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畜牧人

標題: 也求飼料淀粉糊化度的測定方法 [打印本頁]

作者: lhwqq_71 時間: 2009-7-14 13:27
標題: 也求飼料淀粉糊化度的測定方法
也求飼料淀粉糊化度的測定方法，沒銀子了，請聯系[email=lhwqq_71@QQ]QQ[/email]：93318291.在線等

作者: ljs3611 時間: 2009-7-14 14:19
張麗英老師編的《飼料中分析及飼料質量檢測技術》一書中有，不過我沒有電子版的，呵呵，沒法給你寫了，你可以去網上找找

作者: sunmy888 時間: 2009-7-14 14:23
熟化度的測定
1設備
天平，靈敏度0.001g；
恒溫水浴；
分光光度計。
2試劑
緩沖液：將3.7ml冰醋酸和4.1g無水乙酸鈉（或6.8gNaC2H3O2.3H2O）溶于100ml蒸餾水中，定容至1立升，必要時可滴加乙酸或乙酸鈉調整pH值至4.5±0.05.
酶溶液：將750ml脫支酶（amyloglucosidase,No.A-7255,濃度12100單位/g）溶于50ml蒸餾水。此溶液含粗制酶15mg（或180單位/ml）。測試當天配制。
蛋白質沉淀劑：1、ZnSO4.7H2O,10%（w/v）蒸餾水溶液；2、0.5N NaOH。
銅試劑：將40g無水Na2CO3溶于大致400ml蒸餾水中，加7.5g酒石酸，溶解后加4.5g CuSO4.5H2O。混合并稀釋至1立升。
磷鉬酸試劑：取70g鉬酸和10g鎢酸鈉，加入400ml10%NaOH和400ml蒸餾水。煮沸20-40min以驅趕NH3。冷卻，加蒸餾水至大約700ml，加250ml濃的正磷酸（85%H3PO4），用蒸餾水稀釋至1立升。
葡萄糖標準液：溶解100mg純葡萄糖于70ml蒸餾水中，稀釋至100ml。測試當天配制。
3操作步驟
1.先將風干樣品細磨碎使全部通過1mm篩。再根據樣品含淀粉程度不同，準確稱取兩份樣品各100mg（純淀粉）、或各150mg（樣品淀粉含量60%以上）、或各200mg（樣品淀粉含量30-60%）、或各300mg（樣品淀粉含量15-30%）、或各400mg（樣品淀粉含量15%以下），分別置于25ml刻度試管內。其中一份供制備“全糊化樣品”。用自來水冷卻試管，滴加適量蒸餾水使液面恢復到加熱前的位置。與“測定樣品”一起進行以下步驟。
2.向“測定樣品”中加入15ml緩沖液。分別向“全糊化樣品”與“測定樣品”中加入1ml酶溶液。另取一空試管加入15ml緩沖液和1ml酶溶液，做為“空白”。在40℃水浴中保溫1h，起初搖動一次，以后每15min搖動一次。
3.保溫達1h時，加2ml 10% ZnSO4.7H2O，混勻，再加1ml 0.5N NaOH。用水稀釋至25ml，混勻，過濾（用Whatman#40濾紙）。
4.準確吸取0.1ml濾液和2ml銅試劑，置于25ml刻度試管中。
5.將該試管置沸水浴中6min，保持沸騰，加2ml磷鉬酸試劑，繼續加熱2min。
6.用自來水令試管冷卻。加蒸餾水稀釋至25ml，堵住試管口（可用手套的拇指或手掌），反復顛倒試管使之混勻。
7.用分光光度計在420nm讀取吸收值。
8.測定樣品淀粉糊化（熟化）度的計算：
糊化（熟化）度（%）=（測定樣品光吸收-空白光吸收）/（全糊化樣品光吸收-空白光吸收）*100%
如要得知樣品的葡萄糖釋放量和淀粉含量，則需增加以下步驟：
9.建立葡萄糖標準曲線：吸取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml標準葡萄糖溶液（1mg/ml）分別置于各有2ml銅試劑的試管中。按第4至第7步驟得出葡萄糖標準曲線。當樣品稱取量為200mg時，這些試管分別代表每克樣品含葡萄糖0、125、250、375、500、625、750mg的濃度。
10. 樣品葡萄糖釋放量和淀粉含量的計算：
樣品葡萄糖釋放量（mg/g）=(測定樣品葡萄糖值*-空白葡萄糖值*)*200/稱取樣品量（mg）
樣品淀粉含量（mg/g）=（全糊化樣品葡萄糖值*-空白葡萄糖值*）*0.9*200/稱取樣品量（mg）
（*根據光吸收從葡萄糖標準曲線查找）。

作者: ljs3611 時間: 2009-7-14 14:35
樓上是美國大豆協會熊博士根據美國化驗方法簡化的一個簡易方法啊

作者: sunmy888 時間: 2009-7-14 15:17
4# ljs3611
我們實驗室就是采用這個方法來做的。

作者: ljs3611 時間: 2009-7-14 15:19
是的，我們也用過，不過還是用哪種方法的時候多，呵呵 5# sunmy888

作者: glory143 時間: 2009-7-14 16:22

引用自ljs3611 發表于 2009-7-14 15:19的內容
是的，我們也用過，不過還是用哪種方法的時候多，呵呵 5# sunmy888

脫支酶現在還有的買嗎???SIGMA不是已經停產這個酶了嗎?

作者: glory143 時間: 2009-7-14 17:37
B淀粉酶各位都是哪里買的啊 ??好象質量差異很大啊

作者: 水本無味 時間: 2009-7-15 15:18
糊化度測得都不怎么準確,怎么保證準確啊

作者: poplar 時間: 2009-7-31 13:33
我正準備用這個方法，請問，脫支酶在哪買呢？我還沒找到，我在上海，
在線等，謝謝了！

作者: wangxinna 時間: 2009-8-6 14:10
其實沒有必要這么麻煩，我們這里有一款糧食運動粘度計，就是采用的毛細管的糊化原理來檢測，糧食、飼料、淀粉的的儲藏品質和陳化度的。如有興趣可以加我QQ：303720357

作者: zm19862009 時間: 2010-10-8 16:50
樓上說的儀器的有人用過沒有？效果怎么樣？

作者: amypx 時間: 2010-10-8 17:02
回復 2# ljs3611

能把張麗英老師編的《飼料中分析及飼料質量檢測技術》電子版一書，給我發一份么，謝謝
amypx@163.com

[ts]amypx 于 2010-10-8 17:09 補充以下內容[/ts]

關注一下

作者: 340220754 時間: 2010-10-12 10:36
步驟太繁瑣啦

歡迎光臨畜牧人 (http://www.www12347.com/)

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