn)品：Q/321081BJA001-2000,即光合細(xì)菌高效生長(zhǎng)劑），是光合細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需各種營(yíng)養(yǎng)元素的組合體。每種原料都能得以充分利用，最大限度地生產(chǎn)高濃度的菌液，因此，單位效價(jià)的光合細(xì)菌菌液生產(chǎn)成本低、質(zhì)量好，這無論是對(duì)于用戶、經(jīng)銷商還是廠家都有很大的益處，對(duì)在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的推廣和普及將產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。

2.環(huán)境條件

有了營(yíng)養(yǎng)全面的光合細(xì)菌培養(yǎng)基，才是內(nèi)因，還不能培養(yǎng)出光合細(xì)菌菌液。還需有適宜光合細(xì)菌生長(zhǎng)的環(huán)境條件，才能培養(yǎng)出優(yōu)質(zhì)的菌液。環(huán)境條件具體有以下幾個(gè)方面：

（1）.培養(yǎng)介質(zhì)：含菌量較低的清潔淡水、海水或加粗食鹽的淡水。從經(jīng)濟(jì)、實(shí)用的角度考慮，地下水含菌量低，為最佳水源；清潔的地表水也可使用；含氯量較高的自來水應(yīng)敞口放置兩三天或調(diào)PH值至偏堿后使用；蒸餾水及純凈水固然很好，但成本太高，可用于提純菌種。

（2）.酸堿度（PH）值：7.5-8.5最佳（適應(yīng)范圍6-10）。

（3）.水硬度：PH值中性時(shí)10度以下。即調(diào)節(jié)PH值至8.0左右時(shí)，培養(yǎng)介質(zhì)中的乳白色沉淀物不宜過多。

（4）.溫度：25℃-34℃最佳（適應(yīng)范圍15℃-40℃）。

（5）.光照度:3000LX-4000LX最佳。即每25千克菌液需用60瓦左右的電燈泡進(jìn)行光照，當(dāng)然，太陽光最好且無需成本。

（6）.透氣性：密閉、敞口皆可培養(yǎng)，密閉效果更好。

（7）.容器：透明或白色容器；大規(guī)模培養(yǎng)可用土池、水泥池等，菌液深度30厘米以下為佳。

三、增菌培養(yǎng)

光合細(xì)菌具有生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)強(qiáng)，培養(yǎng)條件要求不高，施用對(duì)象對(duì)菌液純度要求不十分嚴(yán)格等特點(diǎn)，因而適合用戶在普通條件下生產(chǎn)。為了便于了解培養(yǎng)過程，掌握生產(chǎn)技術(shù)，現(xiàn)以樣品為例介紹兩種培養(yǎng)方法。若培養(yǎng)海水光合細(xì)菌，只需將介質(zhì)換成海水或每25千克淡水加450克的粗食鹽即可。

樣品：1.光合細(xì)菌培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱培養(yǎng)基)1袋（300克)。

2.菌種500克。濃度為每克30億個(gè)活菌體，簡(jiǎn)稱30億級(jí)

1. 培養(yǎng)方法一：

本著實(shí)用和便于取材的宗旨,特備如下材料，供參考。

1、容器：

①清潔透明玻璃瓶或塑料瓶500毫升3只、1250毫升12只

②20升容積的塑料桶1只

③25升容積的塑料桶25只（裝水用）

④50升容積的廣口塑料桶1只

⑤小塑料漏斗1只

⑥玻璃杯1只

⑦5升塑料盆1只

2. 水50千克

3. 培養(yǎng)基1袋

4. 菌種（優(yōu)質(zhì)成品菌液500克）

5. 精密試紙1本（PH值范圍5.5-9.0）

6. 氫氧化鈉（燒堿）30克（不得用手觸摸，以免燒傷皮膚）

7. 裝滿水插入溫度指示瓶1只

8. 電燈炮3只（25瓦、40瓦、60瓦）

9. 清潔木棒2支（一支20厘米、另一支60厘米）

10. 稱量工具：天平、秤

11. 紙箱2個(gè)（體積視具體情況而定）

步驟

第一次培養(yǎng)

1. 稱取2千克的水倒入小塑料盆。

2. 用天平稱取培養(yǎng)基12克，放入盆中，用木棒攪動(dòng)，溶解制成培養(yǎng)基溶液。

3. 用試紙測(cè)出溶液的PH值。如是8.0左右為正好；如大于9.0，則需用鹽酸下調(diào)至8.0（實(shí)際上在我國(guó)未發(fā)現(xiàn)有溶入培養(yǎng)基后，PH值還超過9.0的水源）；如小于7.5則用氫氧化鈉溶液上調(diào)至8.0。設(shè)測(cè)出的PH值為6.5。需上調(diào)PH值。

