畜牧人
標(biāo)題: 沉淀法測定飼料真蛋白質(zhì)條件的優(yōu)化 [打印本頁]
作者: 麥海因 時(shí)間: 2009-7-20 09:26
標(biāo)題: 沉淀法測定飼料真蛋白質(zhì)條件的優(yōu)化
武英利
農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心（石家莊）
摘要：本文就沉淀法測定飼料中真蛋白質(zhì)的各種條件進(jìn)行了探索，并就其適用性進(jìn)行了試驗(yàn)驗(yàn)證。試驗(yàn)結(jié)果表明，沉淀法測定飼料中真蛋白質(zhì)的最適宜條件為：試樣粉碎粒度0.5mm、試樣重量以0.5～1g、試液煮沸時(shí)間30min，氫氧化鈉溶液和硫酸銅溶液用量均為20mL，沉淀洗滌用水溫度80℃以上，氫氧化鈉和硫酸銅溶液以分次交替加入方式為佳；本試驗(yàn)方法能夠排除人為因素添加入飼料中的硫酸銨、尿素、三聚氰胺等非蛋白氮物質(zhì)的干擾，適用于各種不同類型的飼料真蛋白質(zhì)測定。
關(guān)鍵詞：真蛋白質(zhì)；粗蛋白質(zhì)；測定條件
真蛋白質(zhì)的概念是針對粗蛋白質(zhì)而提出的，《飼料工業(yè)通用術(shù)語》（GB 10647—1989）中粗蛋白質(zhì)的定義是“試樣中的氮量乘以6.25”[1]，其中的氮量包括非蛋白氮成分，一般不為動(dòng)物消化利用。我們通常所說的真蛋白質(zhì)即試樣中的蛋白氮部分乘以6.25，其實(shí)就是蛋白質(zhì)；之所以提出真蛋白質(zhì)的概念是因?yàn)殡S著時(shí)間的推移，粗蛋白質(zhì)已經(jīng)不能準(zhǔn)確地反映飼料產(chǎn)品的品質(zhì)，當(dāng)前世人普遍關(guān)注的三聚氰胺事件恰恰說明了這一點(diǎn)，而真蛋白質(zhì)則比粗蛋白質(zhì)能夠準(zhǔn)確地反映飼料的品質(zhì)。
目前，國內(nèi)尚無飼料中真蛋白質(zhì)測定的標(biāo)準(zhǔn)方法，沉淀法是測定飼料中真蛋白質(zhì)常見的方法。其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)的性質(zhì)利用物理化學(xué)的方法使試樣中的蛋白質(zhì)溶解、變性凝結(jié)而形成沉淀，除去非蛋白氮物質(zhì)[3]，通過凱氏定氮的方法測定沉淀中的含氮量，再乘以換算系數(shù)得出蛋白質(zhì)含量[2]。沉淀法測定飼料中的真蛋白質(zhì)的方法由來已久，但方法并不成熟，存在有許多缺陷。本文就沉淀法測定飼料中真蛋白質(zhì)的各種條件進(jìn)行試驗(yàn)研究，以期找出真蛋白質(zhì)測定的最佳條件，為進(jìn)一步建立標(biāo)準(zhǔn)的檢測方法提供依據(jù)。
1.試驗(yàn)材料與方法
1.1試驗(yàn)材料
1.1.1試驗(yàn)樣品
豬配合飼料，確證沒有添加非蛋白氮類物質(zhì)。
試樣處理
采取“四分法”取三份試樣按不同粒度要求進(jìn)行粉碎，試樣粒度分別為0.25mm（4#）、0.50mm（5#）和0.75mm（6#）。
1.1.2主要化學(xué)試劑及溶液
1.1.2.1試劑
所用試劑未加說明均為分析純試劑；
氫氧化鈉，五水硫酸銅，硫酸（不含氮），無水硫酸鈉，硼酸，甲基紅，溴甲酚綠，乙醇，鹽酸。
1.1.2.2溶液
所用溶液未加說明均為水溶液（W/V）；
2.5%的氫氧化鈉溶液，40%的氫氧化鈉溶液，1%的硼酸溶液；
10%的硫酸銅溶液
稱取五水硫酸銅10g加水溶解定容至100mL，混勻即可；
混合催化劑
6g無水硫酸鈉、0.4g五水硫酸銅研細(xì)混勻即可；
混合指示劑
甲基紅0.1%的乙醇溶液7mL，溴甲酚綠0.1%的乙醇溶液10mL，兩者混合后加入1000mL1%硼酸溶液中即可；
