<strike id="imseu"></strike>

畜牧人

標題: 討論一下酶標儀檢測三聚氰胺的實驗方法的準確性 [打印本頁]

作者: wanglinlin 時間: 2008-12-2 12:09
標題: 討論一下酶標儀檢測三聚氰胺的實驗方法的準確性
我最近用酶標儀做了幾次檢測三聚氰胺的實驗，試劑盒里的標準樣品在規定范圍內，可是樣品的數據差別較大，請問有哪位也做過這個實驗，交流一下可以嗎？

作者: chen98448 時間: 2008-12-2 13:45
呵呵，好象Cargill現在也在用這種方法，準確性到底怎么樣還不清楚，我們也想買！！

作者: wanglinlin 時間: 2008-12-2 14:19
我們也剛做了幾個樣品，成本太高了，一個試劑盒做不了幾個樣品，平均一次實驗就得一千多塊錢，做這樣的實驗實在點奢侈

作者: 月亮花 時間: 2008-12-2 23:41
你的試劑盒也太貴了吧,一般96個板孔的才不到4000元的,刨去標準4個,可以做不少的,不做重復做的更多.
去年我們就使用了測定大量的飼料原料.
假陽性主要與樣品的酸堿度有關.酸性的原料或在提取時使用酸性甲醇提取時會出現假陽性的.需要具體情況可交流.

作者: wanglinlin 時間: 2008-12-3 09:47
請問月亮花，我們是72孔的，你們買得哪個生產廠家的試劑盒？我們買得是北京的，
還有標準品數量是有限的，如果藥品用完了，還有板孔怎么辦？（不是說同一試劑盒里是配套的，不能和其他的試劑盒混用嗎？）

作者: wanglinlin 時間: 2008-12-3 09:49
不好意思剛才看錯了，也是96孔的

作者: glory143 時間: 2008-12-3 14:34
我們也準備做呢，用的美國的BEACON的
等出了結果再討論

作者: glory143 時間: 2008-12-3 14:35
對了，大家能不能把前處理的方法都貼出來啊？？我發現很多公司提供的方法都是不一樣的，大家可以討論下方法

作者: glory143 時間: 2008-12-3 14:42
拿提取溶劑來說，有的用60%的甲醇/水，有的用純甲醇，有的用純20mMPBS，真是五花八門
各位都用的什么？

作者: 柳粒橙 時間: 2008-12-3 14:54
不知道這種方法的準確性怎樣？我公司也打算做，而且有許多公司在推銷試劑盒，我還是擔心這個試劑盒方法的準確率。因為以前我發現用試劑盒的方法測定毒素，其穩定性不怎么好，準確率不高，也不知道是什么原因？

作者: wanglinlin 時間: 2008-12-3 16:37
我用的60%甲醇提取液

作者: wanglinlin 時間: 2008-12-3 16:40
我們初步來做穩定性不是很好，準確率因實驗的次數太少現在很難說，我再多做幾次后，和大家交流吧相信會有結果的

作者: 月亮花 時間: 2008-12-3 22:15

原帖由 wanglinlin 于 2008-12-3 09:47 發表
請問月亮花，我們是72孔的，你們買得哪個生產廠家的試劑盒？我們買得是北京的，
還有標準品數量是有限的，如果藥品用完了，還有板孔怎么辦？（不是說同一試劑盒里是配套的，不能和其他的試劑盒混用嗎？）

一般標準品夠用的，如果你每次都使用重復標準而且次數多，可能會不夠。同一批次的標準可以混用的，用不完的板條只要和標準的板條一樣，結果沒有多大影響的，因為使用的是相對比值。

我們的盒子是美國產的，也是北京的代理商買的。

我每次就做一個板孔，不重復的，包括標準，你可以通過與標準顏色的差異大體判斷污染情況。

當然由于一切影響抗體和酶結合的因素會影響結果如酸、堿、強離子、溫度會對結果有影響。還有，提取方法中提取率也是一個問題，不能使用液相或液質類似的方法提取，單純的甲醇或60%甲醇水提取率不高，如果樣品與提取液的比例不當，也不能完全提取出。如果使用含有酸的提取液，或樣品酸性強，會造成假陽性，而堿性的樣品會造成假陰性。