4. 取100克水,倒入玻璃杯中，再取氫氧化鈉2克加入，攪拌溶解后，制成氫氧化鈉溶液。

5. 將培養(yǎng)基溶液攪動(dòng)，加入氫氧化鈉溶液10%左右，靜置半分鐘，用試紙測(cè)其PH值，如不能達(dá)到8.0，攪后再加10%，如此反復(fù)，直到PH值調(diào)至8.0為止。計(jì)算所用掉氫氧化鈉溶液量,推算出實(shí)際用掉氫氧化鈉的重量,作為以后制備氫氧化鈉溶液的參照數(shù)值。上調(diào)PH值時(shí)，如出現(xiàn)少量白色絮狀凝膠團(tuán)，為正?，F(xiàn)象，不影響培養(yǎng)效果。調(diào)好PH值的溶液即為培養(yǎng)液。

6. 從500克的菌種中取出400克，其余備用。將400克的菌種加入到培養(yǎng)液中，攪拌均勻，制成混合培養(yǎng)液，簡(jiǎn)稱菌液。菌液的重量為：水2000克 +培養(yǎng)基12克（忽略不計(jì)）＋菌種400克＋氫氧化鈉（忽略不計(jì)）＝2400克。菌種與培養(yǎng)液的比例為1：5。

7. 設(shè)菌液的密度為1克/毫升，則菌液的體積為2400毫升。取500毫升容積的清潔透明玻璃瓶5只，用漏斗將菌液裝入瓶中，擰緊瓶塞。8. 對(duì)菌液進(jìn)行連續(xù)地光照和保溫培養(yǎng)。取紙箱一只，將菌液瓶和溫度指示瓶貼近紙箱內(nèi)壁放置，燈炮懸于箱內(nèi)中部距瓶約10厘米處，保持溫度25℃-34℃。注意觀察溫度的變化，如果溫度過高，應(yīng)更換小燈泡，仍過高，應(yīng)打開箱散熱，否則會(huì)蒸死細(xì)菌；如果溫度低，應(yīng)蓋上箱蓋增溫，仍達(dá)不到要求，應(yīng)更換大燈泡，否則會(huì)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間；室外溫度適宜時(shí)，也可置于陽光下培養(yǎng)，謹(jǐn)防溫度過高（45℃）！

9. 菌液的光照和溫度都適宜后，細(xì)菌就進(jìn)入了增殖階段。每天顏色、氣味、PH值、透光度和漂浮物等都有不同程度的變化，情況如下：

前3-4小時(shí),菌種適應(yīng)培養(yǎng)基,吸收水份和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),細(xì)胞膨脹,將要裂殖,液體無明顯變化。

48小時(shí)后，菌液的顏色更深，透光度更低，氣味更濃，PH值也會(huì)有所升高，3-5天后升到9.0左右就不再升高了。

72小時(shí)后，菌液中的細(xì)菌濃度已很高，效價(jià)可達(dá)30億級(jí)，顏色深紅，有臭味，透光度低，PH值9.0左右，液底有少量淤泥狀沉淀物。繼續(xù)培養(yǎng)幾天，細(xì)菌濃度還會(huì)繼續(xù)升高，此時(shí)，可將菌液對(duì)照剩余菌種，如果濃度已達(dá)到或超過菌種，菌液即為成品菌液，培養(yǎng)成熟。10-15天后，菌液濃度達(dá)到最高值。
　　如上述，第一次培養(yǎng)結(jié)束后已得到2.4千克的成品菌液，可作為菌種再次培養(yǎng)擴(kuò)大。

第二次培養(yǎng)

從上述得知現(xiàn)有菌種2.4千克（成品菌液），根據(jù)接種比例1：5的要求：

1.稱取12千克水倒入20升塑料桶中，再用玻璃杯從中取出少許，用于溶解氫氧化鈉。

2.稱取培養(yǎng)基72克放入桶中，攪拌溶解制成培養(yǎng)基溶液。

3.將培養(yǎng)溶液PH值調(diào)節(jié)至8.0左右，制成培養(yǎng)液。根據(jù)"第一次培養(yǎng)"中實(shí)際用掉氫氧化鈉的重量推算，稱取此次的所需量，即第一次實(shí)際用量的6倍，將其倒入玻璃杯中，制成氫氧化鈉溶液，用于調(diào)PH值。

4.將2.4千克菌種加入到培養(yǎng)液中，制成菌液，則菌液的總重量為：水12千克＋培養(yǎng)基72克（忽略不計(jì)）＋菌種2.4千克＋氫氧化鈉（忽略不計(jì)）＝14.4千克，即體積為14.4升。

