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    畜牧人

    標題: 求助:豆粕中真蛋白的測定 [打印本頁]

    作者: jku002    時間: 2007-12-21 08:51
    標題: 求助:豆粕中真蛋白的測定
    請問大家一下:豆粕中真蛋白的測定方法?還有一般豆粕中真蛋白的含量是多少?
    作者: yxy0725    時間: 2007-12-21 11:25
    1、原理
          硫酸銅在堿性溶液中,可將蛋白質沉淀,且不溶于熱水過濾和洗滌后,可將純蛋白質和非蛋白質含蛋物分離,再用凱氏定蛋法測定沉淀中的蛋白質含量。
    2、儀器設備
          (1)燒杯:200ml。
          (2)定性濾紙。
          (3)其他設備與粗蛋白質測定法的相同。
    3、試劑及配制
          (1)100g/L硫酸銅溶液:分析純硫酸銅(CuSO4&#8226;5H2O)10g溶于100mL蒸餾水中。
          (2)25g/L氫氧化鈉溶液:將2.5g分析純氫氧化鈉溶于100mL蒸餾水中。
                (3)10g/L氯化鋇溶液:1g氯化鋇(BaCl&#8226;H2O)溶于100mL蒸餾水中。
                (4)2moL/鹽酸溶液。
                (5)其他試劑預一般粗蛋白測定法的相同。
    4、測定步驟
                   準確稱取試樣1g左右(精確到0.0001g),置于200mL燒杯中,加50mL蒸餾水,加熱至沸,加入20mL硫酸銅溶液,20mL氫氧化鈉溶液(加入以上兩種溶液多要緩慢,且要邊加入邊攪拌),用玻璃棒充分攪拌,放置1h以上,用傾斜過濾(用定型濾紙),然活后用60~80℃熱蒸餾水洗滌沉淀5~6次,用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾液,直至不生成白色沉淀為止。將沉淀和濾紙放在65℃烘箱干燥2h,然后全部轉移到凱氏燒瓶中,消化后進行定蛋測定。
    5、結果計算
           同粗蛋白測定。
    作者: yxy0725    時間: 2007-12-21 11:27
    方法二:
        將樣品充分混勻后分成兩份,準確稱取。一份用于常規凱氏定氮法測定其粗蛋白質含量,將另一份加五倍(50ml)的三氯乙酸溶液(10%的水溶液)攪動,靜置10min后全部轉移到漏斗中過濾,再用五倍(50ml)三氯乙酸溶液洗滌濾渣兩遍,于105℃烘干按常規測定。
    作者: 馬前足    時間: 2007-12-21 11:51
    豆粕造假的也很多,應該加細檢驗.
    作者: 激光打印機    時間: 2007-12-21 23:58
    做真蛋白一般是為了防止摻假

    如果加入蛋白精之類的做真蛋白有用嗎?
    作者: jku002    時間: 2007-12-27 15:03
    測真蛋白,消化時好多泡沫都粘在消化管上,怎么辦阿
    作者: jku002    時間: 2008-1-2 08:36
    怎么沒人回答呢,自己頂一下,也祝大家新年快樂
    作者: yxy0725    時間: 2008-1-4 11:08
    以前遇到過油脂高的樣品泡沫多的情況,不知道你的是不是這個原因
    不知道可不可以加消泡劑,沒找到過這方面的東西~
    作者: 綠緣    時間: 2008-1-4 11:31
    我測豆粕的真蛋白的時候沒有泡沫啊,如果沾在瓶壁上的話可以在消化塊好的時候關了火冷卻了之后加水沖下去,然后再消化個把小時就好了。
    作者: 綠緣    時間: 2008-1-4 11:32
    泡泡也有可能使濾紙包導致的,剛加熱的時候火開小點。
    作者: demom0502    時間: 2008-1-4 12:17
    我們一般都測一下KOH溶解度來鑒別摻假
    作者: trssjc    時間: 2008-1-4 12:58
    同時測測氨基酸含量進行綜合評定.
    作者: dy3166    時間: 2008-1-4 20:41
    真蛋白硝化時出現起泡 是因為沒有將濾紙和樣品烘干,水分太高降低硫酸濃度引起的;如出現這種情況可取出稍冷后將用硫酸其沖下即可。
    作者: jku002    時間: 2008-1-9 09:13
    謝謝大家的幫忙,我又重新做了一下,把濾紙和樣品哄的很干,所以沒泡沫了,呵呵,不過還有個問題請教大家,我測的發酵豆粕的真蛋白比粗蛋白低3-4個點,這算正常嗎?
    作者: xlm1985ok    時間: 2008-9-21 11:35
    方法說略潮,BaCl2溶液滴加在濾紙上檢測硫酸根離子嗎
    作者: xlm1985ok    時間: 2008-9-21 11:39
    檢測硫酸根離子時加一滴鹽酸是保持在酸性環境嗎
    作者: xlm1985ok    時間: 2008-11-2 20:48
    我烘了一夜第二天消化時氣泡還是很多,請大家把側粗蛋白的方法上傳一下,可能溫度和試劑量還有不同吧,共同學習一下吧
    作者: litonggang    時間: 2008-12-23 10:19
    標題: 回復 17樓 xlm1985ok 的帖子
    l老兄,您好!能告訴我豆粕蛋白質溶解度的測定方法嗎,謝謝!我郵箱是litonggang111@163.com
    作者: 風落沙情    時間: 2008-12-27 21:25
    測KOH溶解度鑒別不了摻假吧,那只是用來作豆粕的加工是否過生或過熟的指標。
    作者: 風落沙情    時間: 2008-12-27 21:27
    真蛋白比粗蛋白低3-4個點有點不太正常,我測的真蛋白一般都以比粗蛋白低一個點左右,相差最大的一次也不到兩個點。
    作者: yhhxj888    時間: 2009-8-11 11:23
    20# 風落沙情

    [ts]yhhxj888 于 2009-8-11 11:25 補充以下內容[/ts]

    烘干后消化前不要加催化劑先消化1個小時,再冷卻后加催化劑消化就不會有泡了。。希對你有助。
    作者: jiangchangde    時間: 2010-5-2 09:29
    回復 14# jku002
    發酵豆粕中的真蛋白不包括氨基酸吧,應該水解的了一部分,是正常的吧!




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