0.1mol/L的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液
按照GB622要求制備并標(biāo)定。
1.2主要儀器設(shè)備
粉碎機(jī)（德國Retsh公司 ZM100 篩孔0.25mm、0.50mm、0.75mm）、電子天平
感量0.0001g、可控溫電爐、可控溫干燥箱、全自動(dòng)定氮儀（丹麥 FOSS公司 Kjeltec 2300）、燒杯、玻璃棒、刻度吸管、三角漏斗、中速定量濾紙。
1.3試驗(yàn)方法
1.3.1
稱取試樣1g（精確至0.0002g）置250ml燒杯中，加水75ml煮沸，邊煮邊攪拌并不時(shí)加水使溶液體積不少于75ml，保持沸騰30分鐘。稍冷，慢慢滴加2.5%的氫氧化鈉溶液2ml邊加邊攪拌，再慢慢滴加10%的硫酸銅溶液5ml邊加邊攪拌；重復(fù)上述過程三次，每次加氫氧化鈉和硫酸銅溶液5～6ml，三次共計(jì)氫氧化鈉溶液18ml，硫酸銅溶液15ml。靜置陳化2小時(shí)以上或過夜[4]。
1.3.2
沉淀用中速定量濾紙采用傾瀉法過濾，用70℃以上熱水洗滌沉淀7-8次，直至用氯化鋇溶液檢驗(yàn)無硫酸根離子為止（接濾液數(shù)毫升，加鹽酸數(shù)滴，然后，加5%的氯化鋇溶液2ml，無渾濁和沉淀產(chǎn)生）；沉淀連同濾紙置75℃干燥箱中干燥1小時(shí)[4]。
1.3. 3
干燥后的沉淀連同濾紙一起放入消化管中,加入15ml濃硫酸，6.4g混合催化劑，按照GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》—— 凱氏定氮法進(jìn)行消解、蒸餾、測定其含氮量，然后，將結(jié)果乘以6.25即為試樣的真蛋白質(zhì)含量；同時(shí)做空白試驗(yàn)[4]。
本實(shí)驗(yàn)方法是在山東農(nóng)業(yè)大學(xué)王俊峰撰寫的《飼料中真蛋白質(zhì)含量的測定方法》和總結(jié)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上制定的，原方法在沉淀洗滌過程中存在一定缺陷，試驗(yàn)的成功率很低。筆者通過大量試驗(yàn)摸索出分次交替加入氫氧化鈉和硫酸銅溶液的方法，加快了沉淀的洗滌過程，大大提高了試驗(yàn)成功率，是沉淀法測定飼料中真蛋白質(zhì)的最佳方式。
2.試驗(yàn)結(jié)果與分析
2.1試驗(yàn)樣品的均勻性檢驗(yàn)
試驗(yàn)樣品的均勻性決定實(shí)驗(yàn)的成功與失敗，為了檢驗(yàn)試樣的均勻程度，按照GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》分別對4#、5#、6#試樣進(jìn)行粗蛋白質(zhì)測定，測定結(jié)果（以干物質(zhì)計(jì)）見表一。
表一：試驗(yàn)樣品粗蛋白含量
試樣編號
| 4#
| 5#
| 6#
|
粒度mm
| 0.25
| 0.50
| 0.75
|
粗蛋白質(zhì)
%
| 20.91
| 20.95
| 20.99
|
相對偏差
%
| 0.2
| 0
| 0.2
|
從表一看來，4#、5#、6#試樣之間的粗蛋白質(zhì)測定結(jié)果相差很小，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于方法標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的2%分析允許誤差，平均粗蛋白質(zhì)含量為20.95%。說明試驗(yàn)樣品混合均勻，4#、5#、6#樣品均勻一致沒有明顯的差異。
2.2不同試驗(yàn)條件對結(jié)果的影響
2.2.1試樣粉碎粒度對測定結(jié)果的影響