5.取清潔透明塑料瓶和玻璃瓶，容積為1250毫升的12只，用漏斗將菌液分別裝滿1250毫升的瓶中，擰緊瓶塞。

6.將菌液瓶等放入紙箱，按照第一次培養(yǎng)的方法進(jìn)行培養(yǎng)。

幾天后培養(yǎng)成熟，可得14.4千克成品菌液，作下次培養(yǎng)的菌種。

第三次培養(yǎng)

經(jīng)過前兩次培養(yǎng)后，菌種已達(dá)到14.4千克，還剩水約36千克、培養(yǎng)基216克。根據(jù)菌種與培養(yǎng)液的比例為1：5的標(biāo)準(zhǔn)，菌種已明顯超過,菌種接入量的增多，有利于縮短培養(yǎng)時(shí)間，提高成品菌液質(zhì)量。

1.將所剩的36千克水倒入廣口塑料桶中。

2.將所剩的216克培養(yǎng)基加入桶內(nèi)水中，溶解制成培養(yǎng)基溶液。

3.稱取氫氧化鈉，調(diào)節(jié)PH值至8.0，制成培養(yǎng)液。

4.將14.4千克菌種倒入培養(yǎng)液中，制成菌液。則菌液的重量為：36千克水＋216克培養(yǎng)基（忽略不計(jì)）＋14.4千克菌種＋氫氧化鈉（忽略不計(jì)）=50.4千克。

5.將菌液50.4千克直接留在桶中培養(yǎng)。取電燈泡一只，懸于桶內(nèi)液面上10-20厘米處；將溫度計(jì)插入桶內(nèi)菌液中；用塑料薄膜蓋桶口，進(jìn)行連續(xù)光照，并保持適當(dāng)溫度。如果溫度過低，可將桶置于紙箱內(nèi)增溫。培養(yǎng)過程中適當(dāng)攪動(dòng)菌液，使之受光均勻，這樣幾天后，即可得到成熟的菌液約50千克。

樣品培養(yǎng)完畢。

室外溫度適宜，可將菌液直接置于陽光下培養(yǎng)。

此時(shí)，如果有足夠的培養(yǎng)基和水，仍可按菌種與培養(yǎng)液1：5的比例，反復(fù)培養(yǎng)擴(kuò)大。當(dāng)達(dá)到所需用量時(shí)，留下一部分作菌種，其余施用。

操作要點(diǎn)：

①.PH值8.0左右；

②.菌種接入量不低于1：5；

③.溫度25℃-34℃；

④.光照度3000LX-4000LX；

⑤.水硬度10度以下。

2.培養(yǎng)方法二（簡(jiǎn)便方法）：

材料

1.容器：

①.清潔透明玻璃瓶、塑料瓶500毫升3只，1250毫升6只

②.50千克容積的廣口塑料桶一只

③.小塑料盆1只

④.小塑料漏斗1只

⑤.10升容積的塑料桶1只

2.水50千克

3.培養(yǎng)基1袋

4.菌種（成品菌液500克，30億級(jí)）

5.裝滿水插入溫度計(jì)的溫度指示瓶1只

6.電燈泡3只（25瓦、40瓦、60瓦）

7.清潔木棒兩2支（一支20厘米、另一支60厘米）

8.稱量工具：天平、秤9. 紙箱2個(gè)（體積視具體情況而定）

步驟：

第一次培養(yǎng)

1.稱量水400克倒入小塑料盆。

2.稱取培養(yǎng)基2.4克溶于盆內(nèi)水中，無需調(diào)節(jié)PH值，制成培養(yǎng)液。

3.取菌種400克加入培養(yǎng)液中，制成菌液。菌種與培養(yǎng)液的比例為1：1。菌液的重量為：水400克＋培養(yǎng)基2.4克（忽略不計(jì)）＋菌種400克＝800克，則菌液的體積為800毫升。

　4.用漏斗將菌液裝入兩只500毫升瓶中，擰緊瓶塞。

　5.取紙箱1只，將菌液瓶和溫度指示瓶分別貼近紙箱內(nèi)壁放置。再將電燈泡懸掛于箱內(nèi)中部（距瓶約10厘米），對(duì)菌液進(jìn)行連續(xù)光照和保溫培養(yǎng)。注意觀察溫度的變化（25℃-34℃）

這樣，3-5天后培養(yǎng)結(jié)束，得到約800克的成品菌液，可作為菌種再次培養(yǎng)。

第二次培養(yǎng)

