本研究以中藥材黃芪為試驗材料，首先確定了黃芪多糖和黃芪皂甙含量測定的方法，并分別進行了黃芪多糖和皂甙提取工藝的參數的優化，然后比較了鮮黃芪干燥的不同方法，最后將提取所得的黃芪多糖進行了分離檢測。主要試驗結果如下： 1黃芪中有效成分含量測定方法的建立。總糖含量的測定采用苯酚一硫酸法，還原糖含量的測定采用3,5-二硝基水楊酸比色法，多糖的含量采用總糖與還原糖的差值表示：測定黃芪皂甙的含量采用香草醛-冰醋酸法。 2黃芪多糖提取工藝的研究。首先通過傳統熱水法提取黃芪多糖工藝的試驗，得出該法最佳工藝為：粉碎度為40目，液料比值為20，提取時間2h，于100℃提取2次，所得黃芪多糖的平均含量為9.45％；由于纖維素酶在提取過程中能有效的促進多糖物質的溶出，進行了纖維素酶法提取黃芪多糖的研究。運用響應面法，通過Box．Behnken組合設計試驗，利用Design Expert 7.0.3軟件對試驗數據進行多元回歸擬合，回歸方差分析顯著性檢驗表明，纖維素酶法提取黃芪多糖工藝的優化方案是酶解pH值為4.0，溫度為56.5℃，加酶量為61U/g，其多糖的平均含量達到20.31％，提取效果顯著提高，所得模型回歸顯著，模型的R<'2>=0.9962，模型與實際試驗擬合較好，自變量與響應值之間線性關系顯著，可用于黃芪多糖，酶法提取試驗的理論預測。各因素經回歸擬合后，選擇對響應值(多糖含量)顯著的各項，得到纖維素酶法提取的黃芪多糖含量對編碼自變量(酶解pH值、溫度和加酶量)的二次多項回歸方程為： Y=20.0042+0.46775X<,1>0.20663X<,2>+0.158625X<,3>+0.01025X<,1>X<,2>+1.47025X<,1>X<,3>+0.593X<,2>X<,3>-2.0111X<,1><'2>-1.48085X<,2><'2>-1.17485X<,3><'2>。根據回歸方程制得不同因子的響應面分析圖及等高線圖。 3 黃芪皂甙提取工藝的研究。確定了提取黃芪皂甙的最佳工藝參數，試驗表明采用乙醇體積分數為80％，液料比值為20，提取時間1．5h進行提取時，皂甙提取含量最佳。 4 鮮黃芪不同干燥方法的比較。通過試驗研究發現，鮮黃芪采用不同的干燥方法所得的有效成分含量也不同，真空冷凍干燥方法能夠最大限度的保持鮮黃芪的有效成分的含量。 5 黃芪多糖的分離純化。黃芪多糖提取液濃縮后用sevag法除蛋白，再用蒸餾水透析，經醇沉后的黃芪多糖，凍干后備用。先進行DEAE．Sepharose Fast Flow離子交換層析，再做Sephadex G-200凝膠柱層析，然后將所得組分進行高效液相色譜檢測。 |