為了測試試樣粒度對真蛋白質(zhì)測定的影響，依法對不同粒度的4#、5#、6#樣品進(jìn)行真蛋白質(zhì)測定，測定結(jié)果（以干物質(zhì)計(jì)）見表二。
表二：粒度對測量結(jié)果的影響
試樣編號
| 4#
| 5#
| 6#
|
試樣粒度mm
| 0.25
| 0.50
| 0.75
|
真蛋白質(zhì)
%
| 19.80
| 19.73
| 19.77
|
相對偏差
%
| 0.2
| 0.2
| 0.0
|
由表二可知，三個(gè)粒度試樣的平均真蛋白質(zhì)含量為19.77%，其測定結(jié)果的分析誤差均在GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》規(guī)定的2%允許誤差范圍之內(nèi)。結(jié)果表明，粒度在0.25～0.75mm之間測試結(jié)果沒明顯差異?？紤]到樣品處理和沉淀洗滌等方面因素，筆者認(rèn)為試樣粉碎粒度以0.5mm為宜。
2.2.2試樣重量對測定結(jié)果的影響
為了研究樣品重量對真蛋白質(zhì)測定結(jié)果的影響，在其它條件不變的情況下，依法測定不同重量條件下6#樣品的真蛋白質(zhì)，測定結(jié)果（以干物質(zhì)計(jì)）見表三。
表三：試樣重對結(jié)果的影響
試樣重量g
| 0.25
| 0.50
| 1.00
| 2.00
|
真蛋白質(zhì)
%
| 19.90
| 19.75
| 19.72
| 19.75
|
相對偏差
%
| 0.6
| 0.2
| 0.3
| 0.2
|
從表三來看，試樣重量為0.25g時(shí)，測試結(jié)果較其他三個(gè)重量結(jié)果明顯偏高，但其他三個(gè)重量結(jié)果沒有明顯差異。而這個(gè)結(jié)果（19.90%）與最低結(jié)果（19.72%）比較仍在GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》規(guī)定的2%的允許相對偏差范圍之內(nèi)。表明試樣重量在0.25～2g之間對測試結(jié)果影響不大?？紤]到分析誤差、標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液消耗等方面因素，筆者認(rèn)為試樣重量以0.5～1g為宜。
2.2.3 氫氧化鈉溶液用量對測定結(jié)果的影響
氫氧化鈉溶液在試驗(yàn)中的作用，一方面有助于試樣中的蛋白質(zhì)溶出，另一方面為蛋白質(zhì)變性凝結(jié)提供堿性環(huán)境，那么，氫氧化鈉的多少是否會(huì)對試驗(yàn)結(jié)果造成影響呢？在其他條件不變的情況下，使用不同體積的氫氧化鈉溶液條件依法對5#樣品進(jìn)行測定，測定結(jié)果（以干物質(zhì)計(jì)）見表四。
表四：氫氧化鈉溶液用量對結(jié)果的影響
氫氧化鈉ml
| 18
| 20
| 23
| 25
|
真蛋白質(zhì) %
| 19.63
| 19.77
| 19.95
| 19.38
|
相對偏差 %
| 0.8
| 0.1
| 0.9
| ——
|
從表四看來，隨著氫氧化鈉溶液使用量的增加，試樣的真蛋白質(zhì)測定結(jié)果增加到一定程度后就不再增加反而降低，但18mL、20mL、23mL三個(gè)不同使用量的測定結(jié)果相差不大，其分析誤差均在GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》規(guī)定的2%允許相對偏差范圍之內(nèi)。表明氫氧化鈉溶液使用量雖然對測定結(jié)果有一定影響，但影響不大可以忽略。試驗(yàn)中我們還發(fā)現(xiàn)，隨著氫氧化鈉溶液用量的增加，沉淀洗滌時(shí)過濾的速度逐漸下降，這可能與硫酸銅的相對量不足有關(guān)?？紤]到分析方法的實(shí)用性和可操作性，筆者認(rèn)為選擇20mL的氫氧化鈉溶液用量比較理想。