由第一次培養(yǎng)已得菌種800克，根據(jù)菌種與培養(yǎng)液1：1的要求。

1.取水800克倒入小塑料盆。

2.取培養(yǎng)基4.8克溶入盆內(nèi)水中，制成培養(yǎng)液。

3.將菌種800克加入到培養(yǎng)液中制成菌液。則菌液的重量為：水800克＋培養(yǎng)基4.8克（忽略不計(jì)）＋菌種800克＝1600克，即體積為1600毫升。

4.取容積為1250毫升、500毫升的塑料瓶各一只，用漏斗將菌液分別裝入兩只瓶中，擰緊瓶塞。

5.將菌液瓶等放入紙箱，對(duì)菌液進(jìn)行培養(yǎng)，成熟后，可得到約1.6千克的成品菌液，作為下次培養(yǎng)的菌種。

依照上述方法，再經(jīng)過3次培養(yǎng)，即可得到成品菌液約12.8千克作為菌種。

第六次培養(yǎng)：

1.取水12.8千克倒入廣口塑料桶中。

2.取培養(yǎng)基76.8克溶入桶內(nèi)水中，制成培養(yǎng)液。

3.將菌種12.8千克加入培養(yǎng)液中制成菌液。則菌液的重量為：水12.8千克＋培養(yǎng)基76.8克（忽略不計(jì)）＋菌種12.8千克=25.6千克。

4.將菌液留于桶中，內(nèi)懸電燈泡于液面上10厘米處、溫度計(jì)于菌液中，桶口覆蓋薄膜，進(jìn)行光照保溫培養(yǎng)。

成熟后，可得到約25.6千克的成品菌液，仍作為下次培養(yǎng)的菌種。

第八次培養(yǎng)：

將剩余的水、培養(yǎng)基依次加入盛有25.6千克菌種的廣口塑料桶中進(jìn)行培養(yǎng)，成熟后可得約50千克成品菌液。

樣品培養(yǎng)完畢。

室外溫度適宜，可將菌液直接置于陽光下培養(yǎng)。

方法一與方法二的區(qū)別是：

①無需調(diào)PH值；

②菌種與培養(yǎng)液的比例為1：1；

③培養(yǎng)周期短，質(zhì)量好；

④單位時(shí)間總體增菌量少。

3.大規(guī)模生產(chǎn)方法介紹

根據(jù)光合細(xì)菌具有兼性厭氧、生命力強(qiáng)，易于培養(yǎng)等特點(diǎn)，本著便于取材，節(jié)約成本的宗旨，現(xiàn)采用"方法二"，以一次培養(yǎng)1噸菌液為例，簡(jiǎn)要介紹幾種形式的培養(yǎng)方法。

1.塑料桶培養(yǎng)法

材料：

①50升的透明或白色清潔廣口塑料桶40只

②水1000千克

③菌種1000千克（30億級(jí)）

④培養(yǎng)基半箱（20袋，每袋可培養(yǎng)50千克菌液）。

往每只桶內(nèi)加入25千克水和半袋培養(yǎng)基（150克）,攪拌使之溶解，再往每桶中加入25千克菌種，制成菌液，將溫度計(jì)插入菌液中，用透明塑料薄膜覆蓋桶口，并用橡皮筋扎緊，使之保持相對(duì)厭氧培養(yǎng)狀態(tài)。

室外溫度適宜情況下（25℃-34℃），將菌液直接置于陽光充足的地方培養(yǎng)；溫度過低，可用透明塑料薄膜搭建溫棚，采光增溫，仍達(dá)不到要求，應(yīng)采取其它增溫措施；溫度過高，將菌液置于通風(fēng)的地方，仍過高，應(yīng)在桶周圍灑水降溫。

如連續(xù)晴天，7-10天后可培養(yǎng)成熟；若有陰天，培養(yǎng)時(shí)間則相對(duì)延長(zhǎng)，連續(xù)陰天，應(yīng)采用功率較大的電燈泡懸于桶與桶之間，進(jìn)行連續(xù)光照，由于白色塑料桶相對(duì)于透明塑料桶透光性較差，因此培養(yǎng)時(shí)間會(huì)相對(duì)延長(zhǎng)。培養(yǎng)成熟后即可得到1噸的菌液（菌種除外）。

