<strike id="imseu"></strike>

畜牧人

標(biāo)題: 請教：蛋白溶解度測定方法 [打印本頁]

作者: zhouyoo 時間: 2010-8-14 21:18
標(biāo)題: 請教：蛋白溶解度測定方法
　　哪位大哥大姐能幫忙發(fā)下蛋白溶解度的詳細(xì)測定方法及注意事項，特別是計算公式要詳細(xì)。
　　另外請問下，菜粕棉粕與豆粕的蛋白溶解度的檢測方法+計算公式相同嗎？謝謝大家了，急！！！小弟感激不盡！

作者: 孟俊英 時間: 2010-8-14 21:30
本帖最后由孟俊英于 2010-8-14 21:36 編輯

大豆及其制品蛋白質(zhì)溶解度測定
1  范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了大豆及其制品中蛋白質(zhì)溶解度測定的原理、試劑、儀器設(shè)備和測定方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于飼料檢測單位、飼料企業(yè)、養(yǎng)殖場（戶）、大中專院校對大豆及其制品的加工質(zhì)量的檢測和監(jiān)控。
2  規(guī)范性引用文件
下列文件通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
GB 601—88  化學(xué)試劑  滴定分析（容量分析）用標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
GB/T 6432—1994  飼料中粗蛋白質(zhì)的測定
3  術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
3.1  蛋白質(zhì)溶解度
在一定的氫氧化鉀溶液中溶解的蛋白質(zhì)質(zhì)量占試樣中總蛋白質(zhì)量的百分?jǐn)?shù)。通常采用氮溶解指數(shù)（NSI）和蛋白質(zhì)分散指數(shù)（(PDI)來表示。
4  原理
用一定濃度的氫氧化鉀溶液提取試樣中的可溶性蛋白質(zhì)，在催化劑作用下用濃硫酸將提取液中可溶性蛋白質(zhì)的氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨。加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用鹽酸滴定測出試樣中可溶性蛋白質(zhì)含量；同時，測定原始試樣中粗蛋白質(zhì)含量，計算出試樣的蛋白溶解度。
5  試劑
a)  氫氧化鉀（分析純），無水硫酸鉀、五水硫酸銅、氫氧化鈉、硼酸、甲基紅、溴甲酚綠、硫酸銨；
b)  濃硫酸、鹽酸（分析純）、95%乙醇、蒸餾水。
6  儀器和設(shè)備
a)  感量為0.0001 g分析天平；
b)  磁力攪拌器；
c)  離心機(jī)；
d)  樣品粉碎機(jī)；
e)  60目分析篩；
f)  電爐；
g)  100 mL或250 mL凱氏燒瓶；
h)  凱氏蒸餾裝置；
i)  250 mL錐形瓶；
j)  1000 mL容量瓶；
k)  微量滴定管。
7  分析步驟
7.1  試劑
7.1.1  0.042 M氫氧化鉀溶液
稱取2.360 g氫氧化鉀，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。
7.1.2  混合催化劑
稱取6 g硫酸鉀和0.4 g硫酸銅，磨碎混勻。
7.1.3  氫氧化鈉溶液
稱取400 g氫氧化鈉，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。
7.1.4  硼酸溶液
稱取20 g硼酸，加水溶解后，轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度。
7.1.5  0.1M鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液
量取8.3 mL濃鹽酸，注入1000 mL水中混勻，按GB 601-88要求進(jìn)行標(biāo)定即可。
7.1.6  混合指示劑
稱取1 g甲基紅和5 g溴甲酚綠，加入乙醇溶解后，轉(zhuǎn)移至1000 mL容量瓶中，用乙醇定容至刻度。
7.2 樣品制備
取具有代表性的試樣用四分法縮減至200 g，粉碎至60目，裝入密封容器中。
7.3  操作步驟
7.3.1  試樣處理
稱取試樣1.5 g（準(zhǔn)確至0.0002 g）置于250 mL燒杯中，準(zhǔn)確移入 0.042 M氫氧化鉀溶液75 mL，磁力攪拌20 min，然后將試樣轉(zhuǎn)移至離心管中，以2700 r/min的速度離心10 min。
7.3.2  測定
吸取上清液 15 mL, 放入消化管中, 按照GB/T 6432-1994凱氏定氮法測定試樣中可溶性蛋白質(zhì)的含量。同時，按照GB/T 6432-1994凱氏定氮法測定試樣中粗蛋白質(zhì)的含量。
7.3.3  分析結(jié)果計算
試樣中蛋白質(zhì)溶解度按照下式進(jìn)行計算：