2.2.4硫酸銅溶液用量對結(jié)果的影響
硫酸銅在試驗(yàn)中為蛋白質(zhì)變性提供重金屬離子，在反應(yīng)中起重要作用。為了探索硫酸銅溶液使用量對測定結(jié)果的影響，在其它條件不變的前提下，選擇不同體積的硫酸銅溶液使用量依法對5#樣進(jìn)行測定，測定結(jié)果（以干物質(zhì)計(jì)）見表五。
表五：硫酸銅溶液用量對結(jié)果的影響
硫酸銅量
ml
| 18
| 20
| 23
| 25
|
真蛋白質(zhì)
%
| 19.88
| 19.77
| 19.64
| 19.53
|
相對偏差
%
| 0.9
| 0.4
| 0.3
| 0.9
|
表五結(jié)果顯示，隨著硫酸銅溶液使用量增加，試樣真蛋白質(zhì)測定結(jié)果呈下降趨勢，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)隨著硫酸銅用量增加，洗滌時(shí)過濾速度有所加快。同樣就分析誤差來講，四個(gè)不同體積的硫酸銅溶液的測定結(jié)果均在GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》規(guī)定的2%允許相對偏差范圍之內(nèi)。說明硫酸銅溶液的使用量雖然對測定結(jié)果有一定影響，但影響并不大。從分析方法的實(shí)用性和可操作性角度出發(fā)，筆者認(rèn)為，選擇20mL的硫酸銅溶液用量比較適宜。
2.2.5試樣煮沸時(shí)間對測定結(jié)果的影響
煮沸是為了促進(jìn)試樣中的蛋白質(zhì)溶解。為了研究試樣煮沸時(shí)間對真蛋白質(zhì)測定結(jié)果的影響，在其他條件不變的情況下，選取20min、30min和40min三個(gè)時(shí)間段依法對6#樣品進(jìn)行測定，測定結(jié)果（以干物質(zhì)計(jì)）見表六。
表六：煮沸時(shí)間對結(jié)果的影響
煮沸時(shí)間min
| 20
| 30
| 40
|
真蛋白質(zhì)
%
| 19.66
| 19.72
| 19.51
|
相對偏差
%
| 0.2
| 0.5
| 0.6
|
從表六可以看出，試樣的煮沸時(shí)間對測定結(jié)果有一定的影響，但影響不大，分析誤差在GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》規(guī)定的誤差范圍之內(nèi)，當(dāng)煮沸時(shí)間為30min時(shí)測定結(jié)果最高，因此，試樣煮沸時(shí)間以30min為宜。
2.2.6
沉淀洗滌溫度對測定結(jié)果的影響
洗滌是為了除去試樣中的非蛋白氮成分，是試驗(yàn)的關(guān)鍵步驟。為了了解沉淀洗滌溫度對測定結(jié)果的影響，在其他條件不變的情況下，使用不同的洗滌溫度依法對4#樣品進(jìn)行測定，測定結(jié)果（以干物質(zhì)計(jì)）見表七。
表七洗滌溫度對測定結(jié)果的影響
洗滌溫度℃
| 60-70
| 70-80
| 80以上
|
真蛋白質(zhì)
%
| 19.76
| 19.77
| 19.84
|
相對偏差
%
| 0.2
| 0.1
| 0.3
|
從表七測試結(jié)果來看，三個(gè)溫度段的測定結(jié)果均在GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》規(guī)定的2%分析誤差范圍之內(nèi)，而且結(jié)果基本一致，也就是說洗滌溫度對測定結(jié)果影響不大。但試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)洗滌用水的溫度在80℃以上時(shí)沉淀洗滌速度明顯快于其他兩個(gè)溫度段。因此，洗滌用水溫度選擇80℃以上較為合適。