2.土池（水泥池）培養(yǎng)法

材料：

①完好的桶狀塑料薄膜（長(zhǎng)8米，寬2米），塑料薄膜（長(zhǎng)7米，寬4米）

②土池（長(zhǎng)5米，寬1.8米，深0.4米）

③水1000千克

④菌種1噸（30億級(jí)）

⑤培養(yǎng)基半箱（20袋）

在室外陽光充足的地方，先挖一個(gè)長(zhǎng)5米，寬1.8米，深0.4米的土池，然后將塑料薄膜覆蓋池底，整平，再將桶狀塑料薄膜平鋪在池中。一端卷疊并壓緊以確保密封，置于池外。從加端加入1000千克水，20袋培養(yǎng)基和1000千克菌種，制成菌液。排盡薄膜中空氣后，也將此端卷疊密封，置于池外，使菌液保持相對(duì)厭氧狀態(tài)，保持適當(dāng)?shù)臏囟群凸庹?，進(jìn)行培養(yǎng)。如溫度過低，用透明塑料薄膜搭建溫棚增溫。這樣，約10天后，可得到1噸的成品菌液（菌種除外）。

補(bǔ)充培養(yǎng)法假設(shè)一個(gè)池內(nèi)常備1噸成品菌液，現(xiàn)僅用掉100千克，為保持常備量，只需將100千克清潔水和2袋培養(yǎng)基補(bǔ)充進(jìn)去，兩三天后，即可培養(yǎng)成熟。

以上方法僅供參考，具體操作可根據(jù)實(shí)際情況而定。

4.培養(yǎng)過程中菌液可能出現(xiàn)的問題及對(duì)策

（1）變淡

原因：接種量過少，菌種老化、雜菌過多,PH值過低或過高,光照不足，溫度過低或過高，水的硬度過高。

對(duì)策：調(diào)節(jié)至正常狀態(tài)。

（2）變黑

原因：氣溫較高的季節(jié)，剛培養(yǎng)好的菌液因長(zhǎng)時(shí)間失去光照。

對(duì)策：施以光照。

（3）變綠

原因：可能是菌液中綠硫菌大量繁殖，多見于高溫季節(jié)。

對(duì)策：連續(xù)多次密閉培養(yǎng)，或更換菌種和水源。

（4）變灰

原因：接種量少，菌種不純，光照不足，PH值過低。

對(duì)策：選用優(yōu)質(zhì)菌種，按要求接種，增強(qiáng)光照，調(diào)適PH值。

四、光合細(xì)菌的保存

光合細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖除營(yíng)養(yǎng)條件外，還與光照和溫度有關(guān)。溫度適宜，即使光照不足，也會(huì)生長(zhǎng)，只是速度緩慢；溫度較低，即使光照充足，也很難甚至停止生長(zhǎng)；溫度過高，則會(huì)老化而死。因此保存菌液，溫度是關(guān)鍵。

據(jù)此，成品菌液應(yīng)存放在溫度較低的地方，15℃以下為最佳，并保持一定的光照（每天不低于2小時(shí)），這是因?yàn)楣夂霞?xì)菌在營(yíng)養(yǎng)、光照、溫度都適宜的情況下，形成一定速度的生長(zhǎng)態(tài)勢(shì)，即"生長(zhǎng)慣性"，處在生長(zhǎng)高峰期的光合細(xì)菌生長(zhǎng)慣性很強(qiáng)，此時(shí)如果突然失去光照或光照很弱，5-10天后，會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)旺盛的光合細(xì)菌因光合作用失衡，而導(dǎo)致菌體細(xì)胞大量死亡，使菌液發(fā)黑，并有惡臭。剛開始發(fā)黑時(shí)，施以適當(dāng)光照即能緩解。所以剛培養(yǎng)好的菌液應(yīng)盡量降溫，逐步減少光照，以減弱生長(zhǎng)慣性。到了生長(zhǎng)慣性很弱或沒有的時(shí)候，光合細(xì)菌就進(jìn)入了穩(wěn)定期（保存期）。此時(shí)陰涼避光保存會(huì)延長(zhǎng)保存期（六個(gè)月）。

當(dāng)然，削弱生長(zhǎng)慣性不單靠降溫，減少光照等外部條件，與內(nèi)因也有很大的關(guān)系，如光合細(xì)菌生長(zhǎng)達(dá)到高濃度的時(shí)候,由于代謝產(chǎn)物積聚增多,所產(chǎn)生的一些有害因子會(huì)抑制本身繁殖；培養(yǎng)基內(nèi)部的緩沖體，在菌液達(dá)到高濃度的時(shí)候，也會(huì)發(fā)揮緩沖的作用。

通常,用戶在生產(chǎn)過程中，對(duì)菌液的保存無須作特別處理。氣溫高的季節(jié),在陽光下培養(yǎng)，成熟的菌液仍置于陽光下，不必避光，保存期2-4個(gè)月，在此期間可反復(fù)培養(yǎng)續(xù)種，秋天，氣溫下降后，培養(yǎng)好一批菌液過冬，冰凍前移至室內(nèi)避光保存，保存期8-12個(gè)月。