（1）
式中：

C——鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，mol/L；

V2 ——滴定試樣時所需標(biāo)準(zhǔn)酸溶液體積（mL）；

V1 ——滴定空白時所需標(biāo)準(zhǔn)酸溶液體積（mL）；

V ¢——吸取樣液體積（mL）；

V ——試樣分解液蒸餾用體積（mL）。

7.3.4  重復(fù)性
7.3.4.1  每個樣品應(yīng)取2份平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為分析結(jié)果。
7.3.4.2  測定允許相對偏差不大于1%。
7.4  注意事項
7.4.1  不同樣品的粒度應(yīng)相同。
7.4.2  不同樣品在氫氧化鉀溶液中的攪拌時間應(yīng)一致

作者: yebalance 時間: 2010-8-16 09:11
歡迎來到畜牧人論壇，希望能找到你要的

作者: 李文華 時間: 2010-8-18 16:13
回復(fù) 2# 孟俊英 怎么沒有公式啊

作者: mengdl2003 時間: 2011-1-9 08:39
很好！謝謝

作者: tony2005428 時間: 2011-1-9 20:35
回復(fù) 孟俊英的帖子

你沒把公式貼出來？

作者: hexuejun02 時間: 2011-1-20 21:41
能不能不離心，沉淀或過濾什么的？

作者: BB1723 時間: 2011-2-2 16:49
豆粕中堿溶性蛋白的測定
一、原理及意義：
脲酶活性和蛋白溶解度（PS）是評定豆粕加工質(zhì)量的兩種重要指標(biāo)。但在生產(chǎn)中對加熱過度的豆粕脲酶測定值不是一個可靠的指標(biāo)，蛋白溶解度可以區(qū)別不同程度的過度加熱。蛋白質(zhì)溶解度測定值隨加熱時間的增加而遞減。
蛋白溶解度是根據(jù)蛋白質(zhì)在一定量的氫氧化鉀溶液中溶解蛋白質(zhì)質(zhì)量。分析結(jié)果：生大豆粕的PS達(dá)到100%，在日常分析中，當(dāng)PS 大于85%則認(rèn)為大豆粕過生，當(dāng)PS小于75%時則認(rèn)為大豆粕過熟。當(dāng)PS在80%左右時大豆粕加工適度。
二、儀器及設(shè)備
離心機(jī)（1400轉(zhuǎn)/分）、振蕩器、其它同粗蛋白質(zhì)
三、試劑
1、 0.2%KOH溶液，相當(dāng)于0.042mol/l，PH值為12.5，稱量2.360g氫氧化鉀，放入一個容量瓶中，用水溶解產(chǎn)稀釋至1000ml。
2、其它試劑同粗蛋白質(zhì)
四、測定步驟
稱2±0.1克樣品于250ml三角燒瓶中，加100ml 0.2%KOH溶液立即在振蕩器上振蕩，整體振蕩高度為6cm，液面上升3cm，精確維持20分鐘，在離心機(jī)上離心10分鐘，過濾后取20ml清液作定氮用。
五、計算方法：
蛋白質(zhì)溶解度（%）=20ml溶液中所測蛋白質(zhì)含量/原樣品的粗蛋白質(zhì)含量
注：
樣品需用不產(chǎn)熱的粉碎機(jī)粉碎至100%過60目標(biāo)準(zhǔn)篩