2.3驗(yàn)證試驗(yàn)
為了驗(yàn)證試驗(yàn)方法的可行性和可靠性，檢驗(yàn)人為添加非蛋白氮物質(zhì)條件下本試驗(yàn)方法的適用性，我們組織了非蛋白氮物質(zhì)添加試驗(yàn)。添加物分別為硫酸銨、尿素和目前大家普遍關(guān)注的三聚氰胺等，試驗(yàn)結(jié)果如下：
2.3.1硫酸銨對測定結(jié)果的影響，
為了檢驗(yàn)在添加硫酸銨條件下本試驗(yàn)方法的適用性，以5#樣為基礎(chǔ)添加硫酸銨，硫酸銨添加量為1.5021%，硫酸銨的含氮量為21.19%，添加后試樣增加粗蛋白質(zhì)1.7%，按照GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》和本試驗(yàn)方法分別對其進(jìn)行粗蛋白質(zhì)和真蛋白質(zhì)測定，相關(guān)數(shù)據(jù)和測定結(jié)果見表八。
表八：硫酸銨添加試驗(yàn)結(jié)果
測定項(xiàng)目
| 原樣
| 添加樣
|
理論值
| 測定值
| 相對誤差
|
粗蛋白質(zhì)%
| 18.73
| 20.43
| 20.24
| 0.9%
|
真蛋白質(zhì)%
| 17.64
| 17.38
| 17.11
| 1.3%
|
從表八可以看出，無論是粗蛋白質(zhì)還是真蛋白質(zhì)的測定結(jié)果其相對誤差均小于2.0%，與理論值基本一致。表明在試樣中添加硫酸銨不會(huì)影響試樣真蛋白質(zhì)測定結(jié)果，也就是說本試驗(yàn)方法可以避免硫酸銨的干擾，適合于含有硫酸銨的飼料產(chǎn)品測定。
2.3.2添加尿素對測定結(jié)果的影響，
為了檢驗(yàn)?zāi)蛩貙υ嚇又姓娴鞍踪|(zhì)測定的影響，以4#樣為基礎(chǔ)進(jìn)行尿素添加試驗(yàn)，尿素添加量為1.8035%，尿素含氮量為46.6%，添加后粗蛋白質(zhì)增加4.76%，按照GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》和本試驗(yàn)方法分別對其進(jìn)行粗蛋白質(zhì)和真蛋白質(zhì)測定，相關(guān)數(shù)據(jù)和測定結(jié)果見表九。
表九：尿素添加試驗(yàn)結(jié)果
測定項(xiàng)目
| 原樣
| 添加樣
|
理論值
| 測定值
| 相對誤差
|
粗蛋白質(zhì)%
| 18.86
| 23.62
| 23.59
| 0.1%
|
真蛋白質(zhì)%
| 17.86
| 17.53
| 17.24
| 1.7%
|
由表九可知，添加尿素后其粗蛋白測定值相對于理論值的誤差均小于2.0%，真蛋白質(zhì)測定結(jié)果接近理論值，稍微偏低。表明在試樣中添加尿素不會(huì)干擾試樣中真蛋白質(zhì)的測定；說明本試驗(yàn)方法適用于添加了尿素的飼料產(chǎn)品測定。
2.3.3添加三聚氰胺對測定結(jié)果的影響，
為了驗(yàn)證試樣中添加的三聚氰胺是否對真蛋白質(zhì)測定造成影響，以4#樣為基礎(chǔ)進(jìn)行三聚氰胺添加試驗(yàn)，三聚氰胺添加量為0.4813%，三聚氰胺的含氮量為66.6%，添加三聚氰胺后試樣的粗蛋白質(zhì)增加1.91%，按照GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》和本試驗(yàn)方法分別對其進(jìn)行粗蛋白質(zhì)和真蛋白質(zhì)測定，相關(guān)數(shù)據(jù)和測定結(jié)果見表十。
表十：三聚氰胺添加試驗(yàn)結(jié)果
測定項(xiàng)目
| 原樣
| 添加樣
|
理論值
| 測定值
| 相對誤差