總之，保存期的長(zhǎng)短，主要取決于溫度的高低，溫度越低，保存期越長(zhǎng)，反之越短。

五、合細(xì)菌菌種的簡(jiǎn)易提純

1.菌種提純

（1）選擇性培養(yǎng)基

光合細(xì)菌適宜PH值在8.0左右，在9-10的高堿度情況下仍能生長(zhǎng)，而一般雜菌適宜的PH值在7.2-7.6左右。若把菌液的PH值調(diào)節(jié)至9.0，雜菌難以耐受甚至死亡，而光合細(xì)菌則可以承受并能生長(zhǎng)。這樣可篩除一部分雜菌。

（2）選擇優(yōu)質(zhì)菌種

細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖一般按倍數(shù)的規(guī)律增長(zhǎng)。假設(shè)菌種內(nèi)的雜菌含量較高，培養(yǎng)幾次后，它們?cè)诰褐械谋壤粫?huì)減小，有些雜菌的生長(zhǎng)速度較光合細(xì)菌快，比例可能還會(huì)增大。老化的光合細(xì)菌活性較差，菌液內(nèi)的有害代謝物質(zhì)較多。

因此，菌種應(yīng)選用濃度高、活性強(qiáng)、雜菌少鮮紫紅色的菌液。

（3）優(yōu)勢(shì)接種量

大規(guī)模生產(chǎn)過程中，由于水源、容器及空氣中的雜菌是不可排除的，因而應(yīng)加大接種量使光合細(xì)菌占絕對(duì)優(yōu)勢(shì),這樣才能培養(yǎng)出高質(zhì)量的菌液。光合細(xì)菌含量高了,還能釋放抑菌酵素，抑制一些雜菌的生長(zhǎng)。

究竟多在接種量為好呢？實(shí)踐證明，正常的接種量應(yīng)不低于1：5，即菌種1份(30億級(jí))，培養(yǎng)液5份；培養(yǎng)液不調(diào)PH值和提純菌種時(shí),其接種量應(yīng)不低于1：1,即菌種和培養(yǎng)液各一份，這樣，培養(yǎng)周期短，質(zhì)量好，缺點(diǎn)是保種量多。

（4）好氧培養(yǎng)

將菌液用增氧機(jī)砂頭充氧曝氣，培養(yǎng)兩天，可有效的抑制一些厭氧菌的生長(zhǎng)。

（5）厭氧培養(yǎng)

將菌液裝入透明密封容器內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，可有效抑制一些好氧菌的生長(zhǎng)。

以上幾種方法的綜合運(yùn)用，可將光合菌菌液適當(dāng)提純，反復(fù)接種，從而使不具備專業(yè)知識(shí)的用戶自已也可以生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)菌液。

六、光合菌濃度的簡(jiǎn)易計(jì)算

（1）比例法

取已知血紅細(xì)胞數(shù)的血液與待測(cè)菌液各1毫升充分混合，涂片、染色固定、鏡檢，分別數(shù)出視野內(nèi)血紅細(xì)胞及待測(cè)菌細(xì)胞的個(gè)數(shù)，需重復(fù)上述操作十次以上，算出視野內(nèi)血紅細(xì)胞以及菌細(xì)胞的平均數(shù)，即得出待測(cè)菌液的濃度，比例式為：

（2）比較法

將待測(cè)菌液與已知濃度的菌液進(jìn)行比較。如它們的紅色度，透光度大致相同，則它們的濃度也大致相等，如待測(cè)溶液比已知濃度菌液紅色度深，透光度低，說明待測(cè)菌液濃度高于已知菌液，定量加水稀釋待測(cè)菌液，使之與已知菌液紅色度，透光度相同，那么待測(cè)菌的濃度為：已知菌液的濃度乘以待測(cè)菌液稀釋后的倍數(shù)；如待測(cè)菌液比已知濃度的菌液紅色度淺，透光度高，說明待測(cè)菌液的濃度低于已知菌液，定量加水釋已知菌液，使之與待測(cè)菌液濃度相同，那么，待測(cè)菌液的濃度為：已知菌液的濃度除以已知菌液稀釋后的倍數(shù)。

七、光合細(xì)菌的活菌計(jì)數(shù)及純菌種分離

采用瓊脂固體培養(yǎng)基涂抹培養(yǎng)計(jì)數(shù)分離法

條件：無菌室、過濾空氣鼓風(fēng)工作臺(tái)、平皿、接種針、固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、密封玻璃試管、高壓鍋、加熱器、培養(yǎng)箱等。