我們花了很多時間和錢財才搞清這些問題。

作者: chenchen123 時間: 2008-12-4 08:39
我們送檢測部門檢測，同一個樣檢出不同的判斷結果，弄得我們都不知道怎么判定，最后只好再花大價錢定量檢測了。

作者: whm0728 時間: 2008-12-4 10:46
@@004: @@004: 有點亂，有點亂。
可惡的三聚氰胺。

作者: wanglinlin 時間: 2008-12-4 11:27
請問月亮花,能把你的提取方法的過程詳細說一下嗎?謝謝

作者: wanglinlin 時間: 2008-12-4 11:45
請問月亮花,能把你們提取方法過程詳細的說一上嗎?
還有酶標儀在讀數時,讀完一遍后重新讀時發現數據就有變化,(中間間隔3-5分鐘) 是怎么回事?

作者: 月亮花 時間: 2008-12-4 18:45

原帖由 wanglinlin 于 2008-12-4 11:27 發表
請問月亮花,能把你的提取方法的過程詳細說一下嗎?謝謝

我們目前使用純甲醇按1：10提取，然后取100微升再稀釋10-20倍，這樣2-50ppm的污染大體就可以測定了。需要有空白和陽性對照以控制檢測質量。
由于是顯色反應，色源物質會在一定時間內發生變化的，可以立即讀數，發生變化也不影響結果，因為要根據標準曲線及吸光度相對比值計算結果的。

作者: cuger-321 時間: 2008-12-4 19:40
請教月亮花：當你們遇到假陽性怎么辦呢？在操作中能否避免假陽性？知道的朋友可以研究哈；

作者: cuger-321 時間: 2008-12-4 19:45
我們剛測的時候也遇到不少問題，電話質詢了BEACON的試劑盒公司，針對干寵物飼料提供了新的萃取方法，明天發給大家哈，

作者: wanglinlin 時間: 2008-12-5 15:11
請教月亮花。酶標儀使用前需要預熱嗎？

作者: wanglinlin 時間: 2008-12-5 15:26
月亮花，可不可以把你具體實驗操作步驟給貼下來，（物別是每一步需注意的事項）特別是空白等對照實驗，（因為我今天又做了一遍標準還行，可以其他的樣品數據有點不太可信）。

還有，酶標儀在使用前需要預熱嗎？

不好意思麻煩了

作者: 月亮花 時間: 2008-12-6 14:42

原帖由 cuger-321 于 2008-12-4 19:40 發表
請教月亮花：當你們遇到假陽性怎么辦呢？在操作中能否避免假陽性？知道的朋友可以研究哈；

為避免假陽性，要對不同的樣品分類檢測，根據已經確定有或沒有污染的樣品進行檢測，檢查造成假陽性的原因。一般是槍頭污染、提取管污染、提取方法污染及提取液本身造成等原因。

作者: 月亮花 時間: 2008-12-6 14:46

原帖由 wanglinlin 于 2008-12-5 15:11 發表
請教月亮花。酶標儀使用前需要預熱嗎？

應該預熱至少半小時吧，以便光源穩定設備處于良好狀態。

歡迎光臨畜牧人 (http://www.www12347.com/)

主站蜘蛛池模板：成武县| 永新县| 虎林市| 蓬溪县| 芦山县| 闵行区| 济源市| 平乡县| 绥滨县| 汉寿县| 麻江县| 甘谷县| 贵港市| 阳江市| 仁寿县| 山阴县| 金寨县| 志丹县| 金秀| 响水县| 镇原县| 西昌市| 洛隆县| 靖安县| 安乡县| 精河县| 温州市| 临沂市| 巴彦淖尔市| 南投市| 鄢陵县| 普洱| 凤凰县| 麻城市| 张北县| 泰和县| 防城港市| 宝丰县| 浦北县| 金塔县| 神池县|