|
粗蛋白質(zhì)%
| 18.81
| 20.72
| 20.85
| 0.6%
|
真蛋白質(zhì)%
| 17.92
| 17.83
| 17.87
| 0.2%
|
從表十可以看出，添加三聚氰胺后試樣的粗蛋白質(zhì)和真蛋白質(zhì)測定結(jié)果與理論值非常接近。這說明本試驗(yàn)方法適用于添加了三聚氰胺的飼料產(chǎn)品的測定，三聚氰胺不會(huì)干擾真蛋白質(zhì)的測定結(jié)果。
2.3.4不同類型飼料的真蛋白質(zhì)測定
為了驗(yàn)證本試驗(yàn)方法對不同類型飼料真蛋白質(zhì)測定的適用性，選取配合飼料、濃縮飼料、豆粕、棉粕、進(jìn)口魚粉和國產(chǎn)魚粉，按照GB/T 6432《飼料中粗蛋白測定方法》和本試驗(yàn)方法分別對其進(jìn)行粗蛋白質(zhì)和真蛋白質(zhì)測定，測定結(jié)果見表十一。
表十一
不同種類飼料的真蛋白質(zhì)測定結(jié)果
飼料種類
| 配合飼料☆
| 豬濃縮料
| 豆粕☆
|
粗蛋白質(zhì)%
| 20.95
| 40.58
| 52.91
|
真蛋白質(zhì)%
| 19.73
| 36.72
| 51.57
|
飼料種類
| 進(jìn)口魚粉☆
| 國產(chǎn)魚粉※
| 棉粕☆
|
粗蛋白質(zhì)%
| 64.19
| 63.73
| 39.43
|
真蛋白質(zhì)%
| 57.27
| 53.20
| 38.12
|
注：※三聚氰胺檢測陽性；☆三聚氰胺檢測陰性。
從表十一結(jié)果可以看出，配合飼料、豆粕、棉粕三聚氰胺檢測陰性，粗蛋白質(zhì)和真蛋白質(zhì)測定結(jié)果相差不大；國產(chǎn)魚粉三聚氰胺檢出陽性，真蛋白質(zhì)和粗蛋白質(zhì)測定結(jié)果相差超過10%，說明三聚氰胺不會(huì)干擾真蛋白質(zhì)測定。進(jìn)口魚粉雖然三聚氰胺檢測陰性，但粗蛋白質(zhì)和真蛋白質(zhì)測定結(jié)果相差也很大，分析其原因可能與魚粉的新鮮程度和腐敗程度有關(guān)，但也不排除其他因素。試驗(yàn)結(jié)果表明，本試驗(yàn)方法適用于不同類型的飼料真蛋白質(zhì)測定，而且，本試驗(yàn)方法能夠區(qū)別飼料中是否含有非蛋白氮成分。
3.結(jié)論
3.1
在沉淀法測定飼料中真蛋白質(zhì)的過程中，氫氧化鈉和硫酸銅溶液的加入順序、使用量直接影響真蛋白質(zhì)測定過程和結(jié)果，分次交替加入氫氧化鈉和硫酸銅溶液的方法是沉淀法測定真蛋白質(zhì)最佳選擇。
3.2
沉淀法測定飼料中真蛋白質(zhì)的最適宜條件為試樣粉碎粒度0.5mm、試樣重量以0.5～1g、試液煮沸時(shí)間30min，氫氧化鈉溶液和硫酸銅溶液用量均為20mL，沉淀洗滌用水溫度80℃以上。
3.3
本試驗(yàn)方法能夠排除非蛋白氮對飼料中真蛋白質(zhì)測定的干擾，適用于含有硫酸銨、尿素和三聚氰胺等非蛋白氮物質(zhì)的飼料真蛋白質(zhì)檢測。
3.4
本試驗(yàn)方法適用于配合飼料、濃縮飼料、豆粕、棉粕、魚粉等各種類型的飼料真蛋白質(zhì)檢測。
參考文獻(xiàn)：
[1]
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《飼料工業(yè)通用術(shù)語》（GB 10647—1989）.
[2] 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《飼料中粗蛋白質(zhì)測定方法》（GB/T6432—1994）.
[3]
李靖靖等,《有機(jī)化學(xué)》 “十一五”國家規(guī)劃教材，化學(xué)工業(yè)出版社 .
[4]
王俊鋒 ,《飼料中真蛋白質(zhì)含量的測定方法》 《廣東飼料》第十三卷第六期，2004年12月.