步驟：（在無菌室內(nèi)操作）

1.將適量瓊脂固體培養(yǎng)基高壓蒸煮(120℃)20分鐘后，倒入若干個(gè)平皿冷卻到45℃以下，制成固體培養(yǎng)基待用。

2.取待測(cè)光合細(xì)菌菌液，分別用蒸餾水以10萬倍、50萬倍、100萬倍、500萬倍、5000萬倍、10000萬倍稀釋。

3.分別從每個(gè)稀釋倍液中取1毫升的樣本各10個(gè)，均勻涂布于貼好相應(yīng)標(biāo)簽的平皿內(nèi)固體瓊脂培養(yǎng)基平面上。

4.將平皿放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)12-50個(gè)小時(shí)，如菌落未長(zhǎng)成，再繼續(xù)培養(yǎng)，直到有明顯的菌落長(zhǎng)成為止。

5.各種菌的菌落顏色、形狀各不相同，根據(jù)光合細(xì)菌菌落特征，找出光合細(xì)菌菌落，并計(jì)數(shù)。取同稀釋倍液10個(gè)樣本菌落的平均數(shù)，乘以它的稀釋倍數(shù)，即可大約得出待測(cè)菌液每毫升含光合細(xì)菌的活菌數(shù)。取各稀釋倍液算出的每毫升含光合細(xì)菌活菌的平均數(shù)，即可較為準(zhǔn)確地檢測(cè)出該待測(cè)菌液的濃度。實(shí)際操作并不如此簡(jiǎn)單，因?yàn)榫溆须s菌和光合菌交錯(cuò)在一起的，也有兩個(gè)以上光合細(xì)菌菌落合在一起的，很難分辨計(jì)數(shù)。

6.用接種針將光合細(xì)菌菌落挑出，用適量蒸餾水稀釋后，再涂布于固體培養(yǎng)基平面上，進(jìn)行培養(yǎng)，待光合細(xì)菌在培養(yǎng)基上再次長(zhǎng)成菌落后，在鼓風(fēng)工作臺(tái)內(nèi)用接種針挑出，接入盛有經(jīng)高壓蒸煮滅活過液體培養(yǎng)基的試管內(nèi)，進(jìn)行密封厭氧培養(yǎng)，培養(yǎng)好的光合細(xì)菌就是純菌種。

純菌種的分離是專業(yè)性很強(qiáng)的一門技術(shù)，只有專業(yè)人員，且經(jīng)驗(yàn)豐富的，才能識(shí)別各種菌落，從中分離出有用的菌株。

八、光合細(xì)菌的使用劑量、方法及注意事項(xiàng)

光合細(xì)菌對(duì)各類養(yǎng)殖動(dòng)物及農(nóng)作物都有益。表現(xiàn)在成活率高、個(gè)體大、免疫力強(qiáng)等方面。特別是育苗階段，效果更明顯。

1.使用劑量（30億級(jí)）

（1）育苗

魚苗培育：一般施用濃度100-200ppm(1ppm為百分之一，即1立方水體用1克)。常規(guī)魚苗100 ppm，蝦蟹苗150-200 ppm，貝苗180-200 ppm，使用周期為5-10天。

（2）成魚

首次施用10 ppm(即水深1米每畝約用7千克)，以后每次5 ppm(即水深1米每畝約4千克)，周期為10-15天。如常規(guī)魚、蝦、蟹、珠蚌、鰻等。

（3）飼料添加

魚苗5%，成魚3%，禽畜3%-5%，現(xiàn)拌現(xiàn)喂，喂水添加3%。

（4）種植業(yè)

水稻、小麥：每次畝用5千克葉面噴施。水稻秧苗期、孕穗期各用一次；小麥冬肥、拔節(jié)期各用一次。

油菜：基肥畝用15千克澆根。竄苔前畝用15千克葉面噴施。

瓜果類蔬菜：每次畝用10千克，幼苗期適量稀釋澆根一次，現(xiàn)蕾期噴施一次。

葉菜類蔬菜：每次畝用20千克，生長(zhǎng)期澆根或葉面噴施，7天用一次。

花卉：移載后畝用40千克澆根。生長(zhǎng)期每次畝用20千克噴施，每15天一次。

茶樹：播種基肥畝用80千克。冬肥畝用40千克澆根。萌發(fā)期前畝用20千克澆根。葉片生長(zhǎng)期畝用15千克噴施，每15天一次。

果樹：冬肥畝用40千克澆根。新葉長(zhǎng)成后畝用20千克葉面噴施。

（5）環(huán)保

污水處理用量：200-1000ppm。

2.使用方法

（1）將光合細(xì)菌菌液稀釋20-30倍全池均勻潑灑。

（2）將菌液用沸石粉吸附或拌和細(xì)土以后撒入池中。

（3）將菌液拌和飼料后投喂。

（4）將菌液稀釋10倍后，浸泡魚種。

（5）拌種、澆根、葉面噴施。

3.注意事項(xiàng)