作者: zhuyanling 時間: 2011-2-10 12:49
菜粕和棉粕用KOH的濃度兩個做過對比，就是經(jīng)常用的0.2%，還有國外常用的國內(nèi)也有用的如大北農(nóng)等的0.5%。結(jié)果發(fā)現(xiàn)后者溶解度能高出近4個左右。
至于方法和公式與豆粕的PS相同！

作者: 快樂生活o 時間: 2011-2-12 08:51
當(dāng)PS 大于85%則認(rèn)為大豆粕過生，當(dāng)PS小于75%時則認(rèn)為大豆粕過熟。當(dāng)PS在80%左右時大豆粕加工適度。
脲酶活性是檢測過生還是過熟？

作者: 快一點 時間: 2011-2-16 16:46
脲酶活性是檢測大豆過生。

作者: 肖紅 時間: 2011-2-16 16:57
7、蛋白質(zhì)溶解度(PS)的測定方法

1.0試劑:

氫氧化鉀(KOH)0.2%,相當(dāng)于0.042mol/L,PH=12.5

其他試劑為凱式定氮所需的標(biāo)準(zhǔn)試劑.

稱取2.8734gKOH,置于容量瓶中,溶解于水,稀釋至1000ml.

2.0測定步驟

2.1
稱取1.5g大豆餅粕粉(過60目篩)于250ml燒杯中,加入75ml的0.2%KOH溶液（花生粕用0.03%KOH溶液）,在磁力攪拌器上攪拌20min.

2.2
在攪拌20min后,將30～50ml液體轉(zhuǎn)移至離心管,用每分轉(zhuǎn)速2700轉(zhuǎn),離心10min.

2.3
吸取15ml上清液,用凱氏定氮法測定其中蛋白質(zhì)含量,其量相當(dāng)于0.3g的原樣本.

3.0結(jié)果計算:

蛋白質(zhì)溶解度%=×100%

注意：樣本粒度大小對蛋白質(zhì)溶解度有影響，因此，當(dāng)比較不同大豆餅、粕樣本時，要請注意它們的顆粒大小應(yīng)是可比較的。還應(yīng)請注意控制在0.2%KOH溶液中的攪抖時間，在各種情況下，攪抖時間應(yīng)一致。

豆粕PS＞85%為過生，PS＜70%時，則為過熟

作者: 孟俊英 時間: 2011-2-21 18:07
公式不好貼過來，還請高手幫忙！另外，12樓的說法與10樓的正好相反，本人認(rèn)為12樓的正確。

作者: jjs19790428 時間: 2011-2-22 16:30
怎么方法都不一樣，到底哪一個準(zhǔn)？？？？？？

作者: xjfighting 時間: 2011-2-26 10:45
公式就是：15ml樣品中的粗蛋白質(zhì)含量/0.3*樣品的粗蛋白含量
0.3---（15/75）*1.5

作者: 破繭成蝶 時間: 2011-3-23 15:08
回復(fù) 孟俊英的帖子

請問，可以用氫氧化鈉代替氫氧化鉀嗎？

作者: xannie123 時間: 2011-4-25 16:18
呵呵,學(xué)習(xí)下先,

歡迎光臨畜牧人 (http://www.www12347.com/)

主站蜘蛛池模板：邢台县| 烟台市| 唐山市| 建湖县| 乐安县| 清原| 军事| 曲阳县| 通化县| 招远市| 从化市| 汝州市| 华安县| 南靖县| 江都市| 贞丰县| 六安市| 理塘县| 金山区| 高邑县| 锡林郭勒盟| 建阳市| 苗栗市| 九江市| 九江县| 东宁县| 海淀区| 达日县| 安远县| 友谊县| 溆浦县| 时尚| 泸水县| 东台市| 德保县| 宣武区| 醴陵市| 凤凰县| 江津市| 仁化县| 根河市|