作者: zhoushun 時(shí)間: 2009-7-20 09:35
像這樣的基礎(chǔ)研究我們國家做的不多，實(shí)際我們的檢測方法也應(yīng)該與時(shí)俱進(jìn)、不斷創(chuàng)新，更好的為行業(yè)帶來方便。感謝樓主的無私分享！收藏了。
作者: fengyuyuan168 時(shí)間: 2009-7-21 09:15
這個(gè)在很早之前我們就在用了，是不是很早就有這種測真蛋白的方法啊。
作者: 實(shí)在是高 時(shí)間: 2009-7-21 10:45
真好，可以不花錢，還能收藏，學(xué)習(xí)好的東西，愿大家都應(yīng)該這樣無私的奉獻(xiàn)資源
作者: 福天來 時(shí)間: 2009-7-21 11:22
學(xué)習(xí)了。謝謝樓主的
[ts]福天來 于 2009-7-21 11:22 補(bǔ)充以下內(nèi)容[/ts]
學(xué)習(xí)了。謝謝樓主的
作者: glory143 時(shí)間: 2009-7-21 14:49
想問一下,后面添加各種攙假物實(shí)驗(yàn),表中的真蛋白的理論值是怎么算出來的??
作者這種做研究的態(tài)度還是很值得肯定的,但是有些結(jié)論下的說服力不夠,呵呵
作者: 馮春偉 時(shí)間: 2009-7-21 16:58
我現(xiàn)在都不用沉沉淀法測定飼料中真蛋白質(zhì)，可以用三氯乙酸法，要快些
作者: 徒兒 時(shí)間: 2009-7-21 22:43
三聚氰胺不是不溶于水嗎？沉淀法如何排除它對真蛋白的干擾？
作者: xmc019 時(shí)間: 2009-7-22 13:15
先給樓主的帖子頂一下，順便收藏來學(xué)習(xí)。
有更好的方法嗎？應(yīng)該有，也希望能知道更優(yōu)秀的方法。
作者: l_anna 時(shí)間: 2010-3-24 15:52
這個(gè)總結(jié)的真是太全面了,很好很強(qiáng)大
謝謝樓主
作者: 燃燒的麥田 時(shí)間: 2010-3-26 22:02
不錯(cuò) 收藏 正好做這個(gè)真蛋白
[ts]燃燒的麥田 于 2010-3-26 22:11 補(bǔ)充以下內(nèi)容[/ts]
不錯(cuò) 收藏 正好做這個(gè)真蛋白
作者: liyi11 時(shí)間: 2010-3-26 22:14
對原料的檢測應(yīng)該走在摻假的前面。這樣才能做好品控。
作者: 我愛百事可樂 時(shí)間: 2010-3-28 17:17
謝謝樓主的分享喔！學(xué)習(xí)啦！
作者: 藍(lán)天白云2 時(shí)間: 2010-5-3 19:29
有時(shí)間試一下看看有沒有差別，謝謝樓主分享:victory:
作者: 呂珊珊 時(shí)間: 2010-5-17 15:51
有很大的收獲，謝謝！
作者: daiyou 時(shí)間: 2010-5-18 14:45
三氯乙酸法與沉淀法哪個(gè)更好些？
作者: xmhua 時(shí)間: 2010-7-11 11:59
希望檢測方法能不斷更新，與時(shí)俱進(jìn)。
作者: 1104150341 時(shí)間: 2013-12-19 16:28
請教一下，是稍冷，交替加入氫氧化鈉和硫酸銅，還是邊煮邊加？
作者: 1104150341 時(shí)間: 2013-12-26 15:15
很強(qiáng)大，但有個(gè)問題，
稱取試樣1g（精確至0.0002g）置250ml燒杯中，加水75ml煮沸，邊煮邊攪拌并不時(shí)加水使溶液體積不少于75ml，保持沸騰30分鐘。稍冷，慢慢滴加2.5%的氫氧化鈉溶液2ml邊加邊攪拌，再慢慢滴加10%的硫酸銅溶液5ml邊加邊攪拌；重復(fù)上述過程三次，每次加氫氧化鈉和硫酸銅溶液5～6ml，三次共計(jì)氫氧化鈉溶液18ml，硫酸銅溶液15ml。靜置陳化2小時(shí)以上或過夜[4]。
問什么是稍冷呢，不是邊煮邊加的嗎？
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