（1）不可與消毒殺菌劑混合使用，水體消毒須1周后方可使用。

（2）使用前，將菌液光照10小時(shí)以上，使用效果更好。

（3）晴天水溫20℃以上時(shí)使用效果較好。

（4）拌入的飼料應(yīng)于當(dāng)天投喂完畢。

（5）應(yīng)靈活掌握用量和使用的連續(xù)性，因?yàn)楣夂霞?xì)菌在水體中只有形成優(yōu)勢(shì)群落后，才能發(fā)揮最大的作用。

（6）水體呈堿性時(shí)施用效果最好。酸性水體易使魚類生病，應(yīng)常用生石灰或燒堿調(diào)節(jié)PH值至中性或偏堿程度。

（7）光合細(xì)菌菌液不能用金屬器皿貯存。

（8）培育魚苗時(shí)，在苗種入池前7天全池潑灑，以利于浮游生物生長(zhǎng)。

（9）植物萌發(fā)期，施用效果最好。

附錄：

光合細(xì)菌的鏡檢方法（細(xì)菌的涂片和革蘭氏染色法）

1.涂片

以滅菌接種環(huán)取一滴鹽水放于清潔玻片上，然后挑取少許細(xì)菌與鹽水混勻，均勻涂布。

2.干燥
將標(biāo)本涂好后，使自然干燥，或在火焰上略烘，但防止過熱。

3.固定

將已干燥標(biāo)本在火焰上來回通過3-4次，可使細(xì)菌固定在玻片上。

4.染色，有以下四個(gè)步驟

（1）初染：在涂片上加結(jié)晶紫染液1分鐘后，用自來水沖洗，將水瀝凈。

（2）媒染：加碘液作用1分鐘后，水洗瀝凈。

（3）脫色：用95%的酒精，約10-30分鐘，水洗。

（4）復(fù)染：加稀釋復(fù)紅染半分鐘，水洗，用濾紙吸干。

（5）干燥后：加香柏油鏡檢。

（6）觀察結(jié)果：革蘭氏陽性菌呈紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。

[ts]huyidao068 于 2010-10-10 20:02 補(bǔ)充以下內(nèi)容[/ts]

我今年用的是“江蘇儀征市誠(chéng)信微生物制品廠”生產(chǎn)的光合細(xì)菌培養(yǎng)基。

作者: lyjun 時(shí)間: 2010-10-11 00:01
這個(gè)有點(diǎn)看頭

作者: jstcxzh 時(shí)間: 2010-10-11 07:24
謝謝5樓樓主

作者: liugang16389 時(shí)間: 2010-10-11 09:42
沒那么麻煩吧，光和細(xì)菌弄個(gè)坑，鋪塑料布就可以培養(yǎng)。

作者: liu20021478 時(shí)間: 2010-10-11 17:40
回復(fù) 5# huyidao068

不錯(cuò) 呵呵得好好看看

作者: 江師弟 時(shí)間: 2010-10-11 17:58
會(huì)產(chǎn)生綠硫菌，我查閱了很多網(wǎng)站后來知道在太陽光照的時(shí)候蓋上淡藍(lán)色的薄布就可以了是個(gè)臺(tái)灣朋友告訴我的，

作者: yjx0999 時(shí)間: 2010-10-12 18:26
光合細(xì)菌的培養(yǎng)比較簡(jiǎn)單的。今年我自行培養(yǎng)了40噸。比市售的濃度都要高。效果還不錯(cuò)。

作者: biogay 時(shí)間: 2010-10-12 23:29
這個(gè)，太簡(jiǎn)單了吧。我今年培育了100+噸。5樓的理論很有一套，實(shí)際上很難操作。

作者: 潤(rùn)爽生物 時(shí)間: 2010-10-13 16:29
實(shí)際生產(chǎn)中這樣操作是不是好麻煩呀

作者: 4531883 時(shí)間: 2010-10-13 17:33
5L好強(qiáng)大啊，^_^

作者: biogay 時(shí)間: 2010-10-28 00:42
回復(fù) 10# 江師弟

扯淡了，加紅色的塑料布還差不多。

作者: jiangchangde 時(shí)間: 2010-11-9 18:06
而且我的光合細(xì)菌對(duì)亞硝基氮有較強(qiáng)的利用，只用來硝基氮作為氮源培養(yǎng)可以達(dá)到15億/ML

歡迎光臨畜牧人 (http://www.www12347.